AP—4、EZH2基因表達量與子宮內膜癌病灶中細胞凋亡、上皮間質轉化的相關性研究

季福水

摘 要：目的 研究AP-4、EZH2基因表達量與子宮內膜癌病灶中細胞凋亡、上皮間質轉化的相關性。方法 回顧分析2017年1月～2018年1月在我院進行切除術治療的35例子宮內膜癌患者臨床資料，收集子宮內膜癌病灶和癌旁病灶適量，提取RNA后分別測定AP-4、EZH2基因表達量，進一步測定病灶中細胞凋亡、上皮間質轉化基因的表達量。結果 子宮內膜癌病灶內AP-4、EZH2基因表達量高于癌旁病灶，差異有統計學意義（P<0.05）；子宮內膜癌病灶內SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達量高于癌旁病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin的mRNA表達量低于癌旁病灶；AP-4高表達病灶內SRPX2、RLIP76的mRNA表達量高于低表達病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達量低于AP-4低表達病灶；EZH2高表達病灶內ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達量高于EZH2低表達病灶，α-catenin的mRNA表達量低于EZH2低表達病灶。結論 宮內膜癌病灶內AP-4、EZH2基因高表達量，可以抑制癌細胞凋亡、促進癌細胞上皮間質轉化，值得臨床予以重視和關注。

關鍵詞：AP-4、EZH2基因；子宮內膜癌；細胞凋亡；上皮間質轉化

中圖分類號：R737.33 文獻標識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.14.026

文章編號：1006-1959（2018）14-0092-03

Abstract：Objective To investigate the correlation between the expression of AP-4 and EZH2 gene and apoptosis and epithelial-mesenchymal transition in endometrial cancer.Methods The clinical data of 35 patients with endometrial cancer who underwent resection in our hospital from January 2017 to January 2018 were retrospectively analyzed.Endometrial cancer lesions and adjacent lesions were collected.After RNA extraction，AP-4 was determined.The expression level of EZH2 gene was further measured in the lesions and the expression level of epithelial-mesenchymal transition genes.Results The expression of AP-4 and EZH2 in endometrial cancer lesions was higher than that in adjacent lesions，and the difference was statistically significant（P<0.05）.The mRNA expression levels of SRPX2，RLIP76，ZEB1，SALL4，TET1，RANKL and N-cadherin in endometrial cancer lesions were higher than those in adjacent lesions，and the mRNA expression levels of Fat-1，ITLN-1，Caspase-3 and α-catenin were higher.The mRNA expression levels of Fat-1，ITLN-1，Caspase-3 and α-catenin were lower than those of adjacent lesions.The mRNA expression of SRPX2 and RLIP76 in AP-4 high expression lesions was higher than that of low expression lesions，Fat-1 and ITLN.-1，Caspase-3 mRNA expression was lower than AP-4 low expression lesion；EZH2 high expression lesions ZEB1，SALL4，TET1，RANKL，N-cadherin mRNA expression was higher than EZH2 low expression lesion，the mRNA expression level of α-catenin was lower than that of EZH2 low expression lesions.Conclusion The high expression levels of AP-4 and EZH2 in endometrial cancer lesions can inhibit cancer cell apoptosis and promote cancer cell epithelial-mesenchymal transition.It is worthy of clinical attention.

Key words：AP-4，EZH2 gene；Endometrial cancer；Apoptosis；Epithelial-mesenchymal transition

子宮內膜癌（endometrial cancer，EC）是臨床女性常見的惡性腫瘤，與患者的生活習慣、非正規雌激素替代質量等因素相關[1]。尤其是今年來發病率不斷升高，嚴重威脅患者的生命健康安全。病灶內細胞凋亡和上皮間質轉化異常是子宮內膜癌的重要病理特點，臨床研究其調節機制具有重要的作用，本文結合臨床病例，分析子宮內膜癌病灶中AP-4、EZH2基因表達量的變化情況和相應的生物學作用，希望為臨床子宮內膜癌的診斷、治療提供一定的參考，為臨床的治療效果的監測提供判斷依據。現報告如下：

1資料與方法

1.1一般資料 回顧分析2017年1月～2018年1月在天津市靜海區醫院進行切除術治療的35例子宮內膜癌患者臨床資料，本研究經過醫院倫理委員會批準。年齡26～46歲，平均年齡（38.10±3.18）歲；絕經30例，未絕經16例；其中Ⅰ級9例，Ⅱ級15例，Ⅲ級11例。納入標準：①均經分段診刮術病理學確診為子宮內膜癌；②患者自愿參加本研究，并簽署知情同意書。排除標準：①病理證實合并有子宮內膜異位癥或宮頸癌、卵巢癌等其他惡性腫瘤；②入院時有急性炎癥的患者；③有精神、智力障礙，語言表達障礙者。

1.2研究方法

1.2.1標本采集 手術后留取子宮內膜癌病灶、癌旁病灶適量，用生理鹽水清洗后冷凍于液氮中，于15～30 min后取出病灶樣本，在-70 ℃超低溫冰箱內長期保存[2]。

1.2.2基因表達量測量 取癌病灶、癌旁病灶樣本適量，使用裂解液分離病灶內的RNA，使用試劑盒將RNA反轉錄為cDNA進行PCR反應，所用引物分別針對AP-4、SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin、，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin基因，依據PCR反應曲線即可計算出相應基因mRNA表達量[3]。

1.3觀察指標 觀察子宮內膜癌病灶內A、癌旁病灶AP-4、SRPX2、RLIP76、ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin、Fat-1、ITLN-1、Caspase-3、α-catenin基因表達量。

1.4統計學方法 本次研究所有數據分析使用SPSS18.0統計軟件包進行分析，計量資料采用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，P<0.05表示差異有統計學意義。

2結果

2.1子宮內膜癌病灶和癌旁病灶中AP-4、EZH2基因表達量 子宮內膜癌病灶內AP-4、EZH2基因表達量高于癌旁病灶，差異具有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2子宮內膜癌病灶細胞凋亡基因表達量與AP-4的相關性 子宮內膜癌病灶內SRPX2、RLIP76的mRNA表達量高于癌旁病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達量低于癌旁病灶，見表2。AP-4高表達病灶內SRPX2、RLIP76的mRNA表達量高于低表達病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達量低于AP-4低表達病灶，見表3。

2.3子宮內膜癌病灶中上皮間質轉化基因表達量與EZH2的相關性 子宮內膜癌病灶內ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達量高于癌旁病灶，α-catenin的mRNA表達量低于癌旁病灶，見表4。EZH2高表達病灶內ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達量高于EZH2低表達病灶，α-catenin的mRNA表達量低于EZH2低表達病灶，見表5。

3討論

隨著子宮內膜癌發病率的不斷提高，臨床對其有效治療方法越來越受重視。但是臨床缺少有效的治療手段，加之疾病的發病機制不完全明確，臨床治療難度較大[4]。為了有效的治療子宮內膜癌，臨床研究其基因表達量與細胞凋亡、上皮間質轉化的相關性，希望使臨床治療更具有針對性。

已有研究結果顯示，子宮內膜癌細胞中AP-4和EZH2的表達分別能夠誘導細胞凋亡、抑制細胞上皮間質轉化，但關于子宮內膜癌病灶內AP-4和EZH2表達量的變化以及相應的生物學效應仍未明確[5]。本文通過研究顯示，子宮內膜癌病灶內AP-4、EZH2基因表達量高于癌旁病灶。由此表明高表達量的AP-4、EZH2與子宮內膜癌的發生密切相關，且可能參與了細胞增殖、凋亡等過程，以調控子宮內膜癌的發生。AP-4是參與細胞凋亡和增值的調控分子，而子宮內膜癌細胞增殖和凋亡與多種凋亡基因的表達量相關。子宮內膜癌病灶內SRPX2、RLIP76的mRNA表達量高于癌旁病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達量低于癌旁病灶。同時AP-4高表達病灶內SRPX2、RLIP76的mRNA表達量高于低表達病灶，Fat-1、ITLN-1、Caspase-3的mRNA表達量低于AP-4低表達病灶。所以，子宮內膜癌病灶內AP-4高表達可以促進增殖基因的表達，抑制凋亡基因的表達，進一步促進腫瘤細胞的增殖，抑制腫瘤細胞的凋亡。而EZH2參與細胞上皮間質轉化，是癌細胞轉移、侵襲能力增強的重要病理變化。本文研究結果顯示子宮內膜癌病灶內ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達量高于癌旁病灶，α-catenin的mRNA表達量低于癌旁病灶。同時EZH2高表達病灶內ZEB1、SALL4、TET1、RANKL、N-cadherin的mRNA表達量高于EZH2低表達病灶，α-catenin的mRNA表達量低于EZH2低表達病灶。所以，高表達的EZH2會增加間質轉化基因的表達和抑制上皮型基因的表達，從而促進腫瘤細胞的上皮間質轉化和侵襲。

總之，對于子宮內膜癌患者來說，病灶內AP-4、EZH2基因呈高表達量，且高表達量的AP-4會抑制癌細胞凋亡或促進癌細胞增殖，而高EZH2基因表達量會促進癌細胞上皮間質轉化。

參考文獻：

[1]別延紅，李納，吳又明，等.轉錄因子增強子結合蛋白-4基因沉默對子宮內膜癌細胞凋亡的影響[J].山東醫藥，2017，57（2）：5-9.

[2]Lv QY，Xie BY，Yang BY，et al.Increased TET1 Expression in Inflammatory Microenvironment of Hyperinsulinemia Enhances the Response of Endometrial Cancer to Estrogen by Epigenetic Modulation of GPER[J].J Cancer，2017，8（5）：894-902.

[3]王娟，馬莉，陳靜，等.RNA干擾抑制EZH2基因表達對子宮內膜癌細胞上皮-間質轉化的影響[J].現代婦產科進展，2017，26（2）：99-103.

[4]Wang J，Liu Y，Wang L，et al.Clinical prognostic significanceand pro-metastatic activity of RANK RANKL via the AKT pathway in endometrial cancer[J].Oncotarget，2016，7（5）：5564-5575.

[5]Liu Y，Wang J，Ni T，et al.CCL20 mediates RANK RANKL-induced epithelial-mesenchymal transition in endometrial cancer cells[J].Oncotarget，2016，7（18）：25-39.

收稿日期：2018-5-7；修回日期：2018-5-17

編輯/王海靜