急診冠狀動脈介入治療術后循環microRNA-26b-5p水平與血糖水平變化的觀察性研究

成萬鈞 張建維 王志堅 王建龍 劉宇揚 郭永和 趙迎新 周玉杰

急診冠狀動脈介入治療(primary percutaneous coronary interventions，PCI)因可以快速有效的開通閉塞的冠狀動脈血管，盡可能的挽救瀕臨壞死的心肌，因此目前是急性ST段抬高型心肌梗死患者首選的治療方法。我們先前的研究顯示，非糖尿病的急性ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevation myocardial infarction, STEMI)患者，應激性高血糖普遍存在，應激性高血糖往往增加STEMI患者的不良預后[1]。MicroRNA(miRNA)是基因表達控制的重要非編碼相關因子。最近研究顯示釋放入循環中miR-26b-5p水平可能對STEMI患者預后產生影響，具體機制尚不明確，可能與相關糖脂代謝有關[2]。本研究在于前瞻性的分析研究STEMI患者急診PCI治療后miR-26b-5p及血糖水平的變化及相關性，為進一步研究提供臨床依據。

資料與方法

1.研究對象 選擇自2017年6月至2017年11月期間，在首都醫科大學附屬北京安貞醫院及首都醫科大學大興醫院，接受急診PCI治療術的急性前壁心肌梗死患者為研究對象。(1)入選標準:①明確急性前壁心肌梗死，具有急診PCI治療指征，無禁忌證，均成功開通前降支，恢復TIMI3級血流，臨床心功能Killip分級1級。②非糖尿病患者。③簽置知情同意書。(2)排除標準: ①急診PCI治療失敗，未恢復TIMI3級血流。②術后心功能Killip分級大于或等于2級，心源性休克，支架內血栓形成，再次心肌梗死，心源性死亡。③糖尿病患者。

表2 不同時間點循環microRNA-26b-5p水平和隨機血糖水平變化情況

2.方法 詳細記錄患者年齡、性別、心功能、各項生化指標及病史情況等。根據國際指南的要求：術前給予阿司匹林300 mg嚼服、氯吡格雷600 mg頓服，術中均應用的是普通肝素，根據臨床狀況應用GP IIb/IIIa(鹽酸替羅非班)、主動脈內球囊反搏(intra-aortic balloon pump，IABP)、血栓抽吸裝置等，術后應用β受體阻滯劑、血管緊張素轉換酶抑制劑(angiotensin converting enzyme inhibitors，ACEI)、硝酸酯類藥物、抗血小板藥物及他汀類藥物等治療。

3.檢查 術前、術后24h、術后72h取靜脈血，行血糖及microRNA-26b-5p檢查。Real Time PCR檢測人血液樣本中microRNA-26b-5p表達量的變化:(1)引物設計: mir-26b-5p上游引物, 引物序(5′ to 3′):TTCAAGTAATTCAGGATAGGT；mir-26b-5p下游引物，引物序列(5'to3'): GGCCAACCGCGAGAAGATG；(2)用超純RNA提取試劑盒(CWbio.Co.Ltd，Cat#CW0581)提取組織樣本中總RNA,實驗操作按產品說明書進行，用miRNA cDNA第一鏈合成試劑盒(CWbio.Co.Ltd，Cat# CW2141)進行反轉錄，實驗操作按產品說明書進行。(3)RealTimePCR：用AB7500型熒光定量PCR儀，采用2-△△CT法進行數據的相對定量分析。

4.統計學處理 采用SPSS 11.5軟件進行處理。計量資料用均數±標準差表示，三組頻數的比較，滿足正態方差齊性時，用方差分析，不滿足正態方差齊性時，采用非參數檢驗。計數資料采用頻率或構成比表示，采用χ2檢驗。MicroRNA-26b-5p水平和隨機血糖水平采用線性回歸分析評估相關性。以P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1.共入選了符合標準的38例急性ST段抬高型心肌梗死患者, 基線的臨床資料見表1。

表1 36例患者一般臨床資料

2.不同時間點循環microRNA-26b-5p水平和隨機血糖水平 急診PCI術后患者隨機血糖水平逐漸降低，差異具有統計學意義(P<0.01)；急診PCI術后循環microRNA-26b-5p水平逐漸升高，差異有統計學意義(P<0.01，表2)。

3.不同時間點microRNA-26b-5p水平和隨機血糖水平相關性分析顯示(圖1)：兩者之間存在負相關(y=-0.047±8.293x，r=-0.332，P<0.01)。

圖1 不同時間點循環microRNA-26b-5p水平和隨機血糖水平變化情況

討 論

急性心肌梗死患者往往伴隨著血糖代謝紊亂，對于非糖尿病的STEMI患者，應激性高血糖的發生率約31%～71%[3]。既往研究顯示應激性高血糖增加急性心肌梗死患者不良心血管事件的發生[4],另有研究發現急性冠狀動脈綜合癥患者入院時的糖代謝狀態是患者的全因死亡的重要預后標志物[5]。我們既往研究顯非糖尿病的STEMI患者，應激性高血糖普遍存在，發現應激性血糖高的患者死亡率、支架內的血栓形成和主要不良心臟事件明顯高于低血糖組，證實應激性血糖升高是ST段抬高的AMI患者預后差的預后評價指標[1]。

此外，有研究顯示，急性心肌梗死抑制miR-26b的表達[6]。我們研究發現，急診PCI術后隨機血糖水平逐漸降低，而循環microRNA-26b-5p水平逐漸升高，差異具有統計學意義(P<0.01),兩者之間存在負相關(r=-0.332，P<0.01)。提示miR-26-5p可能通過某些機制相關血糖水平。microRNA(miRNA)是基因表達控制的重要非編碼相關因子。在一個多中心前瞻性急性冠狀動脈綜合癥患者隊列研究中顯示，在MACE患者中，miR-26b-5p(P=0.038)水平降低，miR-26b-5p可能會預防不良的心肌細胞肥大，釋放入循環中miRNAs可能反映了STEMI后對臨床結局有影響的分子通路激活[2]。另有研究發現miR-26b與胰島素敏感相關。在一項對胰島素敏感和胰島素抵抗人群的皮下脂肪組織轉錄組的調查分析中發現在胰島素抵抗人群中miR-26b降低[7]。另有研究表明在肥胖小鼠的內臟脂肪組織中miR-26b下調，人類肥胖者胰島素抵抗和miR-26b減少具有相關性，胰島素抵抗脂肪細胞模型中miR-26b降低[8]。以上研究提示miR-26b的下調抑制胰島素敏感性。后經研究證實miR-26b通過靶向PTEN激活PI3K/AKT信號通路，促進胰島素信號通路重要的靶基因葡萄糖轉運蛋白4(glucose transporter 4，Glut4)的表達，使機體組織充分利用葡糖糖，降低血糖濃度[7]。此外，另一項研究發現miR-26調控胰島素的生成[9]。以上說明miR-26b通過影響胰島素生成以及葡萄糖轉運引發機體的血糖變化。

總之， 急性心肌梗死患者急診PCI治療后應激性高血糖普遍存在，目前機制尚不明確，miR-26b-5p可能通過多種途徑影響血糖水平，從而影響STEMI患者的預后，需引起臨床廣泛的重視，未來需要進一步進行基礎研究。