兩種方法檢測HLA—B27的臨床價值

林乾飛

[摘要] 目的 探討磁性酶聯免疫分析法和流式細胞術兩種方法檢測HLA-B27的臨床價值，為臨床血液HLA-B27的檢驗提供科學理論依據。 方法 方便選取該院2017年1—12月在該院檢測血液HLA-B27的134例患者為研究對象，所有患者均采用兩種方法進行檢驗，根據檢驗方法不同，分為對照組和觀察組。對照組采用流式細胞儀檢驗，觀察組采用磁性酶聯免疫分析法進行檢驗，觀察兩種檢驗方法的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值。 結果 磁性酶聯免疫分析的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值分別為0.961，0.985，0.981，0.985，流式細胞儀的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值分別為0.961，0.971，0.968，0.973，兩種方法結果的符合率為97.76%，差異無統計學意義（P>0.05）。 結論 磁性酶聯免疫分析法在檢驗血液HLA-B27的靈敏度和特異性較好，具有方面、省時、簡單、準確的特點，適合強直性脊柱炎的早期診斷及鑒別，實用可靠，值得在臨床上應用推廣。

[關鍵詞] 磁性酶聯免疫分析法；流式細胞術；兩種檢測方法；HLA-B27；臨床價值

[中圖分類號] R4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）06（c）-0188-03

[Abstract] Objective This paper tries to explore the clinical value of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry in the detection of HLA-B27， and to provide scientific theoretical basis for the clinical blood HLA-B27 test. Methods 134 patients with HLA-B27 in the hospital from January to December 2017 were selected conveniently as the study subjects. All patients were tested by two methods. According to the different testing methods， they were divided into control group and observation group. The control group was examined by flow cytometry. The observation group was tested by magnetic enzyme-linked immunosorbent assay. The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive value of the two test methods were observed. Results The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive values of magnetic enzyme-linked immunosorbent assay were 0.961，0.985，0.981 and 0.985， respectively. The sensitivity， specificity， and positive and negative predictive values of flow cytometry were 0.961，0.971，0.968，0.973. The coincidence rate of the two methods was 97.76%. the difference was not statistically significant. Conclusion The magnetic enzyme-linked immunosorbent assay has good sensitivity and specificity in the detection of blood HLA-B27. It has the characteristics of being time-saving， simple， and accurate. It is suitable for the early diagnosis and identification of ankylosing spondylitis. It is practical and reliable， and worthy of clinical application.

[Key words] Magnetic enzyme-linked immunoassay； Flow cytometry； Two detection methods； HLA-B27； Clinical value

HLA-B27屬于HLA-B位點之一，是人體白細胞抗原。HLA-B27基因屬于Ⅰ型MHC基因，表達在機體中所有有核的細胞上，尤其是在淋巴細胞表面含量較多。現在研究表明[1-3]，HLA-B27和強直性脊柱炎具有高度的相關性，HLA-B27檢驗已經成為臨床上支持強直性脊柱炎診斷的重要依據。目前檢驗HLA-B27的方法有許多，如微量細胞毒試驗、流式細胞儀檢驗法、酶聯免疫分析法、PCR法等。該文方便選取該院2017年1—2017年12月在該院檢測血液HLA-B27的134例患者為研究對象，探討兩種方法檢測HLA-B27的臨床價值，取得較好的效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取在該院檢測血液HLA-B27的134例患者為研究對象，所有患者血液均經流式細胞儀和酶聯免疫分析法進行測定，分別為對照組和觀察組。患者中男71例，女63例，年齡6～85歲，平均年齡（47.0±2.69）歲。該研究的所有流程項目都是在符合倫理委員會各項條例和批準的前提下進行的，同時也是獲得了所有參與患者及其家屬的知情同意。

1.2 治療方法

1.2.1 標本準備 兩組患者晨起空腹抽取靜脈血4 mL，分別裝于2支EDTA抗凝管（美國BD公司）中，每管2 mL，編號注明性別和年齡，在24 h內分別用于酶聯免疫分析法和流式細胞儀檢測。

1.2.2 對照組 對照組采用流式細胞儀對患者血液進行檢驗，采用美國BD公司的FACSCalibur流式細胞儀進行檢驗，HLA-B27試劑盒為BD公司的專用試劑盒，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，采用專用軟件進行血液樣品分析和結果計算，將結果和定界值進行比較，大于等于定界值則為陽性，否則為陰性。

1.2.3 觀察組 觀察組采用美國Goldsign公司的HLA-B27抗原磁酶免疫試劑盒，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，采用國產KHBst-360酶免疫檢測儀，在波長450 nm和630 nm下讀取吸光度值（OD值），OD值<0.7則判定為陰性，OD≥0.7則為陽性。

1.4 統計方法

采用SPSS 19.0統計學軟件處理數據，計數資料[n（%）]采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

經過不同方法檢測后，差異無統計學意義（P>0.05），檢測結果比較見表1。

兩種方法檢測后，靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

3 討論

HLA抗原是人類重要組織相容性復合體（MHC）的表達產物，在人體免疫系統中負責細胞與細胞之間的識別、誘導免疫反應以及調節免疫應答的功能。近年來，研究HLA和疾病相關性的資料證明[4-6]，一些疾病的發生率盒某些特殊的HLA檢出率密切相關，這些患者大都是發病機理尚不明確，并伴有免疫功能異常和有遺傳傾向性的疾病[7]。

流式細胞術（FCM）是通過檢測標記的熒光信號，對懸液中的單細胞或其他生物粒子，實現高速、逐一的細胞定量分析技術，其特點是通過快速測定庫爾特電阻、光散射、熒光和光吸收定量測定細胞細胞體積、DNA含量、酶活性、蛋白質含量、細胞膜受體及表面抗原等參數，根據得到的參數將性質不同的細胞分開，獲得供醫學研究用的純細胞群體。FCM法通過熒光抗原抗體檢測技術，對細胞表面抗原進行分析，進行細胞分類及亞群分析，FCM對于人體細胞免疫功能的評估、各種血液病及腫瘤的診斷和治療均有重要作用。酶聯免疫吸附劑測定法（ELISA法），簡稱酶聯免疫法，是讓抗體和酶復合物結合并通過顯色來進行指標檢測。該研究檢查結果顯示流式細胞儀的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值分別為0.961、0.971、0.968、0.973，磁性酶聯免疫的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值分別為0.981、0.985、0.981、0.985，與沈靜[8]磁性酶聯免疫分析的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值分別為0.958、0.969、 0.965、0.968，流式細胞儀的靈敏度、特異性及陽性、陰性預測值分別為0.979、0.981、0.982、0.987檢測結果一致。

該文研究磁性酶聯免疫分析法在檢驗血液HLA-B27的靈敏度和特異性較好，具有方面、省時、簡單、準確的特點，適合強直性脊柱炎的早期診斷及鑒別，實用可靠，值得在臨床上應用推廣。

[參考文獻]

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[2] 葉阿里.實時熒光PCR法和流式細胞術檢測HLA-B27的結果分析[J].國際檢驗醫學，2017，38（7）：892.

[3] 白世杰.強直性脊柱炎及其相關基因HLA-B27檢測的研究現狀[J].分子診斷與治療，2016，8（3）：206.

[4] 王平均.聚合酶鏈反應-直接測序法在強直性脊柱炎患者HLA-B27檢測中的應用[J].中國實驗診斷學，2015，19（11）：1898.

[5] 艾金偉.國內HLA-B27診斷強直性脊柱炎價值的Meta分析[J].中國循證醫學，2015，15（9）：1059.

[6] 孫靈迪.HLA-B27基因表達量及亞型分析在 AS 疾病評估中的意義[J].現代檢驗醫學，2016（1）：58.

[7] 張世坤.不同方法在強直性脊柱炎患者HLA-B27檢測中的比較[J].中國現代藥物應用，2016，10（13）：39.

[8] 沈靜.SSP-PCR法與流式細胞儀檢測HLA-B27的相關性比較[J].國際檢驗醫學， 2014，35（1）：70.

（收稿日期：2018-03-26）