趨化因子受體4蛋白及mRNA檢測(cè)在診斷胃癌中的應(yīng)用價(jià)值

孟 海，趙成禮，孫成玉

（濱海縣人民醫(yī)院消化科，江蘇 濱海 224500）

胃癌是臨床上常見(jiàn)的一種惡性腫瘤。有研究指出，趨化因子受體4（CXCR4）蛋白及mRNA的高表達(dá)與胃癌的發(fā)生、進(jìn)展密切相關(guān)[1]。為了探討CXCR4蛋白及mRNA檢測(cè)在診斷胃癌中的應(yīng)用價(jià)值，筆者進(jìn)行了以下研究。

1 資料和方法

1.1 基線(xiàn)資料

隨機(jī)選取2015年3月至2017年2月濱海縣人民醫(yī)院接診的59例胃癌患者作為研究對(duì)象。這59例患者均經(jīng)病理檢查被確診患有胃癌。根據(jù)病情的嚴(yán)重程度將其分為早期胃癌組和中晚期胃癌組。早期胃癌組30例患者中有男18例，女12例；其年齡為35～70歲，平均年齡（50.17±5.40）歲。中晚期胃癌組29例患者中有男16例，女13例；其年齡為36～70歲，平均年齡（51.22±5.35）歲。另選取在該院進(jìn)行體檢的30例健康體檢者作為對(duì)照組。對(duì)照組體檢者中有男16例，女14例；其年齡為35～69歲，平均年齡（50.47±6.40）歲。三組研究對(duì)象的基線(xiàn)資料相比，P＞0.05。本研究經(jīng)濱?？h人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)進(jìn)行。

1.2 方法

采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法對(duì)三組人員血液中CXCR4 mRNA的表達(dá)情況進(jìn)行測(cè)定。方法是：抽取受檢者的空腹靜脈血3 ml，采用Trizol法提取血樣中的RNA。然后將這些RNA轉(zhuǎn)錄成cDNA。在GeneBank中查找CXCR4的mRNA 序列。應(yīng)用比較Ct值法測(cè)定CXCR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量[2]。采用免疫組織化學(xué)法對(duì)三組人員胃組織中CXCR4蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行測(cè)定。方法是：將受檢者的胃組織制作成石蠟切片，用H-E染色法對(duì)切片進(jìn)行染色。使用Envision法對(duì)切片進(jìn)行處理，然后根據(jù)切片的著色強(qiáng)度對(duì)其進(jìn)行記分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本文中的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用%表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組人員血液中CXCR4mRNA相對(duì)表達(dá)量的比較

中晚期胃癌組患者血液中CXCR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量高于早期胃癌組患者，P＜0.05。早期胃癌組患者血液中CXCR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組體檢者，P＜0.05。詳見(jiàn)表1。

表1 三組人員血液中CXCR4 mRNA相對(duì)表達(dá)量的比較（±s ）

表1 三組人員血液中CXCR4 mRNA相對(duì)表達(dá)量的比較（±s ）

注：*與早期胃癌組比較，t=13.858,P=0.000； ☆與對(duì)照組比較，t=5.968,P=0.000。

組別 例數(shù) CXCR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量中晚期胃癌組 29 42.95±6.20*早期胃癌組 30 23.08±4.74☆對(duì)照組 30 15.20±5.46

2.2 三組人員胃組織中CXCR4蛋白陽(yáng)性表達(dá)率的比較

中晚期胃癌組患者胃組織中CXCR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率高于早期胃癌組患者，P＜0.05。早期胃癌組患者胃組織中CXCR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組體檢者，P＜0.05。詳見(jiàn)表2、圖1。

表2 三組人員胃組織中CXCR4蛋白陽(yáng)性表達(dá)率的比較

圖1 對(duì)三組人員的胃組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色處理的結(jié)果（A：中晚期胃癌組，B：早期胃癌，C：對(duì)照組）

2.3 胃癌患者CXCR4蛋白陽(yáng)性表達(dá)與其病理特征的關(guān)系

與腫瘤的臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的分化程度為中高分化的胃癌患者相比，

腫瘤的臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的分化程度為低分化的胃癌患者其胃組織中CXCR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率均更高，P＜0.05。詳見(jiàn)表3。

表3 胃癌患者CXCR4蛋白陽(yáng)性表達(dá)與其病理特征的關(guān)系

3 討論

胃癌是一種發(fā)病率及致死率均較高的惡性腫瘤。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)每年約有16萬(wàn)人死于胃癌[3]。本研究的結(jié)果顯示，中晚期胃癌組患者血液中CXCR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量高于早期胃癌組患者。早期胃癌組患者血液中CXCR4 mRNA的相對(duì)表達(dá)量高于對(duì)照組體檢者。中晚期胃癌組患者胃組織中CXCR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率高于早期胃癌組患者。早期胃癌組患者胃組織中CXCR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組體檢者。與腫瘤的臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期、無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的分化程度為中高分化的胃癌患者相比，腫瘤的臨床分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的分化程度為低分化的胃癌患者其胃組織中CXCR4蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率均更高。由此可見(jiàn)，趨化因子受體4蛋白及mRNA檢測(cè)在診斷胃癌中的應(yīng)用價(jià)值較高。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。