張向東 趙福琴 穆寶正
(1.唐山職業技術學院,河北 唐山 063000;2.滄州濟生動物醫院,河北 滄州 061000)
雞傳染性支氣管炎 (Infectious bronchitis,IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(Infectious bronchitisvirus,IBV)引起的急性、高度接觸性傳染病。IBV主要侵害雞的呼吸道、泌尿生殖道、消化道等。臨床表現為咳嗽、氣管啰音、噴嚏、腎臟病變、產蛋雞群產蛋量及蛋品質下降。雛雞可因為感染后的呼吸道和腎臟的病變造成死亡,同時可引起生殖系統受損傷,造成輸卵管永久性退化,導致生產力下降;產蛋雞感染會引起產蛋數量與品質下降,死淘率增加;肉雞感染,尤其混合感染引起氣囊炎使肉雞在加工過程中被淘汰。傳染性支氣管炎于1930年首先發現于美國,我國在1953年就有呼吸型IB發生的報道。1982年鄺榮祿等在廣東首次報道腎型IB的發生。1995年杜元釗在中國膠東地區從產蛋雞群分離出嗜輸卵管和卵巢型IBV變異株。從那以后,我國又有關于腺胃型IBV變異株的報道。IBV變異性強,血清型較多,又具有高度傳染性,因此雞群易同時感染不同毒株的IBV,且弱毒疫苗的使用導致IBV發生基因重組而不斷變異,使其對雞體的靶器官也相應發生變化。雞發生腎型傳染性支氣管炎后,腎臟受損嚴重,除腎炎表現外,腎及輸尿管還出現尿酸鹽結石,導致雞群死亡率升高,給養雞業造成嚴重危害。本課題組結合中獸醫辯證施治理論與腎型傳染性支氣管炎發病機制、病理變化特點,發現治療本病的關鍵是清熱解毒,利尿、排石、通淋,扶正固本、恢復腎氣。課題組在確定了此研究方向的基礎上,結合查閱資料、市場調研等,最終研發出了一種治療雞腎型傳染性支氣管炎的中藥復方制劑。經試驗,取得了理想的治療效果,且使用方便,劑型穩定,質量可控,無毒副作用。現已經申報了發明專利。現將試驗情況報告如下。
供試雞為1日齡無腎傳支抗體健康海蘭褐雛雞,購自寧夏某種雞廠。試驗前常規飼喂全價配合飼料,飼料中不含任何抗菌藥物,自由采食及飲水,同時注意觀察,及時剔除弱雛。飼養至21日齡備用(期間不接種任何疫苗)。
腎型IBV由課題組提供病料 (病料采自發生腎型IB的雞場)、瑞普生物藥業有限公司分離鑒定而得,并承蒙瑞普生物藥業有限公司確定了雛雞腎型IBV的感染劑量,即10 ELD50 0.1 mL人工感染21日齡雛雞使其發病。
1.3.1 自研中藥配方。石葦5%、木通5%、車前子5%、瞿麥5%、赤茯苓3.5%、滑石10%、冬葵子10%、金錢草10%、海金沙9%、紫花地丁10%、金銀花10%、連翹5%、蒲公英10%、甜甘草2.5%。
1.3.2 制備及用法用量。①選取原料藥:石葦50g、木通 50g、車前子 50g、瞿麥 50g、赤茯苓 35g、滑石 100g、冬葵子100g、金錢草100g、海金沙90g、紫花地丁100g、金銀花 100g、連翹 50g、蒲公英 100g、甜甘草25g,原料藥總重量為1000g;②將上述原料藥混勻,加入5000g的水浸泡30min,然后大火煮沸,再文火煎煮30min,過濾,濾出藥液;再將藥渣中重新加入3000g水,先大火煮沸,再文火煎煮45min,過濾,濾出藥液。合并兩次藥液,混勻,備用;③制粒:用濃縮法將以上合并混勻的藥液水分蒸發掉,直至成浸膏狀,得到濃縮藥物,濃縮藥物重量為200g,然后加入300g無水葡萄糖,混勻,經60~65℃烘干,制成可溶性小顆粒,裝袋,密封保存備用。
IDEXX Catalyst One全自動生化分析儀。
雛雞飼養至20日齡時進行稱重并隨機分組。單只雛雞體重為200~250g,并隨機分為治療組(90只)、陽性對照組(30只)、陰性對照組(30只),共150只,其中治療組又設高、中、低3個不同劑量組,每組30只,21日齡攻毒。攻毒后,在治療組雞群出現典型癥狀時(即25日齡時),按高(每次每只雞2g)、中(每次每只雞1g)、低(每次每只雞0.5g)3個不同劑量分別給予中藥可溶性顆粒(混飲),1次/d,連續用藥5 d。采血時間為20、25、30、35日齡。陽性對照組在攻毒后不用任何藥物、隔離飼養;陰性對照組則不攻毒、不給藥,隔離飼養。陽性、陰性對照組的采血時間亦為20、25、30、35 日齡。
每只雞采血量為1.5 ml,于4000 r/min離心15 min,分離血清,并用IDEXX Catalyst One全自動生化分析儀進行腎功能檢驗。

表1 試驗動物20日齡時腎功能檢驗結果

表2 試驗動物23日齡時腎功能檢驗結果

表3 試驗動物30日齡時腎功能檢驗結果

表4 試驗動物35日齡時腎功能檢驗結果

表5 試驗動物40日齡時腎功能檢驗結果
依據試驗結果,最終確定該中藥方劑用法用量為:雞群按每次每公斤體重4~6g可溶性顆粒加2倍量水混飲,每天1次,連用7d。
該中藥方劑中,金銀花、甘寒,具有清熱解毒之效;連翹、苦寒,清熱解毒,消腫散結,二者相須,作為君藥。紫花地丁、苦寒,清熱解毒,利濕消腫;蒲公英、甘寒,清熱解毒,消腫散結,利水通淋,共為臣藥、輔君藥,具有抗病毒,退熱等功效,起到治療病毒性腎型傳染性支氣管炎的對因治療,名曰治本。石葦,清熱通淋,涼血止血;木通,清熱利尿,清心降火;車前子,利水通淋,清肝明目;瞿麥,清熱、利水、通淋;赤茯苓,清熱滲濕,健脾和中;滑石,利水通淋;金錢草,除濕退黃,利水通淋,清熱消腫;海金砂,清熱解毒,利水通淋;冬葵子,清熱利濕,通淋,共為佐藥,起到利水通淋、排石的功效,解決腎傳支病雞因為輸尿管結石阻塞造成批量死亡的表癥,甘草調和諸藥起到藥寒而不傷脾胃,利水而不太過的功效。全方配合起到標本同治,真正起到緩能治其本,急能治其標的作用。