還原型谷胱甘肽對部分氧化酶法項目檢測的影響

潘本友，宋靜芳，張海濤

（1.貴州省貴陽市第一人民醫院檢驗科，貴州 貴陽 550002;2.貴州醫科大學醫學檢驗系，貴州 貴陽 550004）

在臨床檢驗工作中，臨床醫生經常會質疑檢驗結果的準確性。作為檢驗人員，我們不僅要提高檢驗結果的準確性，還要考慮臨床用藥對我們檢驗結果的影響。還原型谷胱甘肽（GSH）對基于Trinder反應的氧化酶法檢驗項目的負面影響也是眾所周知，但是具體的影響程度報告較少[1-2]，且各不相同。本實驗就GSH對部分氧化酶法檢測項目的影響進行研究，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

1.1.1 儀器：HITACHI7600全自動生化分析儀。

1.1.2 試劑

（1）還原型谷胱甘肽鈉：昆明積大制藥股份有限公司生產，規格：1.2g/瓶，批號161205，生產日期：2016年12月5日，有效期至：2019年12月4日。

（2）TC（批號16-0913）、TG（批號16-1011）、UA（批號16-1215）、Cre（批號16-0919）、GLU（批號 16-1012）、HDL-C（批號16-0906）、LDL-C（批號16-0606）：由北京九強生物技術股份有限公司生產。

1.2 校準品：

1.2.1 TC、TG、UA、Cre、GLU：由英國朗道有限公司生產，批號1001UN。

1.2.2 HDL-C、LDL-C：由北京九強生物技術股份有限公司生產，批號16-0706。

1.3 質控品

1.3.1 UA、Cre、GLU：由英國朗道有限公司生產，批號764UE、1027UN。

1.3.2 TC、TG、HDL-C、LDL-C：由上海昆淶生物科技有限公司生產，批號592-2、592-3。

1.4 方法 將注射用還原型谷胱甘肽鈉凍干粉用4 ml生理鹽水溶解至外觀澄清，配成濃度300 mg/ml GSH液體。收集本院當日體檢血清混勻作為基礎血清，并與300 mg/ml GSH溶液配成實驗所需濃度，即0.00 mg/ml、0.15 mg/ml、0.30 mg/ml、0.45 mg/ml、0.60 mg/ml、1.20 mg/ml、1.50 mg/ml、3.00 mg/ml、4.50 mg/ml、6.00 mg/ml、7.50 mg/ml，混勻后進行TC、TG、UA、Cre、GLU、HDL-C、LDL-C等項目檢測，所有項目均在實驗室控制范圍內，每個項目平行測定三次并計算均值（X），以上均盡量避光操作。

1.5 統計學方法 采用SPSS 24.0軟件進行數據處理，每組計量用“±s”表示，采用單因素方差（one-way ANOVA）進行組內比較。

2 結果

2.1 不同GSH濃度時，各項目檢測結果均值GSH濃度為0.30 mg/ml時，對GLU、UA的檢測結果影響有統計學意義（P＜0.05）；GSH濃度為0.45 mg/ml時，對TG的檢測結果影響有統計學意義（P＜0.05）；GSH濃度為0.60 mg/ml時，對TC的檢測結果影響有統計學意義（P＜0.05）；GSH濃度為1.20 mg/ml時，對Cre的檢測結果影響有統計學意義（P＜0.05）；GSH濃度為3.00 mg/ml時，對HDL-C的檢測結果影響有統計學意義（P＜0.05）；GSH濃度為6.00 mg/ml時，對LDL-C的檢測結果影響有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 不同GSH濃度時各項目測定均值（±s）

表1 不同GSH濃度時各項目測定均值（±s）

注：與GSH濃度為零時進行比較，aP＜0.05，aaP＜0.01

GSH（mg/ml）0.00 0.15 0.30 0.45 0.60 1.20 1.50 3.00 4.50 6.00 7.50 TC（mmol/L）4.72 4.59 4.30 4.14 4.03a 3.41a 3.33a 1.99aa 1.30aa 0.95aa 0.67aa TG（mmol/L）1.12 1.05 0.96 0.89a 0.80a 0.58aa 0.51aa 0.20aa 0.10aa 0.08aa 0.06aa GLU(mmol/L)5.39 4.64 4.51a 4.47a 4.13a 3.63a 3.42a 2.32aa 1.70aa 1.34aa 1.09aa Cre（mmol/L）63.30 60.53 57.37 55.33 55.27 49.90a 45.00a 34.90a 26.93aa 20.90aa 16.80aa UA（mmol/L）260.80 233.40 200.10a 174.73a 153.50a 77.12aa 65.15aa 8.47aa-2.67aa-8.53aa-11.40aa HDL-C（mmol/L）1.48 1.48 1.48 1.47 1.45 1.42 1.37 1.19a 0.95a 0.79a 0.62aa LDL-C（mmol/L）3.19 3.13 3.12 3.11 3.10 3.09 3.05 2.92 2.76 2.53a 2.11a

2.2 不同GSH濃度時，各項目結果影響具有統計學意義走勢，見圖1。

圖1 各項目結果影響具有統計學意義走勢圖

3 討論

GSH是機體重要的生物活性物質，廣泛分布于人體各組織器官內，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成。正常情況下以硫醇還原型存在，在許多生命活動中起直接或間接作用，參與體內三羧酸循環及糖代謝，為機體提供能量[3]。GSH具有廣泛的生理和藥理活性[4]，臨床上主要用于藥物性肝腎損傷、病毒性肝炎、膽汁淤積、化療患者、急性胰腺炎、慢性阻塞性肺疾病、以及中毒等疾病的治療[5-8]。有研究報告[9]，健康者隨著給藥方式及劑量的不同，給藥后GSH在血液中的濃度在2 h內達到峰值，但達峰時間是各不相同的，有較大的個體差異。

在臨床生化檢驗方法中，氧化酶法測定的最終原理是過氧化氫與4-氨基安替比林及酚類在過氧化物酶的作用下生產紅色的醌亞胺化合物。而許多還原性物質（如：還原型谷胱甘肽、維生素C、尿酸、抗壞血酸、膽紅素等）與過氧化氫反應，使氧化酶法反應過程中所產生的過氧化氫濃度降低，從而干擾了氧化酶法的最終反應，使檢測結果偏低[10]。從本實驗結果，我們得知：GSH濃度對部分氧化酶法項目的影響程度各不相同，其中最大的是UA和GLU，最小的是LDL-C。結合本實驗項目的自動化檢測參數，盡管Cre、UA、HDL-C和LDL-C的分析方法及測光點一致，但GSH對各項目的影響均不一樣。GLU、TC和TG的分析方法及測光點一致，GSH對各項目的影響也不一樣。而相同的GSH濃度，對各項目的影響為什么不同呢？本研究認為：可能是各試劑添加的抗干擾成分及量的不同，或者在各個反應過程中過氧化氫產生的時間及速度的不同。具體原因有待進一步研究證實。而本次實驗與其他研究[1-2]相比也存在差異，主要是GSH對各檢測項目的影響不同。這可能是檢測系統之間的差異，特別是檢測試劑的抗干擾性不同引起。

隨著GSH的廣泛應用，對檢測結果的影響已不容忽視，應引起大家的重視。盡管目前各試劑廠家都加強了試劑的抗干擾性，但是沒有徹底解決藥物對檢測的干擾問題。因此，為減少或避免藥物對檢測結果的影響，臨床醫護人員要根據各藥物代謝動力學規律，在合適的時間進行抽血檢驗，從而避免對患者病情作出錯誤判斷。