草蓯蓉藥酒質(zhì)量控制方法研究

1.大興安嶺地區(qū)食品藥品檢驗(yàn)檢測所，黑龍江 加格達(dá)奇 165000；2.大興安嶺職業(yè)學(xué)院，黑龍江 加格達(dá)奇 165000

草蓯蓉(BoschniakiarossicaFedtsch et Flerov)又名不老草[1]，為列當(dāng)科多年生寄生肉質(zhì)草本，常寄生于樺木科榿木(東北榿木，又稱東北赤揚(yáng))的須根上，草蓯蓉被列入《中國珍稀瀕危保護(hù)植物名錄》[2]，為國家二級保護(hù)植物。主要分布在我國的長白山和大小興安嶺地區(qū)，在日本的富士山區(qū)、俄羅斯的西伯利亞地區(qū)和朝鮮的北部山區(qū)亦有分布[3]。草蓯蓉主要成分是地上部分含草蓯蓉堿和草蓯蓉內(nèi)酯、C9、C10和C11萜內(nèi)酯以及獼猴桃堿；根含有草蓯蓉酸、草蓯蓉堿、2-羥基甲基-3-甲基環(huán)戌基乙酸內(nèi)酯及甘露醇等[4]。草蓯蓉具有補(bǔ)腎壯陽、潤腸止血、滋補(bǔ)強(qiáng)身、延年益壽的功效，主要應(yīng)用于保護(hù)肝臟[5]，可誘導(dǎo)肝臟清除自由基、增強(qiáng)機(jī)體免疫力[6]、抑制脂質(zhì)過氧化作用，抗衰老和抗癌作用等。草蓯蓉在大興安嶺地區(qū)各林業(yè)局均有分布，為民間習(xí)用藥材，應(yīng)用較為廣泛，老百姓經(jīng)常用之泡酒后飲用，以達(dá)到強(qiáng)身健體、治療疾病的目的。但目前對草蓯蓉及草蓯蓉藥酒的質(zhì)量控制方法研究還很少。本研究首次提出草蓯蓉藥酒的質(zhì)量控制分析方法，通過對10批次大興安嶺地區(qū)產(chǎn)的草蓯蓉樣品用白酒浸泡后，用高效液相色譜法測定其色譜圖，標(biāo)示出共有峰，為今后草蓯蓉藥酒浸泡時間、貯存時間的考察及質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

島津2010A液相色譜儀；電子天平(賽多利斯AE200)。液相用甲醇、磷酸為色譜純。溶劑為北大荒集團(tuán)生產(chǎn)的54度白酒。10批次草蓯蓉藥材分別購買于大興安嶺地區(qū)的松嶺、新林、呼瑪、塔河、十八站和加格達(dá)奇，經(jīng)大興安嶺地區(qū)農(nóng)林科學(xué)院北藥專家劉光鑒定為列當(dāng)科草蓯蓉屬植物草蓯蓉。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Thermo C18-2 HYPERSIL柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：甲醇-0.4%的磷酸溶液；檢測波長：260 nm；柱溫：30℃；流速：1 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；分析時間為95 min。梯度洗脫條件見下表1。

表1 梯度洗脫條件

2.2 樣品溶液制備 取草蓯蓉藥材干品5支(完整的)，稱定重量，按重量比1∶15的比例加入54度白酒，密封，浸泡15天，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取S1供試品溶液，在同樣條件下分別間隔0、4、8、12、16、24 h六個不同時間點(diǎn)吸取10μL注入液相色譜儀，考察各共有峰保留時間和峰面積的RSD范圍為 0.01%～0.11%和 0.17%～2.38% ，均小于3%。

2.4 精密度試 驗(yàn)取S2供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣六針，考察各共有峰保留時間和峰面積的RSD范圍為0.01%～0.07%和 0.17%～1.93% ，均小于3%。

2.5 重復(fù)性試 驗(yàn)取S3樣品，在同樣條件下分別稱取五份，按建立的方法測定，考察各共有峰保留時間和峰面積的RSD范圍為0.01%～0.05%和 0.41%～2.82%，均小于3%。

2.6 樣品測定 分別吸取供試品溶液，過0.45 μm濾膜，進(jìn)樣量10 μL，記錄95 min的色譜圖。過對10批次草蓯蓉藥酒色譜圖(扣除背景)的分析，根據(jù)色譜峰的保留時間，確定了11個保留時間相同、峰面積較大(見圖1)的共有峰。用此方法檢測出的各色譜峰分離度和峰形均較好，基線比較平穩(wěn)，出峰時間和峰面積重現(xiàn)性較好，共有峰峰面積之和約占總峰面積的90%。

3 討論

實(shí)驗(yàn)中對比了甲醇-水，乙腈-水，甲醇-磷酸溶液，乙腈-磷酸溶液等不同流動相，發(fā)現(xiàn)用甲醇-磷酸溶液做流動相進(jìn)行梯度洗脫，基線較平穩(wěn)，色譜峰形較好，又對不同的檢測波長進(jìn)行了考察，最后發(fā)現(xiàn)在260 nm處峰吸收效果較好，峰數(shù)較多，峰高也適宜。實(shí)驗(yàn)中樣品用54度白酒浸泡，主要是根據(jù)民間習(xí)用方法，用糧食酒(一般50～60°之間)浸泡后服用。

本實(shí)驗(yàn)的樣品只是針對黑龍江省大興安嶺地區(qū)產(chǎn)的草蓯蓉樣品，未對吉林和內(nèi)蒙等其他地區(qū)產(chǎn)的草蓯蓉藥酒進(jìn)行檢測，建議可用此方法進(jìn)行對比試驗(yàn)，看是否也適用。用此方法檢測出的11個共有峰，能夠反應(yīng)草蓯蓉藥酒的整體質(zhì)量變化情況，亦可用于草蓯蓉藥酒的真假鑒別。