藏藥芫根提取物對小鼠抗缺氧能力的研究

馮秋紅 青海帝瑪爾藏藥科技開發有限公司

芫根(Brassica rapa L.)，即蕪菁、蔓菁，是一種于十字花科蕓薹屬草本植物蕪菁的干燥塊根，芫根中含有多種氨基酸、脂肪酸和多糖等，具有抗缺氧、抗輻射、提高免疫力等活性。本實驗于常壓缺氧條件下，采用芫根水提取物對小鼠抗缺氧能力進行分析，探討芫根的抗缺氧性。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗動物：雄性清潔級昆明小鼠60只，體質量18-20g，購自中國科學院上海實驗動物中心，生產許可證號：SCXK（滬）2003-0003。

實驗溶液配制：芫根水提取液制備：稱取適量新鮮芫根，清洗干凈后采用熱回流水提法提取3次芫根原汁，過濾定容后，置入冷凍干燥機內冷凍干燥，獲取芫根干粉。適量芫根粉與不同劑量超純水配制為10g/kg、15g/kg、20g/kg三種低劑量、中劑量、高劑量芫根水溶液，置入4℃冰箱中保存待用。同樣配置程序配置40g/kg濃度的紅景天溶液，4℃冰箱中保存待用。鹽酸普萘洛爾溶液：10倍人體推薦劑量配置為0.03g/kg濃度的水溶液。

1.2 方法

實驗動物處理：60只小鼠分為6組，分別為正常對照組、陽性對照組、紅景天對照組、芫根提取物低劑量組、芫根提取物中劑量組、芫根提取物高劑量組，每組各10只，各組小鼠日齡、體質量等一般資料均無明顯差異(P＞0.05)。正常組向小鼠胃內灌0.15mL/10g劑量的超純水；陽性對照組向小鼠胃內灌0.03g/kg劑量的鹽酸普萘洛爾水溶液；紅景天對照組向小鼠胃內灌40g/kg劑量的紅景天水溶液；芫根低、中、高劑量組則分別向沁鼠胃內灌10g/kg、15g/kg、20g/kg的芫根水提取物水溶液。各組小鼠分別灌藥1d、3d、1周、2周、1個月。

常壓抗缺氧實驗：實驗標準參照2003年版《保健食品檢驗與評價技術規范》中的功能學評價檢驗方法進行檢驗，最后1次灌藥60min后，各組小鼠均用500mL凡士林溶液廣口瓶中，瓶內均預置10g鈉石灰，便于吸收溶液中的二氧化碳與水，1只小鼠1只瓶，加蓋并計時，小鼠最后一次呼吸時間作為統計指標，觀察并記錄小鼠存活時間。

1.3 統計學方法

采用SPSS20.0對數據進行統計分析，數據結果采用（ ）表示，t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

灌藥1d時，與正常對照組相比，正常對照組、陽性對照組、紅景天對照組、芫根提取物低劑量組、芫根提取物低劑量組、芫根提取物低劑量 組 的 存 活 時 間 分 別 為 (120.37±1.43)(135.29±24.71)(119.04±4.22)(131.38±10.95)(135.74±12.53)(148.18±13.32)min，芫根低、中、高劑量組小鼠存活時間均顯著延長(P＜0.05)；

灌藥 3d 后，各組存活時間分別為 (100.83±1.52)( 110.31±2.75)(109.64±8.03)(138.59±5.46)(117.21±24.55)(95.82±7.49)min，與 正 常對照組相比，芫根低、中劑量組小鼠存活時間顯著延長(P＜0.05)，芫根高劑量組小鼠存活時間則顯著縮短(P＜0.05)；

灌藥 1周后，各組存活時間分別為 (81.93±20.58)(77.57±5.23)(139.44±27.92)(100.51±4.17)(94.32±3.61)(88.48±4.59)min，與正常對照組比較，芫根低、中、高劑量組小鼠存活時間均顯著延長(P＜0.05)；

灌藥 2 周后，各組存活時間分別為 (80.21±16.43)(69.83±4.67)(106.29±15.72)(70.15±2.83)(88.19±3.51)(81.32±16.32)min，與正常對照組比較，芫根低劑量組小鼠存活時間顯著延長(P＜0.05)，中劑量組則顯著縮短(P＜0.05)，高劑量組無明顯差異(P＞0.05)；

灌藥 1個月后，各組存活時間分別為 (70.54±4.62)(85.43±10.28)(100.39±26.74)(80.41±7.95)(83.18±3.76)(70.34±16.56)min，與正常對照組比較，芫根低、中劑量組小鼠存活時間顯著延長(P＜0.05)，高劑量組無明顯差異(P＞0.05)。

3 討論

缺氧是多種疾病發生與發展的重要因素，當機體缺氧時，會增加自由基含量，降低機體自由基清除量。篩選自由清除活性藥物，并分析其活性成分，能夠為抗缺氧藥物的開發提供重要依據。

芫根是一種藏區常見的多用途售票，具有悠久的栽培歷史與確切的抗缺氧活性。本研究通過不同劑量、不同時效的對比分析顯示，芫根水溶液劑量為15g/kg時，各灌藥時間的小鼠模型存活時間較正常對照組均有顯著延長(P＜0.05)。王宇等的實驗發現，常壓抗缺氧模型小鼠在不同藥品模型下，HE常規染色后，腦組織會顯示出明顯不同的情況，尤其以海馬神經元細胞表現出顯著的不同，而多糖劑量則是影響小鼠存活時間的重要因素，本研究采用基于大數據的人工智能分析藏藥提取物化合物構效關系軟件，通過ANN-QSAR算法得出，多糖是芫根抗缺氧活性的重要成分，芫根中多糖成分的存在，使其能夠發揮較紅景天提取更為快速而持久的抗缺氧性能，是快速補充機體能量，增強機體耐受力的重要成分。

綜上分析，一定劑量的芫根提取物能夠顯著延長小鼠在常壓缺氧條件下的存活時間，其抗缺氧活性有一定時效性、劑量依賴性。