為糖尿病小鼠靜脈注射黃芩苷和羅格列酮在防治其周圍神經病變中的效果研究

尹三鳳，劉旭陽，顏德平，羅桂根，王桂蘭

(井岡山大學醫學部，江西 吉安 343007)

黃芩苷是一種從黃芩中提取出的黃酮類化合物。近年來的研究發現，黃芩苷不僅具有拮抗兒茶酚胺、抗脂質過氧化等作用，還能有效地保護缺血的心肌、抑制醛糖還原酶、加快神經傳導的速度，進而可起到防治糖尿病性周圍神經病變的效果[1]。羅格列酮是一種胰島素增敏劑，具有降低血糖水平的功效[2]。本次研究主要分析為糖尿病小鼠靜脈注射黃芩苷和羅格列酮在防治其周圍神經病變中的效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取一定數量的體質量為25～30 g的健康雄性實驗小鼠(由井岡山大學實驗動物研究中心提供)作為研究對象，自其尾靜脈將四氧嘧啶注射入小鼠的體內，使其形成糖尿病模型，并將其置于相對濕度為60%左右、室溫為25℃的環境中進行飼養。待模型建立成功后，將成模小鼠隨機均分為模型組、黃芩苷組、羅格列酮組和聯合用藥組，這四組小鼠的一般資料相比，P＞0.05。

1.2 實驗儀器及實驗試劑

1)本次研究所使用的儀器主要是型號為CL770的分光光度計及型號為YT-100的電子壓痛儀。2)本次研究所使用的試劑主要是羅格列酮(生產廠家：成都恒瑞制藥有限公司，批準文號：國藥準字H20170718)、純度為85%的黃芩苷(生產廠家：重慶賽普那斯科技有限公司)、CMCNa(羧甲基纖維素鈉)、四氧嘧啶、葡萄糖氧化酶法測定試劑盒、MDA(丙二醛)試劑盒及SOD(超氧化物歧化酶)試劑盒等。

1.3 方法

1)糖尿病小鼠模型的制備：⑴讓小鼠禁食6 h，期間可讓其自由飲水。⑵將60 mg/kg的四氧嘧啶自小鼠的尾靜脈注入其體內，建立糖尿病模型。⑶造模成功后的第4 d，從所有小鼠的尾靜脈中抽取血液進行檢驗，將血糖值＞11.1 mmol/L的小鼠納入研究對象。2)分組方式及用藥方法：⑴將成模小鼠隨機均分為模型組、黃芩苷組、羅格列酮組和聯合用藥組。⑵采用灌胃給藥的方式分別使用CMC-Na(羧甲基纖維素鈉)、黃芩苷、羅格列酮、黃芩苷＋羅格列酮對模型組小鼠、黃芩苷組小鼠、羅格列酮組小鼠和聯合用藥組小鼠進行治療。具體的方法是：①模型組：使用濃度為0.5%的CMC-Na對模型組小鼠進行灌胃給藥。②黃芩苷組：使用300 mg/kg的黃芩苷對黃芩苷組小鼠進行灌胃給藥。③羅格列酮組：使用0.78 mg/kg的羅格列酮對羅格列酮組小鼠進行灌胃給藥。④聯合用藥組：使用300 mg/kg的黃芩苷和0.78 mg/kg的羅格列酮對聯合用藥組小鼠進行灌胃給藥。⑶每日給藥1次，連續給藥8周。

1.4 觀察指標

1)進食量。2)非空腹血糖值。3)機械性痛閾值。4)MDA(丙二醛)的水平。5)SOD(超氧化物歧化酶)的活性。

1.5 統計學分析

將本次研究中的數據錄入到SPSS21.0軟件中進行處理，計量資料用()表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

聯合用藥組小鼠的進食量、非空腹血糖值、機械性痛閾值及其MDA(丙二醛)的水平均低于其他三組小鼠，其SOD(超氧化物歧化酶)的活性高于其他三組小鼠，P＜0.05。詳情見表1。

表1 四組小鼠用藥后各項觀察指標的比較()

表1 四組小鼠用藥后各項觀察指標的比較()

注：*與其他三組相比，P＜0.05。

組別 進食量[g/(kg·d)]非空腹血糖值(mmol/L) 機械性痛閾值(g) MDA含量(nmol/mg) SOD活性(U/ml)模型組 431.7 ±32.9 20.2 ±1.9 1190.4 ±318.7 18.6 ±5.4 34.0 ±6.2黃芩苷組 343.1 ±35.8 18.1 ±2.0 835.4 ±201.8 17.7 ±4.8 35.1 ±3.7羅格列酮組 368.4 ±33.9 18.9 ±2.5 917.8 ±189.3 177.5 ±4.8 33.8 ±3.2聯合用藥組 325.7 ±25.1* 16.7 ±1.9* 815.0 ±274.9* 13.8 ±3.7* 37.5 ±3.2*

3 結論

本次研究的結果顯示，與單純使用黃芩苷或羅格列酮相比，聯合使用這兩種藥物能顯著減低糖尿病小鼠的進食量、非空腹血糖值、機械性痛閾值及其肝臟中MDA的含量，同時可提高其血清中SOD的活性。這一結果充分證明，為糖尿病小鼠聯用黃芩苷和羅格列酮進行治療可起到防治周圍神經病變的作用。

文獻記載，黃芩苷對機體內醛糖還原酶的活性具有較強的抑制作用，其能在改善神經傳導速度的基礎上，起到緩解周圍神經病變的作用[3]。本次實驗以四組糖尿病小鼠作為研究對象，分別采用不同藥物對其進行8周的治療，發現單純使用黃芩苷或羅格列酮可在一定程度上降低這兩組糖尿病小鼠的機械性痛閾值，但聯合用藥組小鼠的機械性痛閾值明顯比這兩組小鼠的機械性痛閾值更低，這說明聯合使用黃芩苷與羅格列酮可對糖尿病性周圍神經病變起到顯著的防治作用。此外，用藥后，聯合用藥組小鼠的MDA水平顯著低于黃芩苷組小鼠和羅格列酮組小鼠，其SOD的活性則明顯高于黃芩苷組小鼠和羅格列酮組小鼠。這是因為，黃芩苷具有拮抗兒茶酚胺、抗脂質過氧化及阻滯鈣離子通道的作用，可有效保護缺血的心肌、抑制醛糖還原酶的活性，進而起到防治周圍神經病變的效果。羅格列酮作為一種噻唑烷二酮類胰島素增敏劑，能通過增加肝臟、脂肪組織及骨骼肌對胰島素的敏感性，提高細胞對葡萄糖的利用效果，進而可起到降血糖的作用。

綜上所述，為糖尿病小鼠聯合使用黃芩苷與羅格列酮進行治療能增強其神經功能，取得防治周圍神經病變的效果。