RA患者血清中細胞因子IL-6 IL-10 IL-17A TNF-α的表達及臨床意義

王蕾 倪萬茂 曹順旺 朱利芬 童向民?

類風濕性關節炎（RA）是常見的以關節慢性炎癥性病變為主要表現的全身性自身免疫病。RA主要侵犯外周關節，但肺、心、神經系統、血液、眼等器官或組織亦可受累。其主要病理變化為滑膜細胞增生，炎癥細胞浸潤，血管翳形成，浸蝕人軟骨及骨組織。滑膜持續炎癥導致關節結構破壞、畸形和功能喪失。有研究表明，RA患者中IL-6、IL-17A、TNF-α的表達水平明顯升高［1］，IL-10能抑制前炎癥因子的產生，既可增加RA患者的抗炎因子，也可減少RA的致病性促炎因子［2］。作者通過檢測RA患者血清中細胞因子IL-6，IL-10，IL-17A，TNF-α的表達，探討其在RA的臨床意義。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2016年3月至2017年6月浙江省人民醫院住院及門診RA患者222例，其中門診95例，男8例，女87例；平均年齡（47.46±13.45）歲；住院127例，男27例，女100例；平均年齡（59.43±11.51）歲。所有患者均符合2009年美國風濕病學會（ACR）和歐洲抗風濕病聯盟（EULAR）提出的新的RA分類標準和中醫診斷為痹癥濕熱痹阻型，并排除同時患有其他結締組織病，感染性疾病或腫瘤等相關性疾病。根據DAS28評分將住院患者分為緩解組和活動組，其中緩解組37例，男10例，女27例；平均年齡（57.03±12.69）歲；活動組90例，男17例，女73例；平均年齡（60.42±10.90）歲。健康體檢者33例為對照組，男19例，女14例；平均年齡（64.58±11.61）歲。

1.2 方法 所有受檢者清晨空腹坐位肘靜脈血采集2ml，采用分離膠促凝管，1500r/min離心5min，分離血清備用。Th1/Th2/Th17檢測試劑盒購自美國BD公司，嚴格按照說明書操作。實驗儀器采用美國Beckman Coulter 公司的Navios流式細胞儀，并使用其配套的kaluza軟件分析白介素-2（IL-2），IL-4，IL-6，IL-10，IL-17A，TNF-α，γ-干擾素（IFN-γ）的結果。

1.3 統計學方法 采用SPSS 17.0統計軟件。計量資料以（±s）表示，采用非參數檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 門診RA患者組與健康對照組各細胞因子表達水平比較 見表1。

表1 門診RA患者組與健康對照組七種細胞因子表達水平比較［ng/L，（±s）］

表1 門診RA患者組與健康對照組七種細胞因子表達水平比較［ng/L，（±s）］

門診RA患者 健康對照組 P值IL-2 4.42±11.66 0.20±0.54 0.196 IL-4 14.80±108.07 0.24±0.67 0.110 IL-6 16.06±23.18 0.57±0.94 0.000 IL-10 3.49±5.09 0.81±0.84 0.002 IL-17A 3.83±11.95 0.16±0.32 0.000 TNF-α 20.29±30.38 2.60±2.93 0.042 IFN-γ 1.50±2.28 0.24±0.70 0.089

2.2 緩解組與活動組各細胞因子表達水平比較 見表2。

表2 緩解組與活動組各細胞因子表達水平比較［ng/L，（±s）］

表2 緩解組與活動組各細胞因子表達水平比較［ng/L，（±s）］

住院RA患者中緩解組 住院RA患者中活動組 P值IL-2 3.17±5.76 13.29±48.37 0.068 IL-4 2.03±3.69 11.65±49.58 0.057 IL-6 41.05±81.47 61.87±121.49 0.002 IL-10 3.71±4.20 11.58±33.24 0.006 IL-17A 3.00±6.31 25.27±122.88 0.047 TNF-α 6.71±14.00 19.70±71.33 0.019 IFN-γ 3.88±12.64 11.36±60.46 0.085

2.3 不同性別RA患者細胞因子表達水平比較 見表3。

表3 不同性別RA患者細胞因子表達水平比較［ng/L，（±s）］

表3 不同性別RA患者細胞因子表達水平比較［ng/L，（±s）］

男女P值IL-2 22.25±76.01 5.11±10.79 0.240 IL-4 21.28±78.17 9.54±77.24 0.099 IL-6 56.70±84.72 35.45±88.08 0.020 IL-10 17.57±51.81 4.79±6.85 0.004 IL-17A 42.99±193.20 6.62±20.20 0.888 TNF-α 37.50±111.73 14.10±24.48 0.049 IFN-γ 20.75±96.30 3.11±7.96 0.096

3 討論

RA是一種病因未明的慢性、以滑膜炎癥為主的系統性疾病。其特征是手、足小關節的多關節、對稱性、侵襲性關節炎癥，常伴有關節外器官受累及血清類風濕因子陽性，最終可以導致關節畸形及功能喪失。研究表明，RA與較多細胞因子的表達水平相關，IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α等異常表達在RA患者中起重要作用［3-4］。本資料結果顯示，與健康對照者比較，RA患者血清中IL-2，IL-4，IFN-γ含量差異無統計學意義（P＞0.05），而 IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α的血清水平則明顯升高（P＜0.05）。此外，活動期RA患者血清中IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α含量明顯高于緩解期患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。表明血清IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α表達水平與RA患者病情活動相關。

IL-6主要由單核-巨噬細胞、血管內皮細胞、Th2細胞、成纖維細胞產生，在炎癥細胞因子網絡和免疫調節網絡具有關鍵性且多樣的作用［2］。IL-17A由Rouvier發現并命名，屬于IL-17細胞因子家族的標志性細胞因子，主要由Th17細胞、γδT細胞、NK細胞分泌，在TGF-β和IL-1β存在的情況下可誘導NKT細胞產生IL-17［5］。其能有效介導中性粒細胞動員的興奮過程，從而有效介導組織的炎癥反應。TNF-α是一種由巨噬細胞對細菌感染或其他免疫源反應產生的細胞因子，能殺傷和抑制腫瘤細胞，促進中性粒細胞吞噬，抗感染，促進細胞增殖和分化，是重要的炎癥因子，并參與某些自身免疫病的病理損傷。研究表明，TNF-α抑制劑可明顯降低患者疾病活動度，改善臨床癥狀。本資料結果表明，IL-6、IL-17A、TNF-α表達水平在RA患者中明顯升高。在活動期患者中，IL-6、IL-17A、TNF-α比緩解期患者明顯升高。目前細胞因子抑制劑如IL-6抑制劑、TNF-α拮抗劑已應用于臨床，并取得一定的療效。IL-10由Th2細胞克隆分泌，是一種多細胞源、多功能的細胞因子，調節細胞的生長與分化，參與炎性反應和免疫反應，是目前公認的炎癥與免疫抑制因子，研究表明IL-10與RA的疾病活動呈負相關［2］。但是，本資料結果表明活動期RA患者血清中IL-10明顯高于緩解期患者，與文獻報道結果不符，推測與本資料病例數較少有關，活動期與緩解期病例數相差較大。因此，IL-10與RA患者的相關性有待進一步擴大樣本量后驗證。本資料結果表明IL-6、IL-10、TNF-α的含量男性患者比女性患者明顯升高，差異有統計學意義，而IL-2、IL-4、IL-17A、IFN-γ的含量與性別無關。IL-6、IL-10、TNF-α是炎癥調節因子，在類風濕關節炎患者中，性別對炎癥因子是有一定影響的。