柳楊,馬會強,劉大勇,趙夢明,賈智
(天津醫科大學口腔醫院牙體牙髓科,天津 300070)
齲病是一種牙體硬組織慢性破壞性疾病,是目前發病率最高的疾病[1]。對于罹患齲病的患者來講,備洞治療時所帶來的緊張感和不適,對其生理及心理都會造成極大的負面影響。而非手術治療在可以達到相同治療效果的前提下,既保護牙體組織,又不會對患者身心造成不利影響,從而最小程度創傷、最大限度保留牙體[2]。窩溝封閉技術作為一種非手術方式能夠治療早期齲已被許多研究證實[3]。近年來流動性樹脂充填材料治療早期齲逐漸得到認可,有臨床研究顯示用流動性樹脂可以代替傳統的窩溝封閉劑,臨床觀察流動樹脂材料的保留率甚至高于傳統窩溝封閉劑組[4-5]。本實驗將要研究的浸潤性樹脂作為一種新型的流動性樹脂充填材料具有結構穩定、抗摩擦、不易脫落等特性。但是浸潤性樹脂治療早期齲的研究較少見于文獻報道,本實驗通過比較浸潤性樹脂和窩溝封閉劑防止牙體脫礦的能力比較他們治療早期齲的效果。
1.1 對象 選擇在天津醫科大學口腔醫院口腔頜面外科門診拔出的36顆表面光潔無齲壞的中切牙,用生理鹽水沖洗干凈,超聲潔治器去除牙面菌斑和結石,手術刀片刮盡牙周附著的軟組織后,置于20%的乙醇溶液中。靜置一段時間后,在體視顯微鏡下觀察,舍棄缺損、齲洞、裂縫的牙體,從其中選取20顆最佳的牙齒作為實驗對象。
1.2 試劑及設備 熒光素鈉(上海源葉生物科技有限公司,中國);環氧樹脂(上海源葉生物科技有限公司,中國);指甲油(恩福家,中國上海);15%體積分數的鹽酸酸蝕凝膠(DMG,德國);激光掃描共聚焦顯微鏡(萊卡TCS SP5型,德國);光固化治療機(Dentsply,美國);超聲震蕩機(EPSON SG-615,日本);碳化硅砂紙(3M,美國);手術刀(中興名業,中國北京);低速沙盤(3M,美國)。
1.3 方法 手持清洗后的實驗牙于油石上,在大量水沖洗的條件下將其頰面反復摩擦至平坦,用400#、800#、1200#、2000# 的砂紙將摩擦面打磨光滑。在摩擦面的不同部位上下依次用3M(長5 mm寬1 mm)防水膠帶貼附,形成2個實驗窗口。將實驗牙整體涂布2層帶顏色的防酸指甲油,置于潔凈試驗臺上4 h,待指甲油干燥后,去除3M膠帶。見圖1。

圖1 利用防水膠帶獲得兩個實驗窗口Fig 1 Two experimental groups using waterproof tape
在常溫條件下,配制含0.05 mol/L乳酸,6%羧甲基纖維素的人工齲脫礦液,用0.1 mol/L NaHCO3調節pH為5.0。將實驗牙置于人工齲脫礦液中21 d,在此期間每天用pH試紙檢測脫礦液的pH值,應用乳酸調節脫礦液的pH值維持在5.0恒定水平。21 d后,第1次脫礦完成,在大量水沖的條件下,用低速砂盤垂直于牙體頰面沿中線的方向將標本平分為2個半牙,從而得到4個實驗區域A、B、C、D。將切割面打磨平滑后涂布2層指甲油。見圖2。

圖2 第1次脫礦后評分標本獲得4個實驗窗口Fig 2 Four experimental groups after the first demineralization
各實驗區域的處理方法為A:涂布兩層指甲油,命名為一次脫礦組;B:15%鹽酸酸蝕劑酸蝕120 s,大量水沖洗,95%酒精干燥,高壓氣槍吹干,涂布ICON浸潤型樹脂,光固化30 s,命名為浸潤性樹脂組;C:不作任何處理,命名為二次脫礦組;D:15%鹽酸酸蝕劑酸蝕120 s,大量水沖洗,95%酒精干燥,高壓氣槍吹干,涂布窩溝封閉劑,光固化30 s,命名為窩溝封閉劑組。
將實驗牙再次置于人工齲脫礦液中21 d,每天用pH試紙檢測脫礦液的pH值,應用乳酸調節脫礦液的pH值維持在5.0恒定水平。21 d后小心地清除切割面上的指甲油,在大量水沖洗的條件下,用不同表面粒度的砂紙 (400#、800#、1200#、2000#)由粗到細將切割面磨至光滑。打磨完畢后,在切割面涂布內環氧樹脂(302膠水),迅速粘固于載玻片上,置于陰涼、通風處24 h,待實驗牙與載玻片結合穩定后,用不同表面粒度的砂紙(400#、800#、1200#、2000#)將此試件打磨至100 μm厚,此時試件透光性良好。將試件沖洗干凈后,浸泡于含有100 μmol/L熒光素鈉的50%乙醇溶液中1 h使熒光染料滲透到人工齲內部。后將試件取出,在去離子水中用毛筆輕刷60 s,以去除表面的熒光染料及污物,置于95%的乙醇溶液中30 s后迅速取出,高壓氣槍吹干后,將試件置于載玻片上,滴上一滴中性樹膠,迅速蓋上蓋玻片,24 h后,中性樹膠干燥、穩定,磨片制作完成。
將磨片置于激光共聚焦顯微鏡下觀察,使用10倍物鏡,激發光的波長為488 nm。拍攝出的顯微照片用Leica QWin圖象測量及分析軟件測量人工齲的脫礦深度(方法為在綠色的熒光區域隨機選取5個定點,通過此軟件計算出平均值即為人工齲的脫礦深度)。
1.4 統計學分析 單因素方差分析(one-wayANVOA)評價封閉劑類型對牙體封閉效果的影響,S-N-K檢驗做組間兩兩比較。數據分析采用SPSS13.0統計軟件完成,統計學分析檢驗水平定為0.05。
如圖3所示,綠色熒光區域顯示人工齲脫礦深度(由于部分人工齲在制作磨片的過程中有部分脫落,所以人工齲脫礦深度實際為頰摩擦面到綠色熒光區域底部的垂直距離)。圖3A表示經過一次脫礦(21 d的脫礦時間)后人工齲的脫礦深度,在對各實驗窗口采取不同的封閉方式之前,均浸泡于脫礦液中進行過一次脫礦,所以一次脫礦組中牙體脫礦的深度作為起始脫礦深度;圖3B表示第1次脫礦后,實驗區域涂布浸潤性樹脂封閉,實驗結束后人工齲的脫礦深度;圖3C表示經過兩次脫礦(42 d的脫礦時間)后人工齲的脫礦深度;圖3D表示第1次脫礦后,實驗區域涂布窩溝封閉劑封閉,實驗結束后人工齲的脫礦深度。
實驗完成后各實驗區域脫礦深度見表1。浸潤性樹脂組和窩溝封閉劑組在第1次脫礦后,經過不同封閉方式處理后,窩溝封閉劑組第2次脫礦的深度為(31.228±7.587)μm,浸潤性樹脂組的脫礦深度為(4.531±2.163)μm(表 2),統計學分析表明,兩組之間具有明顯差異(P<0.05)。

圖3 實驗完成后各組人工齲的脫礦深度Fig 3 The demineralization depth of each group after the completion of the experiment

表1 實驗完成后各實驗窗口的脫礦深度(x±s)Tab 1 the depth of demineralization from each experimental group after the completion of the experiment(x±s)

表2 各組實驗窗口第2次脫礦的深度(x±s)Tab 2 the depth of second demineralization from each experimental group(x±s)
近年來,口腔材料學不斷發展,促進早期齲的治療方式逐漸由藥物治療、再礦化治療向窩溝封閉劑治療轉變。窩溝封閉劑是一種封閉性材料,封閉牙面后形成一層保護性屏障,阻斷早期齲損的發展,封閉劑滲透到多孔的脫礦組織中能對局部起到支持并形成阻隔微生物的屏障從而阻斷脫礦進一步發生[6],但是由于窩溝封閉劑與牙體之間結合不緊密易形成微滲漏,甚至崩解脫落從而影響封閉效果,同時由于窩溝封閉劑對早期齲內部造成影響,齲壞部位的pH值及細菌菌落及其代謝產物并沒有發生明顯的改變,從而導致早期齲進一步發展[7]。實驗結果可以看出其治療效果較差。這與Hebling等的研究相一致[8]。
窩溝封閉劑的作用是在齲壞部位外部治療早期齲,而浸潤性樹脂的作用是在齲壞部位內部治療早期齲。浸潤性樹脂是一種新型材料,它是由流動性樹脂充填材料逐漸發展而成的,研究證實流動性樹脂充填材料在臨床保留率及防止繼發齲方面優于窩溝封閉劑[9],但在操作中它須與粘接劑配合使用,增加了操作步驟及影響因素。而浸潤性樹脂是一種復合材料,通過光固化,它可以直接與牙體產生穩定的結合,而無需使用粘接劑,其作用原理為依靠其良好的流動性通過酸蝕后的牙釉質表面微孔滲透到早期齲內部,與正常牙本質廣泛地相互粘結在一起,這樣可以有效地防止微滲漏,且由于其緊密的結合方式,浸潤劑不易隨著時間以及摩擦作用而脫落。從而使生存于早期齲內的細菌失去賴以生存的pH環境及營養條件而達到治療早期齲的目的,實驗結果所示浸潤性樹脂治療效果較好,此實驗結果與Paris等關于浸潤性樹脂治療早期齲的體內實驗一致[10]。
由此可見,窩溝封閉劑是一種利用粘結力使其與齲壞的表面相結合,從而使早期齲與外界隔絕,但這種結合方式造成窩溝封閉劑與牙體結合不緊密、易脫落,容易造成微滲漏,并且牙體內部依然有大量的脫礦及崩解牙本質,依然有細菌賴以生存的環境。而浸潤劑與牙體的結合方式為樹突狀結合,不易脫落,且封閉效果好,不容易造成微滲漏,從而抑制繼發齲。
本研究結果表明,在體外模擬環境中,浸潤性樹脂治療早期齲的效果優于窩溝封閉劑,然而牙列處于復雜的口腔環境中,各種外界刺激(光照、摩擦等)是否會影響浸潤性樹脂的理化性質從而改變其與牙體結合的緊密程度尚有待進一步研究。