注射用清開靈(凍干)質(zhì)量控制研究進(jìn)展

王芳，杜鵬，茅向軍

(1. 遵義醫(yī)學(xué)院，貴州 遵義 563000；2.貴州省食品藥品檢驗(yàn)所，貴州 貴陽 550004；3.貴陽醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，貴州 貴陽 550004)

清開靈是國(guó)家中藥保護(hù)品種，由膽酸、豬去氧膽酸、水牛角、黃芩苷、金銀花、梔子、板藍(lán)根和珍珠母等8味藥材組成。在病毒感染性疾病的治療方面獨(dú)樹一幟，發(fā)揮了西藥不可替代的作用，被譽(yù)為中藥的“抗生素”[1]。但該組方中藥味較多、化學(xué)成分復(fù)雜，質(zhì)量不易控制，隨著臨床應(yīng)用的日益廣泛，發(fā)現(xiàn)與其使用說明書中未提及的不良反應(yīng)報(bào)告也逐漸增多[2]。據(jù)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局網(wǎng)站2015年不良反應(yīng)數(shù)據(jù)公示，清開靈注射劑居于榜首。因而，提高清開靈的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)刻不容緩。

1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1.1現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)注射用清開靈(凍干)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)為：YBH02472003-2006(Z)，由國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局頒布實(shí)施。但該標(biāo)準(zhǔn)僅對(duì)含氮量、黃芩苷、梔子苷、綠原酸和膽酸單一指標(biāo)進(jìn)行含量測(cè)定，但有時(shí)即使含量測(cè)定符合相關(guān)規(guī)定，仍難以保證清開靈的質(zhì)量安全，應(yīng)增加其它質(zhì)量控制方法進(jìn)一步確保該制劑的安全有效。

1.2清開靈質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀目前針對(duì)清開靈質(zhì)量控制方面的研究已有報(bào)道，其中研究清開靈君藥中膽酸類成分的文獻(xiàn)較多，但大多是針對(duì)膽酸和豬去氧膽酸的定量研究[3-7]。張加余等[8]研究清開靈注射液中膽汁酸類成分的ESI-MS/MS裂解規(guī)律，快速鑒定了14個(gè)膽汁酸類成分。Zhang等[9]采用液相-飛行時(shí)間質(zhì)譜(LC/TOF-MS)聯(lián)用技術(shù)和液相色譜-離子肼質(zhì)譜法(LC/ion trap MSn)將清開靈注射液中33種化學(xué)成分完全檢測(cè)出來。江英橋[10]采用LC-MS法分析清開靈注射液的有效成分，鑒定了21個(gè)峰；嚴(yán)詩楷等[11]采用HPLC/ELSD指紋圖譜技術(shù)結(jié)合星座圖聚類法，測(cè)定不同廠家的18批清開靈注射液的指紋圖譜，并評(píng)價(jià)產(chǎn)品質(zhì)量。嚴(yán)詩楷等[12]應(yīng)用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器-蒸發(fā)光散射檢測(cè)器聯(lián)用技術(shù)同時(shí)測(cè)定清開靈注射液中的五類有效成分。

1.3指紋圖譜清開靈的質(zhì)量控制一般采用黃芩苷等指標(biāo)成分含量測(cè)定的方法，但有時(shí)即使含量測(cè)定符合規(guī)定，產(chǎn)品質(zhì)量仍得不到有效控制[13]。指紋圖譜具有專屬性強(qiáng)、穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，可以從整體較全面地表征被測(cè)樣品主要化學(xué)成分的特征，經(jīng)過多年的發(fā)展和應(yīng)用，目前是公認(rèn)的最適合中藥及天然藥物物質(zhì)質(zhì)量控制的手段之一[14]。其中高效液相色譜法以選擇性高、分析速度快、應(yīng)用范圍廣等特點(diǎn)已成為中藥指紋圖譜技術(shù)的首選方法[15]。然而采用HPLC/DAD獲取的指紋圖譜，只獲取了一個(gè)波長(zhǎng)下的色譜數(shù)據(jù)，信息資源沒有充分展現(xiàn)出來。采用主成分分析法將不同波長(zhǎng)下檢測(cè)的數(shù)據(jù)多維融合成一張色譜圖譜，構(gòu)建的二維指紋圖譜可以保障數(shù)據(jù)損失最小，充分體現(xiàn)色譜和光譜的多維信息。

1.4多指標(biāo)含量測(cè)定對(duì)清開靈質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及控制要點(diǎn)進(jìn)行研究，主要藥效成分含量的高低是反映清開靈藥效強(qiáng)弱的指標(biāo)。明確藥效成分，完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)有效成分進(jìn)行定性定量分析，是控制清開靈質(zhì)量安全的關(guān)鍵。傳統(tǒng)指標(biāo)僅選取1～2種有效成分進(jìn)行含量測(cè)定的方法控制是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，考慮清開靈中主要藥效成分及藥理活性，采用中藥指紋圖譜與多指標(biāo)含量測(cè)定相結(jié)合可全面控制清開靈的質(zhì)量。張倩等[16]采用“一測(cè)多評(píng)”法同時(shí)測(cè)定清開靈注射液中6種綠原酸類成分的量。

1.5重金屬及有害元素質(zhì)量控制清開靈中重金屬及有害元素的殘留可能是導(dǎo)致清開靈不良反應(yīng)發(fā)生的原因之一，《中國(guó)藥典》2015年版規(guī)定以Pb、Cd、As、Hg、Cu為代表的重金屬測(cè)定。Pb、Hg中毒嚴(yán)重影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)和造血系統(tǒng)；Cd可引起心血管疾病以及腎衰竭，提高癌癥發(fā)生的危險(xiǎn)[17]。As有劇毒，嚴(yán)重可致死亡，高濃度的Cu會(huì)引起肝腎壞死[18]。劉瀟瀟[18]、胡京紅[19]、施曉光[20]等將待測(cè)樣品微波消解，采用ICP-MS法測(cè)定清開靈中重金屬及有害元素的同時(shí)測(cè)定，該方法簡(jiǎn)單易行且靈敏度高，各元素在各自的線性濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，可同時(shí)快速測(cè)定樣品中多種元素的含量。

2 藥理作用

清開靈當(dāng)前臨床多用于病毒性感冒、上呼吸道感染、急性咽炎、急性氣管炎、急性化膿性扁桃體炎、高燒等病癥[21]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究認(rèn)為，清開靈對(duì)腦、心、肝、肺等器官均有作用。主要表現(xiàn)為：通過抑制發(fā)熱介質(zhì)的生成，促進(jìn)解熱物質(zhì)的釋放，緩解由于內(nèi)生熱原和中樞發(fā)熱介質(zhì)引起的產(chǎn)熱效應(yīng)[22]。通過對(duì)白細(xì)胞滲出的減少及對(duì)白細(xì)胞枯附的抑制從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[22]，可通過減少腦出血患者腦細(xì)胞的損傷，改善腦局部血流，加快修復(fù)腦血管內(nèi)皮細(xì)胞從而改善腦循環(huán)和腦細(xì)胞功能，保護(hù)腦組織[23-24]；可促進(jìn)肝細(xì)胞的恢復(fù)和再生從而起到保護(hù)肝細(xì)胞作用[25]；可與大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物聯(lián)合從而提高對(duì)金黃色葡萄球菌的抗菌效果[26]；目前臨床應(yīng)用最多的主要是發(fā)熱和中風(fēng)。

3 不良反應(yīng)

清開靈不良反應(yīng)通常以過敏反應(yīng)為主，還有消化系統(tǒng)和血管刺激的反應(yīng)。有文獻(xiàn)報(bào)道，該藥不良反應(yīng)的發(fā)生與患者年齡、原患疾病、發(fā)生時(shí)間等因素有關(guān)[27]。處方中水牛角和珍珠母水解后產(chǎn)生的氨基酸在體內(nèi)也會(huì)激發(fā)某些敏感抗體引起過敏反應(yīng)，清開靈中綠原酸與人體血清蛋白的結(jié)合產(chǎn)物具有高度的致敏活性，黃芩苷和膽酸類成分也有一定致敏作用[28]。為最大限度的避免不良反應(yīng)的發(fā)生，在用藥前應(yīng)詳細(xì)詢問病人的過敏史，同時(shí)還需進(jìn)行皮試試驗(yàn)；醫(yī)師應(yīng)嚴(yán)格遵守《中藥注射劑臨床使用基本原則》最好單獨(dú)使用[29-30]。

4 總結(jié)

中藥注射劑不良反應(yīng)發(fā)生率一直居高不下，從指紋圖譜的角度考察清開靈(凍干)可以較全面評(píng)價(jià)清開靈的質(zhì)量，采用多波長(zhǎng)多維指紋圖譜進(jìn)行分析可以全面表征清開靈的各個(gè)成分信息，采用“多指標(biāo)含量測(cè)定”可以快速、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)清開靈的質(zhì)量。