注射用清開靈(凍干)質量控制研究進展

王芳，杜鵬，茅向軍

(1. 遵義醫學院，貴州 遵義 563000；2.貴州省食品藥品檢驗所，貴州 貴陽 550004；3.貴陽醫科大學附屬醫院，貴州 貴陽 550004)

清開靈是國家中藥保護品種，由膽酸、豬去氧膽酸、水牛角、黃芩苷、金銀花、梔子、板藍根和珍珠母等8味藥材組成。在病毒感染性疾病的治療方面獨樹一幟，發揮了西藥不可替代的作用，被譽為中藥的“抗生素”[1]。但該組方中藥味較多、化學成分復雜，質量不易控制，隨著臨床應用的日益廣泛，發現與其使用說明書中未提及的不良反應報告也逐漸增多[2]。據國家食品藥品監督管理總局網站2015年不良反應數據公示，清開靈注射劑居于榜首。因而，提高清開靈的質量標準刻不容緩。

1 質量標準研究

1.1現行質量標準注射用清開靈(凍干)現行標準為：YBH02472003-2006(Z)，由國家食品藥品監督管理局頒布實施。但該標準僅對含氮量、黃芩苷、梔子苷、綠原酸和膽酸單一指標進行含量測定，但有時即使含量測定符合相關規定，仍難以保證清開靈的質量安全，應增加其它質量控制方法進一步確保該制劑的安全有效。

1.2清開靈質量標準國內外研究現狀目前針對清開靈質量控制方面的研究已有報道，其中研究清開靈君藥中膽酸類成分的文獻較多，但大多是針對膽酸和豬去氧膽酸的定量研究[3-7]。張加余等[8]研究清開靈注射液中膽汁酸類成分的ESI-MS/MS裂解規律，快速鑒定了14個膽汁酸類成分。Zhang等[9]采用液相-飛行時間質譜(LC/TOF-MS)聯用技術和液相色譜-離子肼質譜法(LC/ion trap MSn)將清開靈注射液中33種化學成分完全檢測出來。江英橋[10]采用LC-MS法分析清開靈注射液的有效成分，鑒定了21個峰；嚴詩楷等[11]采用HPLC/ELSD指紋圖譜技術結合星座圖聚類法，測定不同廠家的18批清開靈注射液的指紋圖譜，并評價產品質量。嚴詩楷等[12]應用高效液相色譜-二極管陣列檢測器-蒸發光散射檢測器聯用技術同時測定清開靈注射液中的五類有效成分。

1.3指紋圖譜清開靈的質量控制一般采用黃芩苷等指標成分含量測定的方法，但有時即使含量測定符合規定，產品質量仍得不到有效控制[13]。指紋圖譜具有專屬性強、穩定性好、重現性好等優點，可以從整體較全面地表征被測樣品主要化學成分的特征，經過多年的發展和應用，目前是公認的最適合中藥及天然藥物物質質量控制的手段之一[14]。其中高效液相色譜法以選擇性高、分析速度快、應用范圍廣等特點已成為中藥指紋圖譜技術的首選方法[15]。然而采用HPLC/DAD獲取的指紋圖譜，只獲取了一個波長下的色譜數據，信息資源沒有充分展現出來。采用主成分分析法將不同波長下檢測的數據多維融合成一張色譜圖譜，構建的二維指紋圖譜可以保障數據損失最小，充分體現色譜和光譜的多維信息。

1.4多指標含量測定對清開靈質量標準及控制要點進行研究，主要藥效成分含量的高低是反映清開靈藥效強弱的指標。明確藥效成分，完善質量標準，對有效成分進行定性定量分析，是控制清開靈質量安全的關鍵。傳統指標僅選取1～2種有效成分進行含量測定的方法控制是遠遠不夠的，考慮清開靈中主要藥效成分及藥理活性，采用中藥指紋圖譜與多指標含量測定相結合可全面控制清開靈的質量。張倩等[16]采用“一測多評”法同時測定清開靈注射液中6種綠原酸類成分的量。

1.5重金屬及有害元素質量控制清開靈中重金屬及有害元素的殘留可能是導致清開靈不良反應發生的原因之一，《中國藥典》2015年版規定以Pb、Cd、As、Hg、Cu為代表的重金屬測定。Pb、Hg中毒嚴重影響中樞神經系統和造血系統；Cd可引起心血管疾病以及腎衰竭，提高癌癥發生的危險[17]。As有劇毒，嚴重可致死亡，高濃度的Cu會引起肝腎壞死[18]。劉瀟瀟[18]、胡京紅[19]、施曉光[20]等將待測樣品微波消解，采用ICP-MS法測定清開靈中重金屬及有害元素的同時測定，該方法簡單易行且靈敏度高，各元素在各自的線性濃度范圍內線性關系良好，可同時快速測定樣品中多種元素的含量。

2 藥理作用

清開靈當前臨床多用于病毒性感冒、上呼吸道感染、急性咽炎、急性氣管炎、急性化膿性扁桃體炎、高燒等病癥[21]。現代藥理學研究認為，清開靈對腦、心、肝、肺等器官均有作用。主要表現為：通過抑制發熱介質的生成，促進解熱物質的釋放，緩解由于內生熱原和中樞發熱介質引起的產熱效應[22]。通過對白細胞滲出的減少及對白細胞枯附的抑制從而發揮免疫調節作用[22]，可通過減少腦出血患者腦細胞的損傷，改善腦局部血流，加快修復腦血管內皮細胞從而改善腦循環和腦細胞功能，保護腦組織[23-24]；可促進肝細胞的恢復和再生從而起到保護肝細胞作用[25]；可與大環內酯類抗菌藥物聯合從而提高對金黃色葡萄球菌的抗菌效果[26]；目前臨床應用最多的主要是發熱和中風。

3 不良反應

清開靈不良反應通常以過敏反應為主，還有消化系統和血管刺激的反應。有文獻報道，該藥不良反應的發生與患者年齡、原患疾病、發生時間等因素有關[27]。處方中水牛角和珍珠母水解后產生的氨基酸在體內也會激發某些敏感抗體引起過敏反應，清開靈中綠原酸與人體血清蛋白的結合產物具有高度的致敏活性，黃芩苷和膽酸類成分也有一定致敏作用[28]。為最大限度的避免不良反應的發生，在用藥前應詳細詢問病人的過敏史，同時還需進行皮試試驗；醫師應嚴格遵守《中藥注射劑臨床使用基本原則》最好單獨使用[29-30]。

4 總結

中藥注射劑不良反應發生率一直居高不下，從指紋圖譜的角度考察清開靈(凍干)可以較全面評價清開靈的質量，采用多波長多維指紋圖譜進行分析可以全面表征清開靈的各個成分信息，采用“多指標含量測定”可以快速、準確的評價清開靈的質量。