TRIP6在胰腺癌侵襲及遷移機制中的作用

葉渟渟 王雯 張曉蘭

1福建醫科大學福總臨床醫學院，福州 350025，2中國人民解放軍聯勤保障部隊第九〇〇醫院消化內科，福州 350025

【提要】 胰腺癌起病隱匿，早期診斷率低，進展迅速，治療效果差，病死率高，因此迫切需要尋找針對胰腺癌有效且新型的診斷、治療和判斷預后的手段。甲狀腺激素受體相互作用蛋白6(TRIP6)是一種調節蛋白和局部黏附分子，參與肌動蛋白細胞骨架重組，細胞黏附、遷移和侵襲，抗細胞凋亡和轉錄調控等。相關研究顯示TRIP6表達異常可能在胰腺癌的發生、發展過程中發揮作用。

甲狀腺激素受體相互作用蛋白6(thyroid hormone receptor interactor 6，TRIP6) 也稱為zyxin相關蛋白-1，屬于LIM蛋白中zyxin家族的銜接蛋白。TRIP6包含3個LIM結構域，每個結構域含有兩個富含半胱氨酸的鋅指結構，該結構在介導各種蛋白質之間相互作用中至關重要。TRIP6主要定位于細胞質或黏著斑中，并可穿梭至細胞核，充當轉錄輔助因子。TRIP6作為一個平臺，通過LIM和TDC結構域介導的蛋白質-蛋白質相互作用，參與肌動蛋白細胞骨架重組，細胞黏附、遷移和侵襲，抗細胞凋亡和轉錄調控等[1]。現就TRIP6在胰腺癌侵襲和轉移機制中的研究進展作一綜述。

一、TRIP6在胰腺癌中的表達

TRIP6作為一種調節蛋白和局部黏附分子，在不同生物學特性的人胰腺癌細胞株中表達具有差異性。本課題組既往研究顯示，胰腺癌組織TRIP6蛋白表達明顯高于正常胰腺組織，在高神經浸潤能力的人胰腺癌Capan-2細胞株的表達強于低神經浸潤能力的PANC1細胞株；動物模型研究發現TRIP6在胰腺癌細胞浸潤的神經周圍呈強表達；通過siRNA抑制體外胰腺癌細胞株TRIP6的表達可顯著降低癌細胞的遷移及侵襲能力[2]。此外，多項研究發現，TRIP6在膠質母細胞瘤、卵巢腫瘤、鼻咽癌、尤因肉瘤中均有表達[3-5]。表明TRIP6在促進腫瘤進展中發揮重要的調節作用。

二、TRIP6在胰腺癌侵襲和遷移中的作用

大部分惡性腫瘤的主要生物學特征是侵襲和遷移，其過程復雜，胰腺癌細胞侵襲和遷移主要受腫瘤血管生成、腫瘤轉移基因與腫瘤轉移抑制基因、細胞外基質降解、細胞黏附、腫瘤微環境等因素影響[6]。

1．TRIP6與p27kip1：p27為抑癌基因，該基因轉錄、翻譯后的產物為p27kip1，是一種廣譜的細胞周期蛋白依賴激酶(CDKs)抑制因子，主要通過抑制CDK的活性阻斷細胞周期中G1/S期的轉換，從而實現對細胞周期的負調控。p27kip1表達水平下調與多種常見惡性腫瘤的侵襲及遷移相關，包括胰腺、胃和結腸等[7]。p27kip1在細胞核內表達可以增強其發揮CDK抑制劑的作用，而p27kip1在細胞質的過表達則與惡性腫瘤的侵襲性以及預后差相關。現有研究顯示，磷酸化為p27kip1表達水平下調和移位的重要分子學機制。Tazat等[8]研究表明，激活的RalA結合蛋白1(RalBP1)通過Ras信號通路誘導p27kip1在細胞質過表達，其主要通過PKB/Akt介導的S10位點磷酸化為基礎進行誘導。Lin等[9]研究則證實，TRIP6可活化Akt從而促進其誘導的p27kip1磷酸化與識別，尤其是能增加p27kip1在細胞質的定位。在惡性膠質瘤細胞、卵巢癌細胞中，TRIP6可直接與p27kip1、Akt結合，促進Akt介導的p27kip1 T157磷酸化，從而提高p27kip1在胞質的移位分布。該研究推斷，TRIP6可能與p27kip1結合，改變其構像，通過Akt促進T157重組及磷酸化。p27kip1與TRIP6、Akt在胞質中形成復合物，調控其T157磷酸化，促進LPA引起的細胞遷移。 EI-Khoueiry等[10]研究表明，抑制TRIP6表達可上調胞核p27kip1表達水平，減少p27kip1T157磷酸化。Shi等[11]證明Cyr61通過降低p27kip1胞核水平，促進胰腺癌進展。Hodul等[12]已證實維生素E生育酚通過抑制細胞周期、提高胞核p27kip1水平，抑制胰腺導管腺癌進展。Jeannot等[13]研究發現，在K-ras導致的小鼠胰腺癌模型中，p27kip1缺失加速腫瘤進展、縮短生存期，其機制為K-ras在瘤變前期引起p27kip1缺失，從而使與分化有關的腺泡極性標志物錯位分布。p27kip1失活可能促進胰腺導管腺癌進展。由此可見，p27kip1在大部分腫瘤及胰腺癌的發生發展中占有重要地位，而TRIP6則通過調控p27kip1的胞質移位及表達水平而發揮其作用。

2．TRIP6與Notch信號通路： Notch信號通路在細胞與細胞間的信息交流中扮演著重要的角色，能夠調節包括細胞增殖、分化、凋亡等多個關鍵過程以及機體許多重要的病理和生理改變，在胰腺癌的發生、發展中起重要作用。哺乳動物中Notch信號通路存在4個受體(Notch l～4)。 Ovenzano等[14]研究發現Notch2陽性的胰腺祖細胞具有分化為胰腺導管的潛能，同時Notch2在胰腺癌細胞和腫瘤血管平滑肌細胞中高表達。史微等[15]通過體外實驗發現，敲除Notch1表達可抑制胰腺癌BxPC3細胞的生長，增加細胞凋亡。有實驗發現，應用γ泌酶抑制劑阻斷Notch信號通路可明顯延緩小鼠從胰腺上皮內瘤變(PanIN)發展至胰腺癌的過程[16]。Notch信號通路激活后，Notch受體的細胞內結構域(NICD)從細胞膜上脫離并易位到細胞核內，以增強含有CBF結合位點的基因轉錄，從而促進腫瘤細胞的增殖及抗細胞凋亡。Lai等[17]用含有野生型(WT)CBF結合位點的熒光素酶報告基因構建體轉染p19細胞，結果發現TRIP6顯著促進WT CBF結合位點的熒光素酶活性。該研究還用SH-SY5Y神經母細胞瘤細胞系重復了相同的實驗，與p19細胞的結果一致，TRIP6也顯著增加SH-SY5Y細胞中的Notch活性。上述結果表明TRIP6可通過激活Notch信號通路促進胰腺癌的發生和發展。

3．TRIP6與Ras/ERK信號通路：Ras是一種含有GTP酶的鳥核苷酸結合蛋白，與GTP結合后可激活下游的Raf蛋白，Raf蛋白激活MEK(MAPK/ERK激酶)，進而激活細胞外信號調節激酶ERK，構成MAPK級聯反應。MAPK激活后可進入細胞核，通過細胞核內的磷酸化轉錄因子影響基因表達，從而調控細胞生長和增殖。當K-ras基因突變時，編碼GTP酶活性下降，Ras蛋白始終處于活化狀態，持續激活下游信號通路，導致細胞無節制異常增殖，最終引起腫瘤發生。研究報道，TRIP6通過與LPA2受體結合，可激活Ras/ERK信號通路，從而引起腫瘤細胞的抗凋亡效應[1]。Bay43-9006(索拉菲尼)為Raf激酶抑制劑，在體內、外都具有強大的抑制Raf激酶的作用，并可使胰腺癌細胞株增殖下降、細胞周期停滯[10]。TRIP6可激活Ras/ERK信號通路，而此信號通路的抑制劑可使胰腺癌細胞株增殖下降，說明TRIP6可能通過調控Ras/ERK信號通路，參與胰腺癌發生及進展。

4．TRIP6與MMPs：基質金屬蛋白酶(MMPs)屬于鋅內肽酶，它與其抑制劑是細胞外基質(ECM)成分的重要調節物，在ECM的降解過程以及腫瘤細胞的侵襲和轉移中發揮重要作用。Ellenrieder等[18]研究表明，胰腺癌有MMP-2和MMP-9的mRNA 和蛋白表達。另一研究顯示，MMPs可降解Ⅳ型膠原酶，其表達上調可促進胰腺癌細胞浸潤。Yin等[19]研究證明，轉化生長因子β(TGF-β)可上調MMP-2和uPA系統，以此介導癌細胞的侵襲。Barbara等[20]研究表明，TRIP6可與TGF-β受體復合物相結合，增強TGF-β的介導作用。Sanz-Rodriguez等[21]研究發現，TRIP6參與TGF-β介導的肌動蛋白應激纖維的形成，促進腫瘤細胞的浸潤和遷移。由此可見，TPIP6可能通過與TGF-β的相互作用，間接促進了MMPs引起的胰腺癌細胞的侵襲和轉移過程。

5．TRIP6與NF-κB：NF-κB是一種廣泛存在于哺乳動物細胞中的轉錄因子。近年來研究表明NF-κB亦參與包括胰腺癌在內的腫瘤演進。受體相互作用蛋白2(RIP2)是RIP激酶家族成員之一，已經被證明是參與激發先天性和適應性免疫應答的重要成分。Kobayashi等[22]研究表明，RIP2生理病理作用是通過參與多種NF-κB活化途徑介導的。McCarthy等[23]研究表明，RIP2過表達導致NF-κB、JNK和ERK的激活。Melisi等[24]研究表明，TRIP6作為RIP2的相關共同信號轉導組件，參與多種NF-κB的活化途徑。TRIP6的LIM結構域可與RIP2相結合，增強TNF-α、Nod1、TLR、IL-1的NF-κB活化。IL-1α可促進胰腺癌細胞株的增殖、黏附和遷移，其與Ras基因的活化和下游ERK信號通路相關[25]；IL-1α也可激活NF-κB信號通路，進而上調抗凋亡基因如BcL-XL、BfL-1的表達。

6．TRIP6與其他：由于TRIP6結構及其功能的多樣化，故其作用的發揮需要多種信號通路、因子、蛋白和基因參與。 除上述的相關因素外，TRIP6亦可與LPA2受體和Fas/CD95受體結合，通過c-Src依賴的途徑，促進LPA和Fas配體誘導的細胞遷移。PI3K/AKT信號通路也可能是TRIP6參與胰腺癌發生及進展的一種發病機制。TRIP6可通過其LIM3區域與Fas/CD95反應，從而促進FasL引發神經膠質瘤細胞遷移。Fas/CD95通過激活PI3K/AKT信號通路引起腫瘤細胞侵襲。

三、總結與展望

胰腺癌的侵襲和轉移過程是復雜的，JAK-STAT、MAPK、Wnt、Notch信號轉導通路均可能起到作用，同細胞黏附相關的眾多細胞通路如Integrin、ILK、FAK、PI3K/Akt等也可能參與，但哪條通路才是TRIP6影響細胞侵襲、遷移能力的主要信號轉導通路還需更多的基礎研究予以證實。

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