分光光度法在蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)中的實(shí)踐

□ 吳智民 珠海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心

在分光光度計(jì)中，將不同波長的光照射樣品溶液時(shí)，便可獲取波長吸收的強(qiáng)度。通過光譜可針對物質(zhì)進(jìn)行定性分析和定量分析，這種方法被稱為“分光光度法”，也稱為“吸收光譜法”。當(dāng)前，蔬菜農(nóng)藥殘留的安全問題引起社會(huì)的重視，如何準(zhǔn)確地判斷蔬菜中農(nóng)藥殘留量是各類質(zhì)檢機(jī)構(gòu)面臨的挑戰(zhàn)。分光光度法的出現(xiàn)，對于檢驗(yàn)蔬菜中農(nóng)藥殘留來說具有重要的意義。

蔬菜殘留農(nóng)藥的原因

在種植蔬菜的過程中，為了減輕或防止病原微生物和害蟲危害農(nóng)作物，種植戶常會(huì)使用農(nóng)藥，大部分農(nóng)藥可以降解，但仍有部分農(nóng)藥殘留在種植的蔬菜中，被人們食用后會(huì)在體內(nèi)慢慢富集，積累到一定程度可引發(fā)機(jī)體病變甚至癌癥，人們的生命安全受到威脅。現(xiàn)階段，分光光度法常被用于檢驗(yàn)蔬菜農(nóng)藥殘留，合理利用分光光度法，可在短時(shí)間內(nèi)獲得檢驗(yàn)的結(jié)果，并且準(zhǔn)確度有保障。另外，蔬菜保鮮時(shí)間較短，在檢驗(yàn)的過程中應(yīng)保證時(shí)效性。檢驗(yàn)蔬菜農(nóng)藥殘留的方法不少，除了分光光度法，還有氣相色譜法和高效液相色譜法等等。

分光光度法在農(nóng)藥殘留檢測中的具體應(yīng)用

原理。正常情況下，乙酰膽堿酯酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)產(chǎn)生黃色物質(zhì)。在一定條件下，蔬菜中含有的有機(jī)磷類農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥會(huì)對乙酰膽堿酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)，用分光光度計(jì)在一定波長處測定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷蔬菜中是否含有高劑量的有機(jī)磷類或氨基甲酸酯類農(nóng)藥。

方法。當(dāng)蔬菜含有有機(jī)磷類農(nóng)藥或氨基甲酸酯類農(nóng)藥時(shí)可抑制乙酰膽堿酯酶催化活性，底物不會(huì)受到乙酰膽堿酯酶作用產(chǎn)生水解，酶解顯色效果減弱。在應(yīng)用分光光度法時(shí)，可設(shè)計(jì)對照組和實(shí)驗(yàn)組，對照組用pH值為8.0的緩沖溶液2.5mL代替能抑制乙酰膽堿酯酶的農(nóng)藥提取液，其余操作與實(shí)驗(yàn)組一致。實(shí)驗(yàn)組則用pH值為8.0的緩沖溶液提取蔬菜中的有機(jī)磷類農(nóng)藥或氨基甲酸酯類農(nóng)藥，具體做法以加標(biāo)樣品為例，把不含農(nóng)藥的蔬菜剪成1cm左右見方碎片，將1g蔬菜碎片樣品放入燒杯中，加入對硫磷濃度為10μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品0.1mL，制成加標(biāo)樣品，再加入pH值為8.0的緩沖溶液5mL提取加標(biāo)樣品里的農(nóng)藥，振蕩1min，倒出提取液，靜置3min，吸取2.5mL提取液至試管并加入酶液和顯色劑各0.1mL，搖勻后于37℃放置15min，加入0.1mL底物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入分光光度計(jì)比色池中，記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值，通過計(jì)算對照組和實(shí)驗(yàn)組吸光度變化值的差值在對照組吸光度變化值中所占的百分比即為酶被抑制的程度(抑制率)，當(dāng)抑制率≥50%時(shí)，表示蔬菜中有高劑量的有機(jī)磷類或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在，樣品為陽性結(jié)果，陽性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。

結(jié)束語

綜上所述，人們長期食用殘留農(nóng)藥的蔬菜，會(huì)嚴(yán)重影響生命健康，蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)是當(dāng)前亟需開展的工作。相關(guān)研究表明，合理應(yīng)用分光光度法可提高蔬菜農(nóng)藥殘留檢驗(yàn)的效率，并且檢驗(yàn)結(jié)果具有較高的準(zhǔn)確度。目前，珠海不少農(nóng)貿(mào)市場和大型超市每天都會(huì)對在售的蔬菜等食用農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行抽查快檢，快檢的原理正是上述提到的分光光度法。