倪厚勇
(江蘇省如皋市白蒲鎮畜牧獸醫站 226511)
2007年,我國開始有北京鴨感染呼腸孤病毒病例,但沒有致死性。2011年,全國部分地區養殖戶和獸醫向動物健康服務國家實驗室反映鴨群爆發是一種傳播迅速的未知疫病[1],該病表現為精神沉郁、癱瘓,剖檢死鴨發現肝臟有局部性壞死、膽管增生、脾臟出現大面積壞死等癥狀。取病變肝臟研磨處理,離心取上清過濾接種鴨胚成纖維細胞,48h 后出現明顯細胞病變(形成合胞體)。接種鴨胚于48~72h 死亡,死亡胚體肝臟呈現腫脹、出血。電子顯微鏡下觀察到球狀帶刺的病毒粒子,與呼腸孤病毒科的其他成員一致。
呼腸孤病毒,呈球形狀,多數有囊膜,表現為20 面對稱的dsRNA 病毒。病毒外殼外鑲92 顆中空的粒子,在Csfa 梯度中,感染病毒子的密度為1.29~1.30g/ml,無感染性空衣殼為1.29~1.30g/ml,病毒芯髓為 1.44g/ml。純化病毒只含有 RNA 和蛋白質,平均含量分別為18.7%和81.3%。
1.2.1 抗原性
對病毒抗原性的分析,通過熒光抗體試驗、瓊擴試驗、補體結合試驗等[2],能明顯檢測出病毒各毒株間有明顯的群特異抗原性。而對呼腸孤病毒的分類需要結合血清學方法;但由于彼此存在大量交叉反應,分離的毒株不能作為單獨的血清型。國外對病毒抗原性的分析,呼腸孤病毒血清型繁多。Wood 等對美國和日本相關乎腸孤病毒的研究中,經試驗發現,有近11個血清型;同時,在進一步的試驗中證實:這些不同血清型之間不存在交叉保護作用。
1.2.2 培養
禽源細胞很容易分離培養禽呼腸孤病毒。常用的禽原代細胞包括雞胚的成纖維細胞、肝細胞、肺細胞、腎細胞、巨噬細胞和睪丸細胞等。最常用的是2~6 周齡雛雞腎細胞,分離火雞株時可用火雞腎細胞。結果表明,分離本病毒的雞胚肝細胞最敏感,其次為雞腎細胞,而雞胚成纖維細胞最差,此外,分離鴨源呼腸孤病毒,可用鴨胚的上述各種原代細胞。某些毒株經適應可在許多哺乳動物細胞內生長,但Vero 除外,大多數毒株不產生CPE。
1.2.3 致病性
呼腸孤病毒以鴨、雞等其他禽類易感,此病既可垂直感染,又可水平感染,而導致病毒株不多見。筆者查閱相關此病致病性的研究綜述,Clork 等認為病毒致病性有3 大類型。這3大類型為:I 型,造成禽類暫時性消化系統紊亂,誘發吸收障礙。II 型,以病毒性關節炎綜合征為典型。Ⅲ型,可誘發前兩者。上3 類感染病患都可造成病禽生長遲緩,出現心肌炎、腸炎、肝炎、胸腺萎縮、急慢性呼吸道等等癥狀。個別病型的出現,常常會因某些寄生蟲的作用而造成病癥加劇[3]。
目前,多種鳥類分離出呼腸孤病毒??梢姡瞬《緩V泛存在自然界中。鴨群中此病常見傳染源為番鴨,致病病毒在盲腸扁桃體和附關節內被分離出來。此病流行潛伏期長短與感染病毒毒型、寄生宿主日齡、受染途徑等有很大關系。多數情況下,致病病毒經呼吸道、消化道侵染番鴨,并能在短時間內迅速波及全群。此病水平傳播受病毒毒型的影響差異較大。一般來說,腸道排毒時間較呼吸道時間長,因為糞便是此病病毒的重要載體。此病存在垂直感染的可能,但經種蛋傳播的概率不高。易感群體中1日齡雛鴨最易感。后期,隨著日齡的增加,自身免疫系統的健全完善,感染此病的可能性大減。
由于宿主類型,感染年齡、機體抗病毒狀態、致病病毒毒力等方面存在差異,不良環境因素的刺激,還有各種免疫抑制病的存在都會導致鴨呼腸孤病毒感染表現出不同的癥狀。
吸收障礙型,自然感染潛伏期難以確定,表現典型癥狀:體質孱弱,精神萎靡,羽毛蓬松,行走不便?;疾?1~2 周后,典型癥狀:長勢不良,骨質疏松,腹瀉,糞便中間雜未消化的飼料。此病感染率約5%~20%,致死率達10%左右。
關節炎型/腱鞘炎型,此病多發 4~7 周齡,也有 14~16 周齡?;疾〉湫桶Y狀:跗關節上脛骨和鍵束雙側腫大,行走不便,后期腓腸肌腱有斷裂癥狀。雛鴨感染后1 周,有明顯的肝炎、心肌炎。急性感染1~3d 后恢復,但有轉變為慢性感染的可能。病程稍長的病例,病鴨步態蹣跚,后期發育不良,多見成年鴨群,恢復難度大。此病高發,但是,致死率較低約6%左右。
除上述兩種病型外,還有第3 類兼顧兩者,既表現吸收障礙,又有關節炎型/腱鞘炎型的癥狀。
吸收障礙型,典型病變病理集中在胸腺、胰腺、心肌等處。而且,誘發病因的分析較復雜,普遍認為此病的發生與胰腺損傷、甲狀腺損傷、消化道炎癥等有關系。
關節炎型/腱鞘炎型,自然感染鴨群的肉眼病變是趾層肌腱和壞伸肌腱腫脹,爪墊和蹌關節一般不出現腫脹。感染早期附關節和鎖關節腿鞘有明顯水腫。附關節內滑膜經常有點狀出血。腿部炎癥可發展為其腿鞘硬化、粘連和關節軟骨增生等特征的慢性型病變。實驗感染的鴨患肢環端骨干腫大。
鴨呼腸孤病毒感染,目前流行范圍較廣,分水平傳播和垂直傳播,致病病毒有較強的外界抵抗力,臨床防治存在一定難度。為此,降低此病毒感染的發病概率,早期落實好綜合防治措施,改善養鴨管理制度,對科學防控有不錯的效果。
常用的綜合性防治措施有做好防應激管理;飼喂用全價飼料;嚴格鴨舍的消毒管理,注意場地環境衛生,徹底清洗禽舍后,用燒堿溶液或0.5%有機碘溶液,噴施消毒,這些措施對防水平傳播效果不錯。
發現有患病病例,務必及早隔離,視病情康復情況做進一步處理。此病發現及時,注射自制的高免卵黃抗體,對控制病害發生效果不錯。用抗生素對癥治療和并發癥治療效果較好。
總結以往防控此病的經驗,考慮到致病病毒有較強的外界抵抗力,存在經機械或觸摸等簡單傳播的可能。為此,單純靠完善場內生物安全措施尚且不能起到遏制病毒擴散和蔓延的目的。較為有效的防控措施,除了自繁自養、全進全出、嚴格徹底消毒等,規范接種管理等也是很重要、關鍵的因素。
針對接種的對象有種鴨、雛鴨,本病存在母源傳染的可能,為此,做好種鴨免疫接種能有效降低后代鴨感染的可能,削減母源傳播感染的幾率。此外,雛鴨對致病病毒同樣有較強的易感性,就雛鴨對此病的易感性分析,一般1日齡最易感,而持續到2 周齡才慢慢有強抵抗力。通過接種增強母體的母源抗體水平,同樣能起到有效保護雛鴨的目的。解決這一問題,最合理的方法是開產前2~3 周對母鴨接種,用滅活苗免疫,使母鴨體內母源抗體水平提高,這樣一方面保護雛鴨,另一方面限制了病毒經卵垂直傳播的可能。
在選擇疫苗選擇上,有弱毒苗和滅活苗兩種。不同的病毒血清型不存在交叉保護。為此,確保免疫抗體的有效保護必須要選擇對應血清型的疫苗。
鴨呼腸孤病毒感染后表現的臨床癥狀呈多樣化、復雜化的特點。如何解釋這一點,筆者認為可從這幾方面辯證思考:第一,病原表現復雜化。如毒力、感染數量、對宿主的親嗜性、感染途徑等。第二,機體狀況的不同。與宿主的年齡、狀況、品種等。第三,外界環境因素的作用,如溫濕度、衛生條件等。
目前,針對鴨呼腸孤病毒感染的防治難度較大。這與鴨呼腸孤病毒血清型眾多有很大關系。為此,日常即使搞好接種防疫工作,也難免存在疫苗株與野毒株抗原上相互干擾的作用。不同血清型的病毒之間不存在交叉保護作用,為確保強免疫抗體的有效保護,必須要選擇相應血清型的疫苗。分析相關研究綜述,今后從分子學角度探討病毒與宿主間的相互作用,探討相關致病機理,提出相應的綜合防病措施是關鍵。
綜上所述,無論是國內還是在國外,對 “鴨呼腸孤病毒”感染的研究都得到相應關注。今后,隨著生物科技的不斷創新完善,病理機制、病原學診斷、預控管理等方面的不斷深入,勢必會逐漸拋開鴨呼腸孤病毒的神秘面紗。并能在此基礎上不斷優化創新綜合防控措施,降低此病的易感性。