家兔李斯特菌病的流行特征和防治

吳炎信

（安徽省肥東縣動物疫病預防控制中心 231600）

李斯特菌（李氏桿菌）病是畜禽、嚙齒動物和人的一種散發(fā)性傳染病。李斯特菌在自然界中無處不在，適應環(huán)境能力強，非常容易造成食品污染，從而引起食物中毒和李氏桿菌病的爆發(fā)。家畜和人主要表現(xiàn)為腦膜腦炎、敗血癥、懷孕母畜流產(chǎn)、單核細胞增多；嚙齒動物和家禽表現(xiàn)壞死性肝炎、心肌炎和單核細胞增多癥等癥狀。李斯特菌為侵襲性胞內(nèi)菌，可穿越宿主的3道屏障，可在巨噬細胞和非巨噬細胞(如上皮細胞等)中存活并增殖[1]。20世紀80年代以來，人類因食用被污染的動物性食品屢現(xiàn)李斯特菌病發(fā)生，且感染者死亡率較高，這才被認識到它還是一種食物源性傳染病，受到人們廣泛關注[2]。

1 病原

單核細胞增多性李斯特菌（Listeriamonocytogenes，簡稱李斯特菌）為一種細長的小桿菌，短的呈球桿狀，一般大小約1.0～3.0μm×0.5μm。無芽胞、在血清葡萄糖蛋白胨中能形成黏多糖莢膜。在20～25℃有運動性，37℃下無運動性[3]。細菌排列多呈單個散在，有時成對排成“V”形。有時呈短鏈(液體培養(yǎng)物)或絲狀(固體培養(yǎng)物)。新鮮培養(yǎng)菌呈革蘭氏陽性，陳舊培養(yǎng)物有時變?yōu)楦锾m氏陰性，兩端染色較深。需氧或兼性厭氧，在鮮血瓊脂上形成狹窄的β溶血環(huán)，0.1%亞碲酸鉀瓊脂37℃培養(yǎng)24h呈圓形、隆起、濕潤、直徑0.6μm黑色菌落，明膠中的穿刺培養(yǎng)形成像一顆倒栽的杉樹生長。胰蛋白胨瓊脂是培養(yǎng)和保存該菌的最佳培養(yǎng)基。環(huán)境中鐵離子水平對李斯特菌和李斯特菌病發(fā)展產(chǎn)生重要影響，在試管中鐵離子能促進李斯特菌生長并使其毒力增強。用凝集素吸收試驗，將本菌抗原劃分為15種O抗原和4種H抗原，共有7個血清型、16個血清變種[4]。李斯特菌在自然界分布很廣，在青貯飼料、干草、干燥土壤和糞便中能存活2年以上。在飼料中存活6～26周。對溫度和一般消毒藥抵抗力不強，85℃經(jīng)40s，55℃經(jīng)30min可以致死，3%石炭酸溶液、70%酒精溶液、5%～10%漂白粉溶液及其他常用消毒藥的一般濃度均能很快殺死。李斯特菌對抗生素敏感。對氨芐青霉素、紅霉素、新霉素、竹桃霉素敏感，對金霉素、土霉素、慶大霉素、卡那霉素、青霉素G、鏈霉素敏感性較差，對粘菌素、多黏菌素B、萘啶酮酸有耐藥性。該菌在4℃的環(huán)境下仍可生長繁殖，是冷藏食品威脅人類健康的主要病原菌之一[5]。

2 流行病學

至少有42種野生及家畜哺乳動物和17中鳥類包括家禽帶菌。本病為散發(fā)性，有時呈地方流行性。富于腐殖質(zhì)的地區(qū)，而白堊土或沙土地區(qū)甚少。病畜和帶菌者是本病的傳染源。從患病動物的糞、尿、乳汁、精液及分泌物中都曾分離到本菌。嚙齒動物持別是鼠類、野獸、野禽常成為本菌在自然界中的貯存所。本病的傳染途徑可能是通過消化道、呼吸道、眼結(jié)膜、損傷的皮膚及交配傳染。飼料和飲水是主要的傳播媒介，吸血昆蟲的媒介也有可能。應激(如營養(yǎng)不良、懷孕、天氣劇變等)在促進發(fā)病上具有重要作用。易感動物有綿羊、山羊、牛、豬、馬、犬、貓、兔、脈鼠、毛絲鼠、雞、火雞、鵝等。

3 臨床癥狀

人工感染潛伏期為1～5d，主要危害幼兔和孕兔。可分成3種類型。

3.1 急性(敗血性)型

最常見于幼兔。主要表現(xiàn)為中樞神經(jīng)癥狀，突然發(fā)病，側(cè)臥，口吐白沫，背頸、四肢抽搐，低聲嘶叫。一般是精神沉郁，衰弱，食欲廢絕。體溫40℃以上。常發(fā)現(xiàn)結(jié)膜炎和從鼻腔流出漿液性與粘液性分泌物。經(jīng)過幾小時或2～3d后死亡。

3.2 亞急性型

子宮炎：傳播迅速。母兔分娩前2～3d或若干天出現(xiàn)精神不振，拒絕采食，很快消瘦，從陰道內(nèi)流出暗紅色或棕褐色液體。分娩前1～2d病兔流產(chǎn)或死亡，也有的在流產(chǎn)時或產(chǎn)后幾天死亡，耐過的母兔將不孕。

腦膜腦炎：精神委頓、不食、全身震顫，作轉(zhuǎn)圈運動，共濟失調(diào)。頭呈彎曲狀態(tài)，失去采食和行動能力，試圖行動時會接連翻滾，逐漸消瘦而死。

3.3 慢性型

幼兔精神沉郁，眼半閉，獨居角落。體溫升高42.5～43℃，食欲廢絕，結(jié)膜炎伴有膿性眼屎，口流白沫，鼻孔流黏性分泌物。

子宮炎：通常只有個別兔患子宮炎，母兔分娩前數(shù)日食欲減退，精神不振，到預產(chǎn)期仍不分娩，多數(shù)病兔經(jīng)2～8d就死亡，幸存的母兔以后將造成不孕。

腦膜腦炎：經(jīng)過如同亞急性型一樣，但病程能遷延達6～8個月之久，并長期帶菌。

4 病理變化

李斯特菌是一種細胞內(nèi)寄生菌，能在吞噬細胞中生長，對本菌免疫主要通過淋巴因子激活T細胞介導的單核吞噬細胞。由于李斯特菌主要以細胞免疫為主，所以至今尚無有效疫苗用于畜禽生產(chǎn)上的預防。李斯特菌能產(chǎn)生李斯特菌毒素，此毒素可溶解多數(shù)哺乳動物的紅細胞；該菌進入血液可形成菌血癥，一是引起血液中的單核細胞增多，二是可使肝、脾等實質(zhì)器官發(fā)生小壞死灶。該病菌能通過污染飼料經(jīng)口腔黏膜的損傷侵入機體，進入該部位的感覺神經(jīng)和運動神經(jīng)的神經(jīng)鞘，并在神經(jīng)鞘內(nèi)繁殖，隨后到達三叉神經(jīng)進入延腦，并在此大量繁殖，從而引起腦膜腦炎和臨床神經(jīng)癥狀。在超急性敗血癥病例，很少發(fā)現(xiàn)眼觀病變，但可見內(nèi)臟器官充血和一些分散的出血。急性病例可見頸部和腸系膜淋巴結(jié)增大和水腫及胸腔、心包和腹腔積聚清朗的液體，還有皮下與肺水腫。肝臟有散在性或彌漫性、針尖大的淡黃色或灰白色壞死點。心肌、腎、脾也有相似病變。肺梗塞與腎上腺壞死。在懷孕母兔，可見腔內(nèi)積蓄化膿性滲出物的子宮炎，在子宮腔內(nèi)也可見未被吸收的變性胎兒。子宮壁上有壞死區(qū)域，并往往因炎癥過程而變厚。

肝內(nèi)的灶狀壞死為本病最常所見的鏡檢特征。在脾間或有相同的病變。在子宮壁上可見具有壞死的化膿性炎癥。有的具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)體征的病兔雖肉眼看不出病變，但可見腦膜腦炎，由大量粒細胞和單核細胞構(gòu)成血管套袖，合并灶狀壞死。這些變化在腦干、小腦基部和前部頸髓最為突出。

5 診斷

目前，國內(nèi)對該病的診斷與檢測尚處在傳統(tǒng)的分離鑒定上，包括樣品中病原的分離、生化反應及動物實驗，檢出率低，耗時長，單純根據(jù)臨床癥狀和病變不易做出診斷[6]。臨床上家兔出現(xiàn)特殊神經(jīng)癥狀、流產(chǎn)、血液中單核細胞增多時，可作為診斷參考。為了確診必須進行微生物學檢查，死前可從血液、腦脊液和陰道滲出物采樣，死后從血液、內(nèi)臟器官和腦采樣。凝集反應、補體結(jié)合反應、熒光抗體法等可用于診斷。

最簡易的方法是將病理材料的乳劑（1：5）或血清肉湯培養(yǎng)物滴于家兔或豚鼠的結(jié)膜囊內(nèi)，1d后發(fā)生化膿性結(jié)膜炎，不久因敗血癥死亡；對妊娠2周的動物滴眼后常引起流產(chǎn)。但采取病料，分離并鑒定李斯特菌才能得出決定性診斷。

6 防治

由于李斯特菌引起的感染病死率高，危害大，并已成為全球性疾病，引起了國際上的高度重視。WHO將其列為20世紀90年代四大食源性致病菌之一，并在2000年建立了全球監(jiān)測網(wǎng)，在世界范圍內(nèi)開展與食源性致病菌相關疾病的監(jiān)測[7]。我國也在2000年建立了全國食品污染物監(jiān)測網(wǎng)和食源性疾病監(jiān)測網(wǎng)。李斯特菌能導致人和動物嚴重的致死性疾病，而且難以治愈，因而受到醫(yī)學微生物學家的高度重視。由于李斯特菌的血清型變種較多，而且屬細胞內(nèi)細菌，主要的免疫應答是細胞免疫，所以至今尚未有效的疫苗應用于臨床。鼠類常為李斯特菌在自然界的貯存庫，由于老鼠經(jīng)常出沒于兔舍周圍，隨排泄物、分泌物等排出李斯特菌污染了飼料、用具和飲水等使家兔感染發(fā)病。因此，定期進行滅鼠和驅(qū)除鼠類及其他嚙齒動物顯得尤為重要。當發(fā)現(xiàn)疾病時，應對全群進行檢疫，采取撲殺病兔、隔離(期限為14d)、消毒等措施。病兔的肉尸和皮毛需經(jīng)無害處理后才能利用。從事與病兔有關工作(如看護病兔、屠宰病兔、加工皮毛等)的人員應加強個人防護。成年兔和幼兔分別按每千克體重0.25g和0.15g劑量的復方磺胺治療，2次/d，連續(xù)5d，治愈率達82%。可選用多西環(huán)素或土霉素，按每千克體重30mg，內(nèi)服，每日2次，連續(xù)3～5d。氨芐青霉素每千克體重25mg，皮下注射，每天2次。成年兔按每千克體重10mg，幼兔每千克體重5mg肌肉注射慶大霉素，每日1次。也可以青霉素與鏈霉素聯(lián)合給藥。恩諾沙星內(nèi)服，每日1次，連用7d，療效良好。硫酸新霉素拌料，每只兔2～4萬單位，每天3次，連續(xù)3～5d[8]。中藥用忍冬藤3g、梔子3g、野菊花3g、茵陳3g、鉤藤3g、車前草3g，水煎，早晚2次灌服，連續(xù)3～5d。