上杭縣鴨瘟疫苗飲水免疫效果分析觀察

熊伯立

（福建省上杭縣蛟洋鎮畜牧獸醫水產站 364200）

鴨瘟是鴨、鵝等水禽的一種常見傳染病，對養鴨生產威脅很大。生產上一般采取注射鴨疫苗的方法預防鴨瘟病。但采取注射的方法費工費時。偶然發現白砂鎮某農戶長期采用鴨瘟活疫苗飲水方法免疫預防鴨瘟，但缺乏此方法效果方面相關數據，為了了解用鴨瘟活疫苗飲水方法免疫預防鴨瘟的效果組織了本次試驗。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗動物與分組：選取上杭縣來藩養鴨場1 日齡雛黑番鴨100 羽，隨機分成 5 組，每組 20 羽。即分為對照組、注射組、飲水1 組、飲水2 組、飲水3 組。5 個組分成獨立的單欄飼養，均采取厚墊料養殖，采取一致的飼養條件。

1.2 鴨瘟活疫苗

選用哈藥集團生物疫苗有限公司生產的鴨瘟活疫苗，生產批號：201804，批準文號：獸藥生字 【2016】 080072024。含鴨瘟病毒雞胚毒株（CVCC AV1222）。每羽份病毒含量不低于103.0ELD50，規格為 500 羽/瓶。

1.3 試劑

鴨瘟（DVE）酶聯免疫分析試劑盒 (深圳市綠詩源生物技術有限公司生產)，用于測定鴨血清、血漿及相關液體中鴨瘟（DVE）表達。

1.4 檢測儀器

離心機、移液器、酶標儀、微量振蕩器等。

1.5 檢測方法

1.5.1 編號

將離心處理好的血清樣品對應微孔按序編號，設陰性對照2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1 孔。

1.5.2 加樣

分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl，然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。加樣后按試劑操作要求溫育、配液、洗滌、加酶、溫育、洗滌、顯色、終止，最后進行測定。

1.6 結果判定

試驗有效性：陽性對照孔平均值≧1.00；陰性對對照平均值≦0.10 臨界值（CLT OFF）計算；臨界值=陰性對照孔平均值-0.15

陰性判定：樣品（OD 值）＜臨界值（CLT OFF）為鴨瘟（DVE）陰性陽性判定：樣品（OD 值）≧臨界值（CLT OFF）者為鴨瘟（DVE）陽性。

1.7 試驗方法

在雛鴨養至25 日齡時進行試驗，對照組不使用鴨瘟活疫苗；注射組每羽腿部肌肉注射注射一羽份鴨瘟活疫苗，按瓶簽劑量將鴨瘟活疫苗用注射用水100ml 生理鹽水稀釋，每羽腿部肌肉注射0.2ml；飲水組雛鴨免疫前停水2h，飲水1 組飲水免疫2 頭份鴨瘟活疫苗、飲水2 組飲水免疫4 頭份鴨瘟活疫苗、飲水3 組飲水免疫8 頭份鴨瘟活疫苗。

在免疫20d 后每羽翅靜脈采血2ml 送上杭縣動物疫病預防控制中心進行檢測。

2 結果與分析

對照組11 個送檢血樣，陽性合格率為0%；注射組20 個送檢血樣，陽性合格率為80%；飲水1 組20 個送檢血樣，陽性合格率為60%；飲水2 組20 個送檢血樣，陽性合格率為70%；飲水3 組20 個送檢血樣，陽性合格率為80%。

3 討論

鴨瘟活疫苗的飲水免疫目前可供查詢的資料很少，僅查到貴州省畜牧獸醫科學研究所的范存軍和譚詩文在《中國畜禽傳染病》（1990 年第1 期）發表的《鴨瘟弱毒疫苗對雛鴨的飲水免疫試驗》[1]，他們的做法是在雛鴨的 1、5、10、15 日齡時進行飲水免疫，再在免疫在30d 和60d 進行攻毒試驗，以驗證飲水免疫的效果。本次試驗采用不同劑量的鴨瘟活疫苗的飲水和注射免疫對比試驗，采用免疫后20d 后翅靜脈采血，直接檢測抗體，具有更直觀、更準確的特點。

一般而言，15 日齡前的雛鴨有可能存在母源抗體，本試驗用鴨來自禽苗市場，來源復雜，因此在雛鴨25 日齡時開始試驗，較好地規避了母源抗體的干擾。

由于飲水免疫的影響因素較多，在采取飲水免疫時一般劑量要大于注射免疫，從本次試驗來看，采取8 頭份劑量的飲水免疫抗體合格率最高，這和生產做法一致，表明用8 頭份劑量的飲水免疫代替注射免疫鴨瘟是可行的。但由于試驗的樣本量較小，本次應用飲水免疫代替注射免疫鴨瘟的數據是否有代表性仍需進一步驗證。

由于采用的試劑盒只有96 孔，因此，對照組僅有11 個樣本，和其他組樣本數不一致。

用飲水代替肌肉注射免疫鴨瘟疫苗省工省力，且能達到效果，在生產上有一定的應用價值。