淺析非洲豬瘟疫苗研究

劉海云

（河南省新野縣動物衛生監督所 473500）

非洲豬瘟（ASF） 在東非和南非的Warthogs 和Tampan 已經傳播了許多世紀。自其公開報告以來，該病在最先在非洲快速的蔓延，給非洲的養豬戶造成了巨大的經濟損失，隨后，非洲豬瘟又傳播到了歐洲，最先在葡萄牙被發現，之后在歐洲普遍傳播開來[1]。近年來的監測顯示，非洲豬瘟已成為俄羅斯的一種地方病，非洲豬瘟在俄羅斯的疫情十分嚴重，俄羅斯存在發病豬及潛在的帶毒豬，非洲豬瘟在俄羅斯很難徹底清除，給俄羅斯養殖業帶來很大影響。我國與俄羅斯有較長的接壤范圍，俄羅斯非洲豬瘟有傳入我國的趨勢與危險性，而且近年來正在增加，越來越具有危險性[2]。盡管在國外有成功根除非洲豬瘟這種疾病的例子，但目前由于我國養殖環境的條件較差，養殖技術和管理還跟不上，導致該病在我國比較難以防控，易于爆發。目前，世界各國各個研究機構都在盡最大的努力致力于研究非洲豬瘟疫苗，以更好的防控該疾病，本文主要綜述了非洲豬瘟目前疫苗的類型、種類和各種疫苗的特點，以期為臨床上非洲豬瘟疫苗的合理使用提供寶貴建議，更好的防控非洲豬瘟的爆發。

1 滅活疫苗

滅活疫苗是一種最原始的與最經典的疫苗類型，其制備方便、快捷，自非洲豬瘟發現以來一直在開發，由于早期疫苗技術不成熟，疫苗的效價活性等并不特別強，導致非洲豬瘟滅活疫苗在給豬注射之后防治效果并不理想，有些注射了非洲豬瘟滅活疫苗的豬場，在非洲豬瘟全面大面積爆發時，仍會感染非洲豬瘟，爆發本病。現在已經由很多研究發現，非洲豬瘟的滅活疫苗效果并不好，疫苗免疫效果弱，因此，滅活疫苗研發較少，臨床使用不多[3]。在某些情況下，非洲豬瘟病毒接種于肺泡巨噬細胞懸液制備的滅活疫苗沒有保護作用，或僅起部分保護作用[4]。Freund 用完全輔助乳化的方法制備的ASFV 感染豬脾臟勻漿得到的滅活疫苗只能使ASF 同源菌株的保護率提高到70%，存活的豬均出現非洲豬瘟的臨床癥狀。由于非洲豬瘟爆發時會給豬造成巨大的傷害，而非洲豬瘟的滅活疫苗的免疫效果并不佳，因此，建議臨床上盡量少用非洲豬瘟的滅活疫苗。

2 弱毒疫苗

20 世紀50 年代，科研工作者發現在爆發非洲豬瘟之后，那些感染非洲豬瘟病毒之后，抵抗該病并且存活下來的豬，其能對相同基因型的非洲病毒再次感染產生免疫力與抵抗力。之后多年，科學家們在致力于弱化非洲豬瘟病毒的毒力，經過不懈的努力，研究者終于發現了降低非洲豬瘟病毒毒力的方法。科學家將非洲豬瘟病毒通過18I 細胞經過多次傳代后，接種家豬未引起致命感染。1963 年，研究者證實，豬骨髓細胞ASF減毒疫苗能抵抗非洲豬瘟的侵襲。在弱毒疫苗研發初期，毒力不穩定，有些弱毒的疫苗弱毒株會發生毒力返強，最開始減毒疫苗在葡萄牙應用，產生很多副作用，許多豬在接種后出現運動失調、肺炎、咳嗽等癥狀。科學家推測，這可能與接種非洲豬瘟的減毒疫苗有關，隨后在爆發非洲豬瘟的豬場分離到減毒株。非洲豬瘟的弱毒疫苗接種有一定風險，接種動物后有些動物會很敏感，發生應激，甚至死亡。研究發現，當接種非洲豬瘟減毒疫苗的豬暴露于口蹄疫、牛瘟或豬瘟環境下時，豬更容易死亡[5]。非洲豬瘟弱毒疫苗的安全問題一直是人們關注的焦點，正因如此，非洲豬瘟弱毒疫苗臨床試驗失敗次數較多，臨床應用受到限制。目前，通過自然篩選或細胞通道弱化技術，已有研究均證實ASF 減毒疫苗能夠抵抗菌株的強攻擊。目前關于非洲豬瘟，很多科學家在研究其致弱機制。隨著21 世紀，分子生物技術的飛速發展，全基因組測序技術的應用，非洲豬瘟的基因序列可以被測定而出，目前通過基因敲除手段，可以對非洲豬瘟病毒的關鍵基因進行敲除，從而使病毒致弱，這種手段的應用前景越來越大。基因敲除致弱非洲豬瘟病毒的主要手段是通過篩選突變基因，敲除的基因往往不是點突變基因，因此，其毒力返強的可能性很低，致弱之后的毒力非常穩定，此方法極具應用前景。

3 DNA 疫苗

DNA 疫苗（DNA vaccine），是主要主要用于基因治療為目的研究出的疫苗，是當今疫苗研究領域的新方向與新技術，DNA 疫苗是一種突破性技術。目前科學家正在研究各類病毒的DNA 疫苗，有關豬瘟病毒的DNA 疫苗研究也已經開始。J.M.Argilaguet 等將P30 和P54 連接到真核表達質粒pCMV-PQ 中，然而該DNA 疫苗在對豬進行免疫后不能良好的抵抗豬瘟病毒的攻擊。隨后，科學家把非洲豬瘟病毒的血凝素基因和泛素基因連接到上述DNA 疫苗中，結果仍不能達到完全的保護作用，一些免疫的豬仍然會感染豬瘟病毒。Lacasta 等利用表達文庫（Expression library） 構建了4029 個表達質粒，并對其進行了豬瘟病毒的免疫保護試驗，結果保護率僅為60%[6]。目前有關非洲豬瘟的DNA 疫苗還無法抵抗高毒力的非洲豬瘟病毒，但對于表達質粒的研究，這標志著有效非洲豬瘟DNA 疫苗的研制向前邁出了一大步。目前有很多的研究在探索非洲豬瘟基因組和保護抗原，以及表達載體的不斷修飾和優化，這些研究將會使DNA 疫苗將在未來的非洲豬瘟疫苗市場上占有一席之地。

4 其他新型疫苗

復制缺陷型病毒疫苗是近年來備受關注的一種新型疫苗。非洲豬瘟復制缺陷疫苗是一種通過去除非洲豬瘟減毒株復制過程中必需基因的基因工程方法所研制的疫苗。因此，它只能在為復制提供必要基因的輔助細胞系中進行有效復制，而不能在受感染的動物體內進行復制，因此這種疫苗可以最大化的保持病毒的原始狀態，保證完整病毒的免疫原性，不產生免疫副作用。

5 展望

非洲豬瘟只傳染豬不傳染人。非洲豬瘟不是“人畜共患病”，不傳染人，但對豬來說非常致命。非洲豬瘟是一種烈性傳染病，感染后病豬的體溫升高、呼吸急促、皮膚發紺、內臟器官出血，對于病豬的影響非常大，而且傳染性與病死率很高，會給養殖業造成巨大的損失。對于非洲豬瘟疫苗的研制迫在眉睫，然而研制穩定良好的疫苗需要一個長期的過程，目前用于非洲豬瘟的疫苗已經被研制出來多種，然而在使用過程中可能會出現病毒變異等，對疫苗的效應產生影響，因此，對于非洲豬瘟的疫苗研究仍在不懈努力與向前發展。防范非洲豬瘟，需要從政府到養殖場各部門共同進行協作，才能更好地防范[7]。