滕月
(天津市薊州區別山鎮畜牧獸醫站 301900)
早期妊娠診斷可提高奶牛繁殖率,減少空期,而且還可以提高奶牛養殖的經濟效益。近年來,奶牛早孕診斷技術不斷發展,也出現了很多新的診斷方法與技術。
超聲診斷法是利用超聲波的原理,對動物子宮進行掃描,根據信號判斷動物是否懷孕,主要有A 超、B 超、D 超,其中多普勒超聲被廣泛應用。在我國利用仿A 型妊娠報警器和自行研制的動物超聲波多普勒檢測器,對奶牛早孕的診斷進行了大量研究。鄧甘珍等在2004 年用B 超檢測了137 只處于不同妊娠階段的雌性動物,在交配后第30 天的診斷準確率為89%,在交配后31~35d 的診斷準確率為97%,在35d 以上的診斷準確率為100%。
早孕因子是一種妊娠相關蛋白復合物,妊娠前3 個月的母牛血液中,通過抑制雌性動物的細胞免疫,使胎兒能正常存活,從而達到避免母體免疫排斥的目的。Koch 等報道了雌性動物懷孕后血液和牛奶中有早孕因子。早孕因子的診斷方法主要確定早孕因子的含量,以此作為早孕診斷的重要指標。
血小板活化因子是一種在受精卵中產生的乙酰甘油磷脂,尤其在桑椹胚期。血小板活化因子可誘導血小板凝集而不釋放能量。胚胎階段的血小板激活因子可與懷孕母牛相連接。懷孕奶牛的血小板在交配7d 后顯著下降,而未懷孕奶牛的血小板計數無顯著改變。在育種前后,根據血小板計數的變化,對198 頭奶牛的血小板計數進行測定,并與交配后約50d 的直接試驗結果進行比較。結果表明,血小板計數檢出奶牛妊娠率分別為81%和90%。
懷孕期間,懷孕奶牛產生一些特定免疫球蛋白,在酸性環境中與其他蛋白質形成不溶性復合物。實際多以血清素滴定法檢測免疫球蛋白[2]。
該方法屬于免疫分析法。當精子和卵子結合形成合子時,胚胎和胎盤在母牛體內發育,絨毛膜促性腺激素是由絨毛膜滋養細胞和囊胚子葉分泌出來的,通過乳膠凝集抑制試驗測定懷孕雌性動物的尿液和奶中的激素,可作為早期妊娠診斷的方法。
尹國榮通過測定宮頸-陰道黏液電導率在妊娠早期和發情周期有規律的變化,發現健康奶牛發情時導電性水平較低,從發情開始逐漸上升到發情后期逐漸下降;發情后受精過程中,孕牛電導率變化與空牛不同。在發情周期的每個階段,懷孕奶牛的導電性明顯低于未懷孕奶牛,特別是在受精21d 后。診斷儀器主要由主電極和探針電極兩部分組成。在使用中,主機應綁在胸部,探頭電極應插入牛陰道穹窿黏液中進行檢查。
懷孕奶牛血液中堿性磷酸酶活性高于未孕奶牛,在桑葚胚階段,分裂緩慢的大細胞中含有堿性磷酸酶[3]。既往研究表明,妊娠第1 個月血清中堿性磷酸酶活性升高,在妊娠第2、3個月間顯著升高。
放射免疫分析(RIA) 是將放射性方法與免疫方法同時相結合的一種新型的方法[4]。Qishen wang 等分別檢測10 頭妊娠奶牛和10 頭發情奶牛牛奶中黃體酮的含量發現,妊娠奶牛黃體酮含量明顯高于發情奶牛。蔡志強等用抗孕激素單克隆抗體建立黃體酮包覆固相RIA 測定奶牛交配后21~58d 奶或血樣中黃體酮含量。結果表明,懷孕的檢出率為90%~95%。RIA 方法準確性、靈敏度高,但設備昂貴、技術要求高、輻射危害大,該技術的臨床應用受到一定限制。
綜上所述,目前在奶牛早孕診斷方面,由于國內外學者的不斷努力,已經出現了很多早孕診斷方法,奶牛早孕診斷技術越來越成熟。目前早孕診斷大部分的使用方法已經十分成熟,然而一些較為新式的診斷方法使用不多,甚至基層很少使用,一些診斷方法的準確性與可靠性還有待進一步驗證。然而,由于諸多因素限制,有些方法在生產實踐中無法得到廣泛有效的應用。隨著世界奶牛養殖業的快速發展和進步,奶牛早孕診斷技術將會出現更多新的方法與診斷技術,早孕診斷的準確率會越來越高。