沙琳


【摘? ?要】 該實驗主要探討最佳的豐花月季增殖培養、生根培養培養基配方,結果得出:瓶苗切段轉接到MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+ GA3 1.0 mg/L配方中,最適合豐花月季的增殖,還能減少玻璃化現象的發生;通過3-4次的繼代后,再次切段轉接到1/2MS+IBA 0.5 mg/L配方中,生根效果最佳,平均根數達到4.6條。
【關鍵詞】 增殖培養;生根培養;豐花月季;組培
Study on propagation and rooting technology of tissue culture seedlings of rose
Sha Lin
(Garden management center of jilin city, jilin province? ?132000)
[Abstract] This experiment mainly discussed the optimal formula of proliferation culture medium and root culture medium of Chinese flowering rose. The results showed that the cutting section of bottle seedlings was transferred to MS+KT 1.0mg /L+NAA 0.2mg /L+ GA3 1.0mg /L formula, which was most suitable for proliferation of Chinese flowering rose and could reduce vitrification. After 3-4 generations, the resections were cut and transferred to the 1/2 ms +IBA 0.5mg /L formula, and the rooting effect was the best, with the average number of roots reaching 4.6.
[Keywords] proliferation culture; rooting culture; chinese rose of abundant flower; seed
豐花月季,拉丁學名為:Rosa cultivars Floribunda,也叫聚花月季、多花月季、四季月季等,是薔薇科薔薇屬中的一種叢生型落木灌叢,是現代月季種類之一。豐花月季的苗木常常高0.9-1.3 m,呈叢木狀,羽狀復葉,小葉5-7片,小葉長圓形,底部由長圓形逐漸變尖。近幾年針對豐花月季的組培繁殖技術研究較多,但在豐花月季增殖、生根階段研究的較為籠統,沒有具體到配方的激素用量,因此該試驗單獨針對增殖與生根培養進行具體研究,以優化培養基配方。
1? 材料與方法
1.1? 試驗材料
豐花月季組培苗由遼寧省林科院組織培養實驗室提供,瓶苗生長健壯無菌無污染。
1.2? 儀器及藥品
試驗儀器有:高壓滅菌鍋(沈陽科瑞永興化玻璃儀器有限公司);電冰箱(美歌電器有限公司);超凈工作臺(蘇潔凈化設備公司);干燥箱(中國科學院上海光學精密機械研究所);電子天平(長春長衡電子衡器有限公司);攪拌儀(蘇州奇樂電子科技有限公司);恒溫培養箱(優尼克環境試驗設備有限公司),等。
試驗藥品有:NAA,KT,IBA,GA3,次氯酸鈉,84消毒液,升汞,新潔爾滅,酒精,戊二醛,瓊脂,白砂糖,等。
1.3? 試驗方法
增殖培養配方分別記作:B1:MS+KT 0.5 mg/L;B2:MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.02 mg/L;B3:MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.04 mg/L;B4:MS+KT 0.5 mg/L+IAA 0.06 mg/L;B5:MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L;B6:MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.04 mg/L;B7:MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.06 mg/L。
生根培養配方分別記作:C1: 1/2MS+IBA 0.3 mg/L;C2:1/2MS+IBA 0.5 mg/L;C3: 1/2MS+NAA 0.3 mg/L;C4:1/2MS+NAA 0.5 mg/L。
7種不同的增殖培養基中,每種培養基接種50瓶,每瓶接種3小段,轉接后定期觀察小段的增殖狀況,28d后統計苗木的增值倍數、平均苗高,另注意觀察一些異常狀況的發生。待增殖階段生產出大量的增殖瓶苗時,從組培瓶苗中挑選生長健壯的嫩莖切成2 cm小段,段上保持4~6片葉轉接到3種生根培養基配方上,每配方轉接20瓶,每瓶轉接5小段,定期觀察生根狀況。
2? 結果與分析
2.1? 不同增殖培養基上增殖情況
增殖階段最容易出現玻璃化現象,主要統計玻璃化瓶數,統計的具體結果見表1。
由表1可以看出,B6增值倍數最大,其次為B7、B5,而平均苗高相比較,B5較大,說明在KT 1.0水平下,生長素NAA量的增加有利于增殖,但影響到苗高的生長,另外,從B1~B6,玻璃化的比率一直處于上升狀態,B7和B6基本相當,說明生長素NAA添加,增殖倍數和苗高較IAA效果好,但容易導致苗木的玻璃化。經查閱資料顯示,在培養基中添加1.0mg/L的GA3,可以減少玻璃化現象,因此為減少玻璃化現象的發生,在第2次繼代時,選擇在B5、B6配方添加1.0mg/L GA3,28 d統計苗木增殖情況,發現B5配方添加GA3后已無玻璃化現象發生,而B6配方添加GA3雖然玻璃化比率下降,但仍有玻璃化存在,因此得出B5+ GA3 1.0mg/L,即MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.02 mg/L+ GA3 1.0 mg/L最適合作為豐花月季的增殖培養基。
2.2? 不同生根培養基上生根情況
表2是不同生根培養基中生根情況的實驗數據,根據數據可以看出,配方1和配方2的生根率最高并且達到了100%,而第三組與第四組的生根情況則不如第一組與第二組,只有72%和23%,所以比較第一組和第二組的其他因素,平均根數第二組4.6大于第一組的2.6,且根的形態較粗壯,通過對比分析得到實驗結論,C2(1/2 MS+IBA 0.5 mg/L)的配方更適合風花月季的生長。
3? 結論與討論
通過比較7個配比對豐花月季組培苗的增殖狀況,發現NAA越高越有利于苗木增殖,但又會產生玻璃化現象。經查閱資料顯示,在培養基中添加1.0mg/L的GA3,可以減少玻璃化現象,因此為減少玻璃化現象的發生,發現添加可以減少玻璃化現象的GA3,通過比較得出MS+KT 1.0mg/L+NAA 0.2 mg/L+ GA3 1.0mg/L最適合作為豐花月季的增殖培養基配方。通過比較4個配比對苗木的生根狀況,C1、C2生根率比C3、C4高且均達到100%,說明1/2 MS配方中添加IBA比NAA更有利于試管苗生根。
由于時間和精力關系,本試驗主要研究了在組培培養室階段的生長,關于出瓶后的進一步管理并未探討,還有待于進一步的研究。豐花月季為木本植物,關于扦插繁殖技術有限導致其不能大量繁殖,所以采用組培快速繁殖方面進行研究 以達到大批量的生產應用。
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