復方鋅布顆粒中布洛芬的溶出度測定

方 艷，何彥瑤，彭 騫

(湖南省兒童醫院,長沙 410007)

復方鋅布顆粒為治療感冒類非處方藥[1-2]，口服，用于緩解普通感冒或流行性感冒引起的發熱、頭痛、四肢酸痛、鼻塞、流涕和打噴嚏等癥狀[3-4]。該品為兒童感冒用藥，含有葡萄糖酸鋅、馬來酸氯苯那敏、布洛芬以及適量的輔料。具有兒童更易接受的口味及外觀性狀[5-8]。

復方鋅布顆粒處方中葡萄糖酸鋅、馬來酸氯苯那敏在水中易溶，而布洛芬在水中幾乎不溶[6]。因此布洛芬的溶出對該品的生物利用度起決定作用，該品現行標準中無溶出度控制項目[9]。本文參考《美國藥典》40版中復方枸櫞酸苯海拉明布洛芬片的溶出度檢查方法[10]，建立了以磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液(pH=6.5±0.05)為溶出介質，HPLC法測定復方鋅布顆粒溶出度的方法[11-12]。

1 儀器與試藥

1.1儀器 FADT-801RC全自動溶出度儀(富科思公司)；Dionex Ultimate 3000液相色譜儀(戴安公司)；XSE205DU電子分析天平(Mettler Toledo有限公司，精度：十萬分之一)。

1.2試藥 復方鋅布顆粒(A公司，批號：09-160307，09-170312和09-170602；B公司，批號16021981；C公司，批號20121105；D公司，批號：171002，171003和171004；E公司，批號：20171001，20171002和20171003；F公司，批號：1706131，1706132和1706133)，規格：每包含葡萄糖酸鋅0.1 g、布洛芬0.15 g及馬來酸氯苯那敏2 mg。布洛芬對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號100179-201406，質量分數為99.5%)；重蒸水；甲醇、乙腈均為色譜純，磷酸二氫銨、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉和磷酸等均為分析純。

2 方法與結果

2.1色譜條件 色譜柱：InerSustain C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相：乙腈-磷酸二氫銨溶液[70∶30(磷酸二氫銨溶液的配制：取磷酸二氫銨2.0 g，加水適量使溶解，加磷酸1 mL，用水稀釋至1 000 mL)]；流速：1.0 mL·min-1；檢測波長：263 nm；進樣量：20 μL。在該色譜條件下，布洛芬的保留時間約為6.1 min，理論塔板數大于5 000，對稱因子為1.11，不含布洛芬的陰性樣品不干擾布洛芬的測定，見圖1。

2.2溶出度實驗方法的確定 取6家生產企業的各1批供試品(A公司，批號09-160307；B公司，批號16021981；C公司，批號20121105；D公司，批號171004；E公司，批號20171003；F公司，批號1706133)，按照《中國藥典》2015年版四部通則0931溶出度與釋放度測定法第二法，轉速為50 r·min-1，參考《美國藥典》40版中復方枸櫞酸苯海拉明布洛芬片項下的條件[10]，選擇以磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液(取0.2 mol·L-1磷酸二氫鉀溶液250 mL與0.2 mol·L-1氫氧化鈉溶液50 mL，稀釋至1 000 mL，并用氫氧化鈉溶液調節pH值至6.5±0.05)900 mL為溶出介質，分別于5，10，15，20，30，45和60 min時取溶出液5 mL，濾過(同時向溶出杯中補充相同體積溶出介質)，取續濾液，按照2.1項下色譜條件分別進行測定，計算累積溶出百分率，繪制溶出曲線，結果見圖2。

圖1系統適用性實驗HPLC圖

A.布洛芬對照品；B.供試品；C.陰性樣品;1.布洛芬。

Fig.1 HPLC chromatograms of system suitability test

A.ibuprofen reference substance；B.sample；C.negative sample;

1.ibuprofen.

結果表明，5個生產企業(C公司除外，批號20121105)的復方鋅布顆粒中布洛芬在該溶出條件下溶出良好，且各企業溶出曲線存在較大差異，具有區分力，故選擇該條件測定其溶出度。

圖2各企業樣品溶出曲線

Fig.2 Dissolution curve of samples from different manufacturers

2.3溶出度測定

2.3.1線性范圍的考察 稱取布洛芬對照品0.161 6 g，置于100 mL量瓶中，加入乙腈適量使溶解，用溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液；精密吸取儲備液0.5，1.0，2.5，5.0，7.5，15.0 和25.0 mL，分別置于50 mL 量瓶中，用溶出介質稀釋至刻度，搖勻，按照2.1項下色譜條件分別進行測定，以質量濃度(C)為橫坐標、峰面積(A)為縱坐標，進行線性回歸，得標準曲線方程A=0.026 5C+0.082 4(r=1.000)。結果表明，布洛芬質量濃度在16.16～775.6 μg·mL-1范圍內，布洛芬峰面積與質量濃度有良好的線性關系。

2.3.2精密度實驗 取線性關系實驗項下第4份溶液，重復進樣6次，結果峰面積RSD值為0.31%，表明該方法進樣精密度良好。

2.3.3穩定性實驗 取線性關系實驗項下第4份溶液在室溫下放置，在0，2，4，8，12 和24 h測定，結果峰面積RSD值為0.22%，表明溶液在24 h內穩定性良好。

2.3.4回收率實驗 精密稱取布洛芬對照品16.6，25.0 和33.2 mg，各3份，分別置于200 mL量瓶中，分別加入相應比例的混合空白輔料，加乙腈10 mL使溶解，用溶出介質稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液；以溶出線性關系項下的第4份溶液作為對照品溶液。精密量取上述溶液各20 μL，按照2.1項下色譜條件分別進行測定，測得平均回收率為101.0%，RSD值為0.55%。結果表明，加樣回收率良好。見表1。

表1布洛芬的回收率實驗結果

Tab.1 Experimental results of the recovery test of ibuprofen (n=9)

加入量/mg測得量/mg回收率/%平均回收率/%17.8017.97101.0101.017.9218.14101.2101.216.1116.36101.6101.625.1625.65101.9101.924.5824.74100.7100.724.2824.49100.9100.932.5832.98101.2101.234.2834.28100.0100.035.2235.47100.7100.7

2.3.5定量限 取布洛芬對照品適量，加溶出介質逐級稀釋，進行測定，確定布洛芬的定量限(S/N≈10)為0.42 μg·mL-1。

2.3.6樣品的測定 按照《中國藥典》2015年版四部通則0931溶出度與釋放度測定法第二法，取樣品，以磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液(取0.2 mol·L-1磷酸二氫鉀溶液250 mL與0.2 mol·L-1氫氧化鈉溶液50 mL，稀釋至1 000 mL，并用氫氧化鈉溶液調節pH值至6.5±0.05)900 mL 為溶出介質，轉速為50 r·min-1，依法操作，45 min 時，取溶液適量，濾過，取續濾液作為供試品溶液；另取布洛芬對照品16.7 mg，精密稱定，置于100 mL 量瓶中，加乙腈10 mL 使溶解，用溶出介質稀釋至刻度，作為對照品溶液。測定6家生產企業的溶出度，結果見表2。

表2溶出度測定結果

Tab.2 Results of dissolution determination (n=6)

生產企業批號6個通道45 min溶出度/%123456平均溶出度/%A公司09-16030793.4094.0091.8095.1094.4091.7093.409-17031287.4088.2086.4087.9089.0089.9088.109-17060291.3092.0093.1090.8090.3090.6091.4B公司1602198198.8099.5095.9097.1098.5099.5098.2C公司2012110559.5364.6158.3862.8264.4968.6763.1D公司17100285.3092.0093.4086.1088.6085.5088.517100394.0086.8089.7085.8086.1087.5088.317100488.6084.9094.2086.7089.9085.9088.3E公司2017100183.9097.3096.7089.90102.2084.6092.42017100294.3094.1091.1094.3093.3095.6093.82017100391.1094.3093.9096.8093.5089.1093.1F公司170613194.8094.3093.9085.1096.5096.2093.5170613293.9094.7091.1089.0093.4094.1092.7170613391.4099.7091.1094.9096.4098.9095.4

3 討論

3.1溶出介質的pH值對溶出度的影響 布洛芬的溶出度受pH 值的影響較大，文獻報道的以磷酸氫二鈉-枸櫞酸緩沖液(pH=5.5±0.02)作為溶出介質的溶出實驗[13]，溶出介質pH值在±0.02 的范圍內無影響，而±0.05 的變化對布洛芬的溶出影響顯著，而實驗中由于溫度和儀器的誤差，并不易將溶出介質pH值控制在±0.02范圍內。而本文采用的以磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液(pH=6.5±0.05)為溶出介質，在pH值為6.45，6.50和6.55時，在45 min時的溶出量分別為93.1%，94.0%和90.4%，表明溶出介質pH值±0.05的變化對布洛芬的溶出基本無影響，故選擇磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液(pH=6.5±0.05)作為溶出介質。

3.2溶出度限度的確定 根據累積溶出實驗及6 家生產企業各3 批樣品溶出度測定結果，參照《中國藥典》2015 年版四部口服固體制劑的有關溶出限度的規定，制定本品溶出限度為45 min時溶出度限度應為標示量的75%。

4 結論

目前，國內有多家企業生產該品種，溶出度檢查結果顯示，不同生產企業產品溶出結果差異較大。本文建立的溶出度檢查方法，樣品溶出均一性良好，且對不同產品具有區分力，能體現不同生產工藝產品的溶出行為差異，在一定程度上反映了該產品的內在質量[14]，可用于控制復方鋅布顆粒的質量。