外周血結核感染T細胞斑點試驗對活動性結核的 診斷價值

曹暉

[摘要] 目的 探討外周血結核感染T細胞斑點試驗對活動性結核病的診斷價值。方法 方便選取2017年1月—2018年12月醫院收治的疑似結核病患者125例為研究對象，按照患者的臨床診斷結果分成47例活動性肺結核組，22例活動性結核性胸膜炎組，14例非活動性結核組以及42例非結核肺部疾病組，另選取同期在該院接受健康體檢的45名對象作為對照組。根使用T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）對所有患者進行檢查，對比4組實驗對象的T-SPOT.TE檢查結果和肺結核肺部患者的T-SPOT.TB的檢測結果。結果 活動性結合患者的陽性率明顯高于非活動性肺結核組（95.45% vs 50.00%，t=21.167 ），非結核肺疾病患者陽性率高于對照組（28.57% vs 8.89%，t=4.213，P<0.05）;活動性肺結核組患者陽性率要明顯高于活動性胸膜炎組（95.45% vs 81.81%，t=5.107，P<0.05）。結論 外周血結核感染T 細胞斑點試驗對結核病的敏感性較高，對于排除結核分枝桿菌感染有重要意義，可以減少不必要的抗結核治療，但是在實際應用中還要結合患者的實際情況謹慎判斷。

[關鍵詞] 外周血結核感染T細胞斑點試驗;活動性結核;胸膜炎

[中圖分類號] R52? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）11（b）-0178-03

[Abstract] Objective To investigate the diagnostic value of T cell spot test for peripheral blood tuberculosis infection in active tuberculosis. Methods A total of 125 suspected tuberculosis patients admitted to the hospital from January 2017 to December 2018 were convenienty selected into the study. According to the clinical diagnosis of the patients， 47 active pulmonary tuberculosis group， 22 active tuberculous pleurisy group， and 14 inactive patients were selected in tuberculosis group and 42 non-tuberculous lung disease group， 45 subjects who received a physical examination in the hospital at the same time were selected as the control group. All patients were examined by T-cell spot test （T-SPOT.TB）， and the results of T-SPOT.TE examination of four groups of subjects and T-SPOT.TB of pulmonary tuberculosis patients were compared. Results The positive rate of active combined patients was significantly higher than that of the inactive pulmonary tuberculosis group （95.45% vs 50.00%， t=21.167 ）. The positive rate of non-tuberculous lung disease patients was higher than that of the control group （28.57% vs 8.89%， t= 4.213， P<0.05）; the positive rate of patients with active tuberculosis was significantly higher than that of active pleurisy group （95.45% vs 81.81%， t=5.107， P<0.05）. Conclusion The T-cell spot test of peripheral blood tuberculosis infection is highly sensitive to tuberculosis， which is of great significance for the exclusion of mycobacterium tuberculosis infection and can reduce unnecessary anti-tuberculosis treatment. However， in practical application， the test should be carefully judged based on the actual situation of patients.

[Key words] Peripheral blood tuberculosis infection T cell spot test; Active tuberculosis; Pleurisy

肺結核疾病是常見的慢性傳染性疾病，且有很強的潛伏期，常規的痰涂片檢查需要合并大量的其它檢查項目來確診，浪費時間，但結果不理想。結核感染T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）是一種以γ-干擾素釋放試驗為基礎，通過檢測單細胞上的結核分枝桿菌來判斷疾病的新型檢驗方式[1]。T-SPOT.TB中使用的特異性抗原主要集中在結核分枝桿菌復合群中，而其他卡介苗中都沒有，所以該試驗的特異性和敏感性比較高。近些年來在潛在性結核感染的篩查中廣泛應用，但是對檢查活動性結核病患者的應用還存在一定異議，該文方便選取2017年1月—2018年12月醫院收治的疑似結核病患者125例為研究對象，展開討論。現報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取該院收治的疑似結核患者125例為研究對象，按照患者的臨床診斷結果分成47例活動性肺結核組，22例活動性結核性胸膜炎組，14例非活動性結核組以及42例非結核肺部疾病組，另選取同期在該院接受健康體檢的45名對象作為對照組。所有對象均接受生化檢查、免疫檢查和X線檢查，確診無結核病患者和結核病史。納入該次研究的所有對象均未感染嚴重器質性疾病、無哺乳期、精神疾病。

1.2? 臨床診斷標準

活動性肺結核病：痰涂片結果陽性，痰培養結核分枝桿菌陽性或痰培養結果陰性但是有結核病的臨床癥狀，影像學檢查結果能夠確診，使用抗結核藥物治療取得效果。非活動性肺結核：細菌檢查顯示為陰性，患者無任何癥狀和體征，存在肺結核病史和治療史，影像學檢查可見鈣化灶、空洞、結節性病灶、胸膜粘連等。活動性胸膜炎：胸腔積液結核桿菌培養實驗結果為陽性，組織病理檢查可見干酪樣壞死;痰涂片檢查陰性患者，存在胸腔積液滲出，腫瘤標志物陰性;使用常規治療無效果，通過抗結核治療后癥狀減輕。潛伏性結核分枝桿菌：影像學和細菌學檢查無異常，無感染病史和治療史。非結核病：通過檢查發現患者出現的癥狀是其他疾病造成的，經過對癥治療后改善[2]。

1.3? 研究方法

使用人淋巴細胞分離液進行外周血單個核細胞分離，按照T-SPOT.TB試劑盒操作說明書進行操作。

1.4? 統計方法

該次研究中收集的數據均采用SPSS 22.0統計學軟件對比分析，計量資料使用（x±s）表示，應用t檢驗;多組對比采用單因素方法進行分析，應用非參數秩和檢驗;計數資料[n（%）]使用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

活動性結合患者的陽性率明顯高于非活動性肺結核組，非結核肺疾病患者陽性率高于對照組（P<0.05）;活動性肺結核組患者陽性率要明顯高于活動性胸膜炎組（P<0.05）。見表1、2。

3? 討論

T-SPOT.TB試驗是由γ-干擾素釋放試驗發展而來的，通過RDI編碼中的CFP-10以及ESAT-6作為交換T細胞的特異性刺激原，使用γ-干擾素釋放技術來檢測人體外周血中結核分枝桿菌特有的T細胞，從而判斷疾病[3]。

我國結核病的發病率非常高，且有大量潛伏期結核感染人群，但是現在國內外均沒有關于潛伏期結核感染的明確標準，也沒有指定的標準來檢驗。T-SPOT.TB試驗通過ELISPOT技術來檢測結核疾病患者的外周血，抗原ESAT-6、CFP-10肽段庫受到刺激后會釋放γ干擾素的T細胞，通過判斷T細胞的數量可以判斷結核疾病[4]。該方法是在2001年英國學者首次應用使用，隨后在歐洲、美國等地大量使用，也取得良好的效果。從細菌學角度出發，是不存在真正的菌陰肺結核的，如果沒有結核分枝桿菌的侵襲，也就不會感染發病[5]。目前臨床上所說的菌陰肺結核患者通過檢測也同樣可以發現結核分枝桿菌，只是通過常規技術不能通過痰標本檢測為陽性。如果進行痰涂片檢查，還需要花費大量時間和多種檢查先排除呼吸系統疾病后才能確診。T-SPOT.TB檢測能夠提供準確結果，還可以減少檢查時間，為活動期肺結核患者的早期診斷提供依據。

T-SPOT.TB試驗結果不會受到CD4-T細胞的影響，且絕大部分非結核分枝桿菌和卡介苗都沒有交叉免疫反應，患者自身的免疫狀態對該試驗的影響也非常小，所以檢測結果的敏感性較高。隨著近些年來T-SPOT.TB檢查應用的逐漸廣泛，國外的學者對其開展了大量的樣本研究，得到的實驗數據顯示，T-SPOT.TB在活動性結核病中診斷敏感性約為80%～100%，特異性約為60%。該次研究結果顯示的檢測靈敏度可達到95.74%，與文獻結果大致相同[6]。在該次研究中出現了5例假陽性患者，經過二次檢查確認，其中有2例患者肺癌、2例自身免疫系統疾病和1例糖尿病，分析原因提示這部分患者由于病情比較嚴重，基礎疾病和機體免疫功能低下會掩蓋潛伏的結核分枝桿菌感染，且臨床癥狀不明顯，不容易排除。且這部分患者檢查中兩個抗原均為低強度陽性，斑點數量也少于10個，可能與樣本質量和實驗器械有一定關系，還需要加大樣本量繼續實驗。

該次研究中采用T-SPOT.TB試驗分別對非活動性結核患者和活動性結核病患者進行檢測對比，結果顯示非活動性結核患者的陽性率為50.00%，明顯低于活動性結核患者的陽性率95.45%，這與羅丹等人[7]的研究結果大致相同。該次研究中沒有將陳舊性肺炎和潛伏感染患者排除，所以才會出現非活動性結核患者出現陽性，但是T-SPOT.TB在非活動性結核患者中的檢測結果是否可以提示結核的復發率有待于進一步研究。韓利梅等人[8]的研究結果中肺結核患者與肺外結核患者的陽性率無明顯對比意義，這與該次研究結果類似，但是該次研究中肺外結核患者的陽性率略低，分析原因可能是由于該次研究收納的肺外結核患者多以結核性腦膜炎為主。患者感染肺結核后，活性T細胞會聚集在炎癥反應位置，由于病變位置有免疫病理學隔室化效應，所以T細胞數量對判斷疾病有重要意義。

綜上所述，外周血結核感染T 細胞斑點試驗對結核病的敏感性較高，對于排除結核分枝桿菌感染有重要意義，可以減少不必要的抗結核治療，但是在實際應用中還要結合患者的實際情況謹慎判斷。

[參考文獻]

[1]? 吳瓊，王堃，丘世飏， 等.T細胞斑點試驗在結核感染診斷中的臨床應用[J].中國醫師雜志，2018，20（1）：87-91.

[2]? 張少俊，楊馳，范琳.血清結核抗體診斷活動性結核病的價值[J].中國防癆雜志，2018，40（1）：20-25.

[3]? 陸小艷，楊藝，楊丹.T-SPOT.TB聯合血漿細胞因子檢測在活動性結核病診斷中的應用[J].實用臨床醫藥雜志，2016， 20（21）：41-44.

[4]? 孫開勝，李梨平，易思思.外周血T-SPOT.TB試驗對嬰幼兒結核病的診斷價值[J].醫學臨床研究，2017，34（3）：431-434.

[5]? 孫貝貝，趙麗敏，馬利軍， 等.結核感染T細胞斑點試驗在老年肺結核診斷中的價值[J].中國全科醫學，2017，20（15）：1884-1887.

[6]? 梁大華，劉航，韋彩周，等.外周血結核感染T細胞斑點試驗及其不同界值水平在結核性胸膜炎中的診斷價值[J].中國臨床新醫學，2017，10（12）：1171-1175.

[7]? 羅丹，潘建華.T淋巴亞群及T-SPOT.TB檢測對活動性結核病的鑒別診斷[J].中國熱帶醫學，2015，15（4）：393-396.

[8]? 韓利梅，李新，穆清爽， 等.外周血結核感染T細胞斑點試驗和胸水腺苷脫氨酶活性檢測在結核性胸腔積液診斷中的應用評價[J].陜西醫學雜志，2018，47（7）：940-953.

（收稿日期：2019-08-17）