重慶市璧山區孕婦地中海貧血基因缺失和突變類型分析

劉顯川 焦震華(通訊作者)

402760重慶市璧山區婦幼保健院1

402760重慶市璧山區人民醫院2

貧血是臨床十分多見的疾病，而貧血類型較多，其中地中海貧血主要是由于人體珠蛋白基因缺陷所致珠蛋白肽鏈1種或多種缺如，進而使其血紅蛋白組成成分發生改變[1]。2016年1月-2018年7月對重慶市璧山區孕婦地中海貧血基因缺失和突變類型進行分析，并總結分析結果，具體情況見下文描述。

資料與方法

2016年1月-2018年7月收治血紅蛋白成分分析結果異常的重慶市璧山區孕婦1 080例，對其地中海貧血基因缺失和突變類型進行檢測，隨后分析檢測結果。1 080例重慶市璧山區孕婦年齡25～38歲，經計算后中位年齡(31.52±1.02)歲。

試劑與儀器：選擇TC-96/G/H(b)擴增儀、PCR試劑、雜交試劑以及導流雜交儀。

標本采集：采用無菌真空抗凝管(EDTA-K2)抽取受檢人員靜脈血2 mL，并進行充分混勻，貼上標識。待標本采集后立即送檢或保存，標本在4℃的溫度下保存時間應在5 d以內，在-20℃的溫度下保存時間應在1個月以內。DNA制備：采用配套提取試劑提取受檢人員全血DNA，對DNA濃度采用1080分光光度計進行測定。DNA擴增和雜交：對β-地中海貧血和α-地中海貧血進行PCR檢測，在檢測過程中嚴格根據說明書進行，并將標記不同缺失或突變類型以及擴增產物在導流雜交儀上進行導流雜交，然后通過NBT/BCIP底物化學顯色和酶標判讀診斷結果。

觀察指標：分析重慶市璧山區孕婦不同類型地中海貧血檢出率和不同類型地中海貧血的基因類型。

統計學方法：在本次研究內容中采取SPSS 26.0軟件分析數據，P＜0.05表示差異有統計學意義。

結 果

不同類型地中海貧血檢出率：15種突變類型β-地貧檢出159例(14.72%)，3種缺失型α-地貧檢出239例(22.13%)，2種突變型α-地貧檢出5例(0.46%)。共計403例，陽性率37.31%。

15種突變類型β-地貧基因類型中，CD17M最高(31.45%)。分別為：CD14-15M型0例(0%)；CD17M型50例(31.45%)；CD27-28M 型 2 例 (1.26%)；CD31M型0例(0%)；CD41-42M型41例(25.79%)； CD43M 型 5 例 (3.14%)；CD71-72M型7例(4.4%)；IVS-Ⅰ-1M型0例(0%)；IVS-Ⅰ-5M型0例(0%)；IVS-Ⅱ-654M型35例(22.01%)；-28M型10例(6.29%)；-29M型2例(1.26%)；CapM型2例(1.26%)；IntM型0例(0%)；βEM型5例(3.14%)。

3種缺失型α-地貧基因類型：3種缺失型α-地貧基因類型中，-SEA最高(46.03%)。分別為：-SEA型110例(46.03%)；-α3.7型102例(42.67%)；-α 4.2型27例(11.3%)。

2種突變型α-地貧基因類型：2種突變型α-地貧基因類型中，CS占比最高(80.00%)，其中CS型4例(80%)，QS型1例(20%)。

討 論

地中海貧血又被稱為海洋性貧血，對于重型地中海貧血新生兒，其出生后即可出現黃疸、貧血和肝脾腫大等現象，以地中海貧血面容作為臨床表現[2]。而對于輕度和中度地中海貧血，多數患者能夠存活至成年，而輕度則無特異性癥狀。根據我國研究報道顯示，地中海貧血在重慶、廣西、海南、四川、廣西等區域最為常見，在北方十分少見。而重慶地區的地中海貧血的基因類型具有一定特點，在α-地中海貧血基因類型中-SEA/αα最高，β-地中海貧血基因類型中CD17(A→T)最高。

綜上所述，對重慶市璧山區孕婦地中海貧血基因缺失和突變類型進行檢測，能夠為臨床診療提供有利依據。