紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬生長性能及機(jī)體免疫水平的影響

高 仙，龍冰雁

豬繁殖與呼吸綜合征又稱藍(lán)耳病（PRRS），是一種由豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）引起的病毒性傳染病。該病毒傳染性強(qiáng)，可通過空氣、胎盤、精液等途徑傳播，對(duì)各階段的豬均有感染性，仔豬感染的死亡率可達(dá)70%（張紅英，2007）。我國2006年因高致病性PRSSV造成的疫情導(dǎo)致豬業(yè)養(yǎng)殖損失巨大，豬肉價(jià)格升高。PRRSV具有高度遺傳多樣性，且對(duì)宿主免疫系統(tǒng)具有抑制作用，因此PRRSV能在豬體內(nèi)持續(xù)性感染長達(dá)16個(gè)月。由于致病病毒的一系列生物學(xué)特征，PRRS傳染性強(qiáng)，致死率高，治療十分困難（王俊文，2012）。目前，接種疫苗是控制該病較為有效的途徑，滅活疫苗免疫效果不強(qiáng)，弱病毒疫苗存在潛在風(fēng)險(xiǎn)，因此，研發(fā)更加安全、有效的疫苗及免疫增強(qiáng)劑對(duì)PRRS的預(yù)防尤為重要。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，草藥或植物制劑能刺激動(dòng)物免疫系統(tǒng)、增強(qiáng)生長性能，且具有安全、無污染的特點(diǎn)。紫錐菊是一種多年生菊科植物，已被用于人類醫(yī)學(xué)，體外試驗(yàn)表明，紫錐菊具有非特異性免疫刺激作用，包括促進(jìn)吞噬作用，增加細(xì)胞因子的產(chǎn)生等（胡海燕等，2017）。但紫錐菊能增強(qiáng)免疫的特性是否可以增強(qiáng)PRRSV的免疫效果尚不清楚。因此，本研究旨在評(píng)價(jià)飼糧添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬生長性能及機(jī)體免疫水平的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 紫錐菊購買自湖南省某藥材公司，根部風(fēng)干后制成超微粉。將粉末密封后于干燥處保存，待用。

R98 PRRSV株活疫苗購買自湖南某動(dòng)物藥業(yè)有限公司，試驗(yàn)使用時(shí)每毫升疫苗含10×104的TCID50。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在湖南省某規(guī)模化豬場(chǎng)進(jìn)行，選取75頭體重相近的21日齡斷奶雜交仔豬隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組、疫苗對(duì)照組和試驗(yàn)1、2、3組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3頭豬。適應(yīng)期為7 d，正式試驗(yàn)時(shí)，空白對(duì)照組和疫苗對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加1.5%、3.0%、4.5%的紫錐菊粉末。正式試驗(yàn)第1天，疫苗對(duì)照組和試驗(yàn)組仔豬肌肉注射2 mL PRRSV疫苗，空白對(duì)照組注射等量生理鹽水。正式試驗(yàn)為期30 d，每天早晚飼喂兩次，自由飲水，基礎(chǔ)飼糧組成見表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長性能 每天記錄給料量和飼料剩余量，分別在試驗(yàn)第1、10、20、30天稱量仔豬空腹體重，計(jì)算仔豬的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）、飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）。

1.3.2 免疫功能 每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇一頭仔豬，分別在試驗(yàn)第10、20、30天前腔靜脈采集血液樣品5 mL/頭，靜置離心后取上層血清。用ELISA試劑盒測(cè)定血清中IgM、IgG的濃度以及PRRSV特異性抗體的含量，抗體含量最終以S/P值表示，所有檢測(cè)按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS20.0進(jìn)行單因素方差分析，Duncan’s法進(jìn)行多重比較，以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧中添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬生長性能的影響 由表2可知，與空白對(duì)照組相比，注射藍(lán)耳病弱病毒（疫苗對(duì)照組）對(duì)仔豬生長性能無顯著影響。與疫苗對(duì)照組相比，試驗(yàn)10～20 d，試驗(yàn)2組仔豬ADG增加6.6%（P＜ 0.05），試 驗(yàn) 1、2、3組 FCR分 別 下 降 4.8%、5.6%、3.7%（P ＞ 0.05）；試驗(yàn) 20～ 30 d，試驗(yàn) 1、2、3組仔豬 ADG分別增加 6.5%、7.5%、5.7%（P＜0.05），試驗(yàn)1、2組FCR分別顯著降低5.7%、5.6%（P＜0.05）；以整個(gè)試驗(yàn)周期來看，試驗(yàn)1、2、3組仔豬平均末重、ADG、FCR均有一定改善，但未達(dá)顯著水平。除此之外，在試驗(yàn)的各個(gè)階段，試驗(yàn)組仔豬ADFI較疫苗對(duì)照組均無顯著變化（P＞ 0.05）。

表2 飼糧中添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬生長性能的影響

2.2 飼糧中添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬機(jī)體免疫水平的影響 由表3可知，與空白對(duì)照組相比，疫苗對(duì)照組仔豬血清中PRRSV特異性抗體在注射藍(lán)耳病弱病毒10、20、30 d后分別增加41、10、73倍（P ＜ 0.05），而血清中 IgM、IgG濃度無顯著變化（P＞0.05）。與疫苗對(duì)照組相比，試驗(yàn)第20天，試驗(yàn)1、2、3組仔豬血清中PRRSV特異性抗體濃度分別增加9.3%、22.4%、14.6%（P＜ 0.05），IgM濃度分別增加 4.4%、7.8%、7.3%（P＞ 0.05）；試驗(yàn)第 30天，試驗(yàn) 1、2、3組仔豬血清中PRRSV特異性抗體濃度分別增加10.3%、15.2%、7.2%（P＜ 0.05），IgM濃 度 分 別 增 加10.0%、11.1%、7.1%（P＜0.05）。試驗(yàn)組仔豬在注射藍(lán)耳病弱病毒10 d后血清中特異性抗體和IgM濃度較疫苗對(duì)照組無顯著變化（P＞0.05），此外，在試驗(yàn)各個(gè)階段，試驗(yàn)組仔豬血清中IgG濃度較疫苗對(duì)照組也無顯著差異（P＞0.05）。

表3 飼糧中添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬機(jī)體免疫水平的影響

3 討論

3.1 飼糧中添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬生長性能的影響 本研究結(jié)果顯示，注射藍(lán)耳病弱病毒后，仔豬生長性能較對(duì)照組無顯著變化。藍(lán)耳病最早發(fā)現(xiàn)于美國，在我國爆發(fā)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，感染豬群內(nèi)部和群與群之間的癥狀差異很大，但感染在豬個(gè)體中一直持續(xù)，接種疫苗是預(yù)防藍(lán)耳病的途徑之一。王俊文（2012）研究發(fā)現(xiàn)，接種PRRSV疫苗后育肥豬體溫升高，ADFI、ADG顯著下降。但肖犟（2010）報(bào)道，注射PRRSV弱毒株仔豬ADG高于對(duì)照組。這些試驗(yàn)結(jié)果的差異可能是由試驗(yàn)對(duì)象年齡和試驗(yàn)條件不同造成的。紫錐菊在臨床上得到廣泛應(yīng)用，近年來在動(dòng)物生產(chǎn)中也逐漸得到利用，其主要成分包含多糖、烷基酰胺類和咖啡酸衍生物等，具有免疫促進(jìn)作用，改善生長（牛小飛等，2015）。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加紫錐菊顯著提高注射病毒組仔豬的ADG、顯著降低FCR。Maass N（2004）研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加紫錐菊汁液顯著降低育肥豬FCR，其他生長指標(biāo)未發(fā)現(xiàn)顯著變化。賈青輝等（2017）以貉為研究對(duì)象，在飼糧中添加1.0%、1.5%的紫錐菊超微粉處理10周，顯著增加貉的ADG、ADFI，F(xiàn)CR顯著降低。以上研究表明，紫錐菊具有生長促進(jìn)作用，注射藍(lán)耳病弱病毒時(shí)，飼糧中添加紫錐菊能顯著促進(jìn)仔豬生長。但宋淑珍等（2018）的研究表明，飼糧中添加紫錐菊地上部分提取物可以顯著提高肉羊?qū)λ嵝韵礈炖w維的消化率，而對(duì)肉羊ADG、ADFI和FCR無顯著影響。這表明紫錐菊添加部位、濃度和處理對(duì)象不同，對(duì)動(dòng)物的處理效果也存在差異。

3.2 飼糧中添加紫錐菊對(duì)注射藍(lán)耳病病毒仔豬機(jī)體免疫水平的影響 注射藍(lán)耳病弱病毒后引起豬特異性的細(xì)胞免疫反應(yīng)，在注射1周左右能在血清中檢測(cè)到特異性抗體，這一結(jié)果在育肥豬和仔豬上都得到證實(shí)（王俊文，2012；肖犟，2010）。在本研究中注射藍(lán)耳病弱病毒10 d后仔豬血清中特異性抗體濃度顯著增加，與以往研究相符，且隨著注射時(shí)間的推移，血清中特異性抗體濃度逐漸增加，在30 d左右達(dá)到最高（王俊文，2012；張紅英，2007）。李炳霞等（2016）報(bào)道，飼糧中添加復(fù)方中草藥制劑促進(jìn)患藍(lán)耳病仔豬產(chǎn)生特異性抗體，對(duì)藍(lán)耳病有顯著治療效果。紫錐菊是一種應(yīng)用廣泛的中草藥，具有免疫增強(qiáng)劑的作用，能顯著提高動(dòng)物對(duì)抗原的抵御能力（Hudson J B等，2012）。牛小飛等（2015）研究表明，灌服紫錐菊顯著提高免疫低下小鼠T淋巴細(xì)胞CD4亞群的百分率及血液中IL-2的濃度，免疫力顯著提高。賈青輝等（2017）報(bào)道，飼糧中添加紫錐菊超微粉顯著提高貉血清中IgA、IgG的濃度，且顯著提高其抗氧化能力。肖犟（2010）研究表明，飼糧中添加免疫增強(qiáng)劑顯著提高注射藍(lán)耳病弱病毒仔豬血清中藍(lán)耳病病毒特異性抗體的濃度、延遲抗體維持時(shí)間，同時(shí)提高血清中IgM、IgG的濃度，不同種類免疫增強(qiáng)劑的作用效果存在差異。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，仔豬注射藍(lán)耳病弱病毒時(shí)，飼糧中添加紫錐菊顯著提高仔豬血清中藍(lán)耳病病毒特異性抗體濃度及IgM的濃度。以上研究表明，紫錐菊起到免疫增強(qiáng)劑的作用，能增強(qiáng)藍(lán)耳病弱病毒的免疫效果。

4 結(jié)論

綜上所述，飼糧中添加紫錐菊顯著促進(jìn)注射藍(lán)耳病弱病毒仔豬的生長及弱病毒的免疫效果，添加量為3.0%時(shí)效果最好。但紫錐菊種類、植株生長土壤類型、收獲時(shí)植株生長階段及加工過程都會(huì)影響化學(xué)成分和活性；同時(shí)，不同部位的化學(xué)成分差異很大，很難標(biāo)準(zhǔn)化，因此，紫錐菊用于增強(qiáng)藍(lán)耳病疫苗的免疫效果，還需要進(jìn)一步研究。