紀經良,李 穎
球蟲病是由球蟲原蟲引起的一種雞腸道寄生蟲病,主要影響雛雞,并通過接觸受感染的雛雞而傳播。寄生蟲在上皮細胞中的增殖導致組織壞死,由此增加腹瀉、腸道出血的發生率,并可能導致消化過度,使雞的日增重、采食量和飼料轉化率降低,最終給家禽養殖業造成重大的經濟損失。應用抗球蟲藥和滅活疫苗是預防和控制該病的常用方法,但頻繁使用抗球蟲藥物會導致抗藥性及艾美耳菌株的擴散,同時疫苗生產成本很高。因此,需要開發安全、廉價的方法來控制雞球蟲病的發生。牛至精油以其抗菌、抗真菌和抗原生動物活性而聞名(Botsoglou等,2002),其包含香芹酚和百里香酚,含量占到78%~82%。盡管有一些關于牛至油對家禽球蟲病影響的可用信息(Tsinas等,2011),但需要更多的研究來評估其有效添加量。因此,本研究旨在通過比較牛至精油與抗球蟲藥物對肉雞生長性能和球蟲病預防的影響。
1.1 試驗設計與飼養管理 試驗共選擇250只1日齡雌性肉雞,采用完全隨機試驗設計,共分為5組,每組5個重復,每個重復10只。試驗處理包括陰性對照組、陽性對照組、陽性對照日糧+200 mg/kg抗球蟲藥(殺球靈)、陽性對照日糧+200或400 mg/kg牛至油。各階段肉雞的基礎日糧組成及營養水平見表1。雛雞在出生后7 d內飼養在32℃、撒有木屑的水泥地板上,在第21天溫度降至23℃。試驗前2 d采用連續光照,在3~42 d光照23 h,光照強度為20 lx。試驗期間肉雞自由采食和飲水,按照常規免疫方法對雞只進行免疫。
1.2 球蟲感染 在試驗第22天,除陰性對照組外的所有試驗組均口服50倍劑量的滅活球蟲疫苗,以造成輕度球蟲病感染。每劑疫苗在0.01 mL蒸餾水中含有300~500個孢子卵囊,陰性對照組用0.5 mL蒸餾水假接種。
1.3 樣品收集與分析 每周按重復記錄肉雞體重和飼料消耗量,記錄死亡率并對死亡雞只進行稱重。根據這些數據,計算各階段和整個試驗期間肉雞的日增重、日采食量和料重比。在試驗第28天,每個重復隨機選擇2只雞,稱重,屠宰,收集十二指腸,并檢查腸道3個區域(上部、中部和盲腸)的球蟲病變。根據病變嚴重程度,每只雞分別記錄為0分(無病變)、1分(輕度病變)、2分(中度病變)、3分(嚴重病變)或4分(極嚴重病變)。累積損害評分用于判斷整體的治療效果。

表1 1~42d基礎日糧組成及營養水平
各組糞便樣本于攻毒后第28天采集,參考Landman(2003)的方法評估每克糞便卵囊計數,并對糞便及凋落物進行評分。采用pH計測定分別在每個糞便樣品的5個位置測定pH,然后以平均值表示。
1.4 數據分析與統計 試驗數據采用SPSS軟件的單因素方差分析模型,對照組與處理組各種指標的平均值差異性用Tukey法進行多重比較,結果以P<0.05作為差異顯著判定標準。
2.1 牛至油和球蟲藥對肉雞生長性能的影響本試驗期間,各組肉雞的死亡率均<1%,且與處理無關。在試驗前3周及整改試驗期間,各組肉雞生長性能分別見表2和表3。在試驗第28天,感染艾美球蟲一周后,未感染組和感染組+牛至油較陽性對照組顯著提高肉雞日增重(P<0.05)。試驗第29~35天時,未感染組肉雞平均日增重顯著高于其他組(P<0.05),各感染組間日增重無顯著差異(P>0.05)。各處理對各階段肉雞平均日采食量無顯著影響(P>0.05)。

表2 牛至油和球蟲藥對1~21d肉雞生長性能的影響

表3 牛至油和球蟲藥對22~42d及1~42d肉雞生長性能的影響
22~28 d各處理對肉雞料重比具有顯著影響,其中未感染組和感染組+400 mg/kg牛至油較陽性對照組顯著改善料重比(P<0.05),但感染組+200 mg/kg牛至油和陽性對照組對料重比的影響無顯著差異(P>0.05)。各組對1~21 d、22~42 d、1~42 d日增重和平均日采食量及1~21 d肉雞料重比均無顯著影響(P>0.05)。未感染組較陽性對照組顯著改善22~42 d和1~42 d肉雞的料重比(P<0.05)。
2.2 牛至油和球蟲藥對28 d肉雞球蟲病評分、糞卵囊數、凋落物質量和pH的影響 由表4可知,各處理組對上部和中部區域球蟲病變評分具有顯著影響(P<0.05),但對盲腸區域球蟲病變無顯著影響(P>0.05),其中未感染組較陽性對照組顯著降低小腸上部區域病變評分(P<0.05)。與未感染組相比,感染組+400 mg/kg牛至油或200 mg/kg球蟲藥對小腸上部區域病變評分無顯著影響(P>0.05)。與其他組相比,未感染組和感染組+200 mg/kg球蟲藥組糞卵囊數最低(P<0.05),但感染組+400 m/kg牛至油較陽性對照組顯著降低糞卵囊數(P<0.05)。陽性對照組較其他組顯著提高凋落物和糞便評分及糞pH(P< 0.05)。

表4 牛至油和球蟲藥對28d肉雞球蟲病評分、糞卵囊數、凋落物質量和pH的影響
球蟲病會導致肉雞嚴重的生長問題,如吸收不良、痢疾等。在本研究中,在感染球蟲病的肉雞日糧中添加400 mg/kg牛至油可以減少球蟲病對生長性能的有害影響,這與Tsinas等(2011)的研究結果一致。由于本試驗中肉雞受到輕度的球蟲病感染,一周后,這些肉雞能抵抗球蟲病的影響。Scheurer等(2013)指出,15 d感染球蟲病時對第22~39天的處理組肉雞生長性能參數沒有顯著影響。牛至油含有百里酚和香芹酚等酚類物質,其可以通過改變陽離子通透性與細胞膜相互作用,如H+和K+,離子梯度的耗盡導致細胞內基本過程的破壞,允許細胞成分外漏,導致水環境失去平衡,細胞膜電位崩潰,抑制ATP合成,最終導致病毒細胞死亡(Ultee等,2002)。由此可以得出結論,牛至油通過縮短寄生蟲的生命周期,可控制和預防球蟲病,同時牛至油可以降低新生腸上皮細胞的污染,提高營養物質的吸收能力。
不同研究者用來判斷球蟲病療效效果的一些指標包括組織病變評分、每克糞中卵囊卵數和糞便評分。在本研究中,未受感染組的病灶評分高于0分,表明在研究期間這些肉雞也感染了球蟲病,感染可能是由于來自受感染肉雞的交叉污染,因為本研究是使用開放的圍欄進行飼養試驗。試驗結果發現,牛至油對球蟲病感染組織病變評分有改善作用。由于牛至油所含的百里香酚和香芹酚的抗菌機制是破壞細胞膜、抑制ATP酶活性和釋放細胞內ATP,這些物質進入磷脂雙分子層,并在脂肪酸鏈之間排列,使細胞膜具有通透性,同時這種修飾會導致膜膨脹、失穩,增加膜的流動性,從而增加被動滲透率(Giannenas等,2013)。
球蟲感染最重要的特征之一是由腹瀉引起的水樣排泄物導致的濕糞問題。因此,添加抗球蟲藥可能會改善凋落物的質量。本研究發現,日糧添加牛至油可以降低腸道損失,降低凋落物評分和糞中卵囊數,這與Abd El-Wahab等(2012)的報道一致。凋落物pH影響氨的釋放,應低于7,以減少氨的揮發。此外,未經酸化劑處理的凋落物的pH通常接近8或略高,在本研究中,由于球蟲病引起的水樣凋落物增多,導致凋落物pH升高,而日糧添加400 mg/kg牛至油可降低肉雞凋落物得分和pH,減少球蟲病對肉雞的危害。
肉雞在22 d時受到艾美耳球蟲感染主要影響22~28 d的生長性能。日糧中添加400 mg/kg牛至油可以減輕球蟲感染對肉雞的影響,其效果與抗球蟲藥一致。根據本研究的結果及已知使用抗球蟲藥物的危害,在肉雞日糧中添加400 mg/kg牛至油可能是抗球蟲藥物的替代選擇。