TMEM16A氯通道對心肌缺血再灌注后損傷大鼠乳酸脫氫酶和肌酸激酶同工酶的影響

蘇振宇 黃建成 董彥博 李小兵 張會軍

(河北醫科大學第一醫院心外科，河北 石家莊 050031)

心肌缺血再灌注后損傷的具體發病機制還不明確，是多種因素相互作用的結果〔1，2〕。減少心肌細胞內鈣超載是防治再灌注損傷的重要環節，Ca2+也是調節心肌細胞收縮和舒張所必需的因素，心肌細胞內游離鈣濃度〔(Ca2+)i〕維持在一定范圍方能保證心肌正常功能〔3〕。成熟心肌〔(Ca2+)i〕主要靠肌漿網的釋放與隔離作用來調節。而未成熟心肌的肌漿網稀疏、質膜面積和細胞容積比值大，鈣泵活性低〔4，5〕。為此在心肌缺血再灌注后中使用鈣通道阻斷劑使細胞外鈣內流減少，可減輕細胞內鈣超載，對心肌有保護作用〔6，7〕。鈣激活氯通道(CaCCS)在組織中分布廣泛，包括血細胞、上皮細胞、內皮細胞中，可參與腺體和上皮分泌、感覺傳導、細胞增殖、神經和心肌興奮性調節、細胞分裂周期等〔8，9〕。跨膜蛋白(TMEM)16A為鈣激活氯通道的分子基礎，在腫瘤組織中明顯表達上調〔10，11〕，但是對心肌酶的影響還無相關報道。本文探討TMEM16A氯通道對心肌缺血再灌注后損傷大鼠乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的影響。

1 材料與方法

1.1動物與試劑 出生1～3 d的SD大鼠20只，由河北醫科大學第一醫院動物實驗中心提供。MEM培養基、胎牛血清、胰蛋白酶購自Gibco公司，辣根過氧化物酶山羊抗兔IgG購自華美生物工程有限公司，羊抗兔一抗〔蛋白激酶B(Akt)、β-actin等〕購自Cell Signaling公司，LDH和CK-MB檢測試劑盒購自Sigma公司。

1.2心肌細胞分離與培養 SD大鼠消毒，開胸取出心臟，放入預冷無菌的D-Hank液中，用無菌剪刀剪開心臟，采用D-Hank液沖洗血液。……