淺析面癱動物模型的制備與比較*

李小娟 趙中亭 曹朝霞 魏玉婷 嚴興科

(甘肅中醫藥大學， 蘭州 730000)

面癱是針灸臨床常見病和多發病，是針灸治療的優勢病種。面癱的誘發原因目前尚未確定，且存在各種假說[1-7]包括血管痙攣學說、病毒感染學說、免疫學說、神經源性學說、遺傳學說、妊娠學說等，但都缺乏高質量的證據支持，給臨床研究帶來了很大的困難，尤其是對動物實驗的機制探討出了難題。在動物模型的選擇上，如何選擇最真實模擬現實面癱發病情況的造模方法成為研究成敗的關鍵。目前面癱模型較多使用的動物有：大鼠、小鼠、日本大耳白兔等。造模方法[8-12]有面神經切斷、壓榨、牽拉、結扎、撞擊、爆破沖擊、激光照射、冷熱刺激、接種病毒等，這些造模方法各有特點。如何恰當地選擇不同類型面癱動物模型，對探討針灸治療不同類型面癱的作用機制尤為重要，本文對各種實驗動物及造模方法進行歸納總結，現綜述如下：

1 造模動物

在實驗中多選用嚙齒類動物為造模動物，其中大鼠、小鼠、兔在面癱研究中最常使用。

1.1 大鼠

大鼠來源十分廣泛，價格相對便宜，易于調教和捕捉，再生能力和抗感染能力都很強，其面神經主干較淺且粗大，與人類較為相似，故大鼠較多地用于神經損傷性面癱的造模。Jang 等[13]選取大鼠暴露左側面神經主干，用微血管鉗鉗夾一分鐘，最后建立左側面部面神經麻痹模型。虞彬艷等[14]用10%水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠后，參考王杰等[15]制備缺血性面癱大鼠模型的方法，于右頸側切口，暴露頸外動脈，結扎頸外動脈，以制備缺血性面癱大鼠模型。蘇莉莎等[16]用烏拉坦腹腔注射麻醉大鼠，暴露右側頸乳孔外的面神經主干，并將其于遠側神經干處切斷，切除5 mm防止其再生，止血、縫合傷口，術后可見術側觸須即刻失去拂動能力，并向尾側垂下，瞬目反射表現較遲鈍，閉眼幅度變弱甚至不能誘發，周圍性面癱模型復制成功。

1.2 小鼠

小鼠體型小，性情溫順，不主動咬人，易于飼養管理，較多地用于病毒性面癱造模。Hato等[17]在研究HSV-1感染導致貝爾麻痹發病機制實驗中，采用于小鼠耳后接種HSV-1病毒液建立貝爾氏麻痹模型。古林濤等[18]腹腔注射10%水合氯醛麻醉小鼠，搔刮小鼠左側近耳根部耳廓皮膚，取25 μL HSV-1病毒液接種于小鼠耳廓創面，接種病毒后第三天，通過觀察小鼠瞬目反射及胡須運動是否減弱、鼻尖是否偏向對側，以判斷面癱造模是否成功。

1.3 兔

實驗動物兔體形大，性情溫和，面神經粗大，面肌功能相對強大，便于觀察，且與人類解剖及生理接近，頭面部較大，易于取穴治療。衛彥和寇吉友[19]選用日本大耳白兔，3%戊巴比妥鈉靜脈麻醉,取耳屏前至下頜角下緣“S”形切口，鈍性剝離皮膚、皮下組織,在腮腺筋膜表面向前剝開皮瓣，用小號持針器鉗夾面神經，造模成功標準為兔的胡須由直立變為偏向后方，觸須運動消失，面運動神經傳導速度減慢。王宇娟等[20]選用新西蘭兔，用戊巴比妥鈉耳緣靜脈推注麻醉，暴露面神經顳外段，在進入頸乳孔前1 cm面神經總干處切斷神經，術后第七天肌電圖檢查發現，實驗兔患側肌出現失神經肌電圖表現，即單側周圍性面癱兔模型成功。

2 造模方法

在實驗中面癱造模多選用面神經切斷法、面神經壓榨法、面神經牽拉法、寒冷刺激法、阻斷血管法、接種病毒法，研究者根據面癱模型的適用范圍選用相應的面癱造模方法。

2.1 面神經切斷法

面神經切斷法即將暴露的實驗動物的神經上頰支切除其中的一段，任其回縮，造成神經缺損的動物模型造模法。面神經切斷法是直接切斷面神經來模擬面癱發生時面神經的癱瘓狀態。朱鴷[21]、孫健等[22]采用面神經切斷法，將面神經切斷，模型成功體現了面癱時神經功能缺損的特點，符合外傷造成面神經癱瘓的特點。

2.2 壓榨法

壓榨法即將麻醉后的動物解剖并暴露實驗側面神經出顱后的面神經總干，并用絲線在緊靠莖乳孔處緊密牢固地結扎面神經總干的面神經癱瘓的造模方法。目前在針刺治療面神經麻痹的實驗研究中最常用的動物模型是壓榨損傷性動物模型[23]。王愷等[24]用壓榨法進行造模，成功后觀察病理改變，電鏡下髓鞘形態、軸索形態出現病變，模型成功模擬了因各種原因造成的神經被壓迫導致的面癱，此模型重點側重面癱時神經本身的改變，符合血管痙攣導致的神經缺血的學說。

2.3 牽拉法

牽拉法即神經延長法，是外科領域如肢體牽引、下頜骨延長、組織擴張及創傷等所出現的一種現象，根據這種神經延長的現象發明的一種面癱模型的造模方法，具體方法是將延長器置于神經所在的平面上，通過旋轉螺帽使牽引輪與支撐輪處于同一高度，將已解剖游離的神經套入支撐輪及牽引輪的槽溝中，進行勻速牽拉，最終造成實驗動物面神經缺血的造模方法。牙祖蒙等[25]以弦式加載的方式對面神經進行延長，觀察延長前后面神經的病理形態學及電生理變化，此模型良好地體現了神經缺損后神經的損傷與修復，但應用范圍局限性較大。

2.4 寒冷刺激法

寒冷刺激法即通過冷空氣刺激的方式造成面癱模型的方法。Zealear等[26]通過冷空氣刺激動物鼓膜造成面癱的方法，觀察面神經的傳導，復合動作電位，神經內膜、軸索、髓鞘和軸索的改變研究面癱的機制。此模型良好地模擬了自然環境下面癱的誘發，符合血管痙攣說，但此模型造模成功率差，受個體健康因素影響嚴重，實際操作難度很大。

2.5 阻斷血管法

面神經血管痙攣、面神經缺血是面癱學說之一，因此選擇性切斷面神經供血，建立面神經麻痹的動物模型，此方法主要阻斷小腦前下動脈、耳后動脈的分支莖乳動脈、腦膜中動脈的巖淺支等面神經的血管，此方法主要用于面神經病因學的研究。Kumoi 等[27]通過栓塞貓的頜內動脈、耳后動脈和頜外動脈，實驗動物都出現面癱癥狀。王杰等[28]扎閉大鼠的面動脈、舌動脈、顳淺動脈和近端頸外動脈，并注入栓塞劑后，實驗動物立即出現同側面癱，此模型良好地模擬了神經缺血的情況，符合面癱的血管痙攣缺血學說。

2.6 接種病毒法

最近的研究顯示，單純皰疹病毒1型是貝爾氏麻痹的一個主要病因因素[29]。Jiang等[30]使用由26號針頭將雙邊耳廓表面劃傷并進行HSV-1滴度，結果面部神經麻痹的發病率為50%。Wang等[31]對 BALB/c小鼠四周進行雙邊耳廓表面劃傷并進行HSV-1滴度，結果接種小鼠之間出現不同程度的面癱。相關研究中發現物理及缺血模型與臨床上面神經麻痹的病理生理過程不盡相同，并不能完全反應機體的病理變化，采用病毒感染造模的研究能更貼近面神經麻痹發生的病理生理改變，使得實驗結果對臨床更具有現實指導意義。

3 討論與展望

綜上所述，面癱動物模型已經成為面癱研究中使用廣泛且重要的手段之一。面癱造模的動物種類繁多，造模方法各具特色，神經損傷性面癱模型最為常用，其應用范圍也最為廣泛，適用于研究面神經損傷后的恢復情況、病理生理變化、失神經支配后肌肉的運動、面神經核和神經元的結構、功能的變化以及面神經營養因子與神經損傷關系等。缺血性面癱模型適用于血管痙攣缺血所致的面神經麻痹的研究，該模型的建立主要用于面神經病因學的研究，為進一步研究面癱的病位提供了科學依據。病毒性面癱模型不僅說明了 HSV-1感染能夠導致面癱，也為進一步深入研究貝爾麻痹的發病機理和治療提供依據。然而目前仍有許多待解決的問題，動物模型的制備未能完全貼近人面癱的實際發病情況，其發病機制還未能完全闡釋清楚，動物模型只能間接反映人類疾病。造模時對動物年齡、面神經卡壓時間、神經切斷長度等缺乏統一的標準，不能較為精準地模擬動物面癱實際情況。中醫認為急性周圍性面癱有風、寒、熱、外傷等病因，病機方面多因脈絡空虛，風寒、風熱之邪乘虛侵襲面部筋絡導致氣血阻滯、經絡不通而發病，但目前未能緊扣中醫辨證辨病，未能客觀模擬中醫不同證型的面癱。在未來的研究中如何解決諸如此類的問題，有待于廣大臨床及科研工作者進一步廣泛深入地研究，在今后的研究中我們應重點將中醫理論與現代臨床研究相結合。