回神顆粒對中度創傷性腦損傷的機制以及臨床應用研究

楊金穎

天津市武清區中醫醫院制劑室 301700

創傷性腦損傷(Traumatic brain injury，TBI)是由各種原因創傷引起的腦組織損害，其發病率、病死率和致殘率均較高，是臨床常見疾病，其中中度TBI最為常見。回神顆粒是我院的院內制劑，由人參、石菖蒲、鹿角、丹參、五味子等多味中藥組成，主要功效為補益五臟、化淤祛痰、開竅通絡。回神顆粒對中度創傷性腦損傷有顯著的保護作用，它可以通過改善機體應激狀態、減輕微循環紊亂狀態、改善機體認知功能，能抑制ICAM-1的表達來減輕其炎性反應，還能通過遏制鈣超載、減輕NMDAR-1及AQP-4的過度表達來減輕其腦水腫情況。關于回神顆粒的研究較多，本文總結了回神顆粒對中度創傷性腦損傷的保護作用機制和近年來回神顆粒的臨床應用，為更好地科研探索提供參考。

1 回神顆粒對中度創傷性腦損傷的保護作用機制

1.1 通過益氣扶正、活血化淤、開竅醒神等作用治療TBI 崔俊波[1]將36例中度TBI患者隨機分為對照組18例(采用西醫基礎治療)和治療組18例(在西醫基礎治療加用回神顆粒)，結果治療組的總有效率為73.3%，對照組為40.0%，兩組無顯著性差異。但是，兩組同期比較的多個神經量表評分卻有顯著差異，其中治療組格拉斯哥昏迷評分(GCS)(3、7、15d)、簡化急性生理學評分(SAPS)(7、10、15d)、殘疾分級評分(DRS)(7、15d)、格拉斯哥預后評分(GOS)(7、10、15d)的改善均明顯優于對照組(P<0.05)。說明回神顆粒可以改善機體應激狀態、減輕微循環紊亂狀態，而且能改善機體認知功能。

1.2 通過抑制ICAM-1的表達，遏制鈣超載、減輕NMDAR-1及AQP-4的過度表達來治療TBI 腦內炎性反應參與腦創傷后繼發性腦損傷及損傷修復階段，黏附分子ICAM-1的水平影響顱腦損傷早期炎性反應損傷程度；創傷性腦水腫是TBI后最重要的繼發性病理生理反應，與腦水腫密切相關的是中樞神經系統興奮性氨基酸谷氨酸離子型受體-N-甲基-D-天門冬氨酸受體1(NMDAR-1)和一種水通道蛋白(AQP-4)。實驗結果說明[2-4]，在轉錄水平上，回神顆粒抑制ICAM-1的表達；在分子水平上，回神顆粒能夠遏制鈣超載，并減輕NMDAR-1及AQP-4的過度表達；在NSS評分上，回神顆粒能夠明顯改善TBI大鼠的NSS評分，并改善其神經功能和促進大鼠的生長發育。具體實驗結果[2-4]如下：崔俊波應用液壓性腦損傷裝置建立中度TBI模型，創傷壓力為(170±10)kPa，作用時間為(20±2)ms，他隨機將大鼠分為6組：正常組、假手術組、模型3d組、模型7d組、治療3d組、治療7d組。治療3d組和治療7d組大鼠在創傷后立即用2ml藥液(其中含回神顆粒0.27g)灌胃1次，之后兩組均每日早晚各灌胃1次，2ml/次藥液。他采用RT-PCR檢測6組動物損傷區腦組織內ICAM-1、腦組織內NMDAR-1和AQP-4的變化情況。結果發現，兩個模型組的ICAM-1表達、NMDAR-1及AQP-4的表達均較正常組顯著增加(P<0.01)，治療3d組的ICAM-1的表達較正常組顯著增加(P<0.01)，而治療7d組中ICAM-1表達的升高沒有統計學意義(P>0.05)；治療3d組與模型3d組比較，ICAM-1、NMDAR-1及AQP-4的表達均明顯降低，差異具有統計學意義(P<0.05)；治療7d組與模型7d組比較，只有ICAM-1的表達明顯降低，差異具有統計學意義(P<0.05)。他采用雙光束熒光分光光度計測定6組動物腦細胞內游離鈣濃度，結果發現，治療3d組較模型3d組明顯降低，差異具有統計學意義(P<0.01)，而模型3d組較正常組明顯升高(P<0.01)。他還采用光鏡和掃描電鏡觀察6組動物腦損傷區腦細胞的病理形態學改變，結果發現，兩個模型組和兩個治療組均可見到明顯改變，而且兩個治療組較兩個模型組均明顯減輕。對于神經損傷(NSS)評分，他分別于創傷后1d、3d、7d對正常組、假手術組、模型7d組和治療7d組進行評分，分別于創傷后1d、3d對模型3d組和治療3d組進行評分，結果發現，兩個模型組和兩個治療組的每個時間點NSS評分均明顯降低(P<0.01)，而且兩個治療組的NSS評分較兩個模型組明顯提高，差異具有統計學意義(P<0.01)。對于稱取每只動物的體重，他在造模前和取材前均分別稱重，結果模型組動物體重較正常組明顯下降(P<0.01)，治療組動物體重較正常組沒有明顯下降(P>0.05)，但比較每組動物造模前和取材前體重，發現模型組體重明顯下降(P<0.01)，治療組體重明顯有所增加(P<0.01)。

2 回神顆粒的臨床應用研究

2.1 對重型顱腦損傷腦保護作用 李傳勇等[5]對100例重型腦外傷患者隨機分成對照組40例(僅采用單純西醫治療)和研究組60例(在西醫治療基礎上使用回神顆粒治療)，兩組患者一般資料差異無顯著性。 結果研究組治療總有效率為93.3%，顱壓恢復情況及昏迷轉醒時間上均明顯優于對照組(總有效率為80.0%)，差異具有統計學意義(P<0.05)。說明回神顆粒能保護重型顱腦損傷所致的腦神經細胞破壞，可使患者血腫明顯吸收，并縮小水腫區及軟化灶，很大程度降低殘死率，提高生存質量。

2.2 治療周圍神經損傷 趙廷浩等[6]探討回神顆粒對周圍神經損傷的治療效果，他們對清潔級Wistar大鼠行左側坐骨神經鉗夾損傷，制成神經損傷模型，造模成功后使用回神顆粒治療。實驗結果表明回神顆粒能明顯促進坐骨神經損傷后神經組織形態，并促進失神經支配腓腸肌肌細胞的恢復，回神顆粒組與模型組比較，腓腸肌肌細胞截面積差異有統計學意義(P<0.05)。

2.3 對PC12細胞損傷的保護作用 回神顆粒含藥腦脊液能減輕Aβ25-35所致的PC12細胞損傷，具有細胞保護作用。劉江等[7]采用PC12細胞建立24h Aβ25-35所致損傷模型，將實驗分成正常組、模型組，回神顆粒含藥腦脊液高劑量組(20%)、中劑量組(15%)和低劑量組(5%)以及空白腦脊液組。他們在PC12細胞中同時加入各劑量回神顆粒含藥腦脊液和20μmol/L Aβ25-35，培養24h后，使用MTT法檢測細胞活力。結果發現回神顆粒含藥腦脊液各劑量組均比模型組能顯著提高Aβ25-35所致受損PC12細胞的生存率，且隨著濃度的增加，細胞存活率也逐漸提高，在20%濃度時達到最高。而且，回神顆粒含藥腦脊液可以在0～72h各時間點抑制神經細胞的凋亡，但時間越早，其細胞凋亡率越低。張玉嶺等[8]采用腦脊液藥理學和PC12細胞培養相結合的方法，用回神顆粒含藥腦脊液在體外培養缺血缺氧損傷的PC12細胞，在PC12細胞損傷后的6h、12h、24h、72h，用流式細胞儀檢測細胞凋亡率。結果發現損傷的PC12細胞模型在損傷6h已經開始凋亡，24h則達到凋亡高峰，48～72h也仍然維持較高的水平。

2.4 治療血管性癡呆(VD) VD是腦血管疾病發生后的一種嚴重影響患者恢復的疾病。回神顆粒可以改善腦組織的缺血缺氧狀態，并且恢復腦細胞的活力，治療效果可靠且持久。陳寶貴等[9]隨機將病例分為觀察組(118例，服用回神顆粒)，對照組(30例，服用西藥喜得鎮)，采用國際通用智力量表(MMSE)評分標準，觀察兩組患者在時間定向力、空間定向力、語言功能等方面的改善情況，結果觀察組總有效率為89.83%，對照組為60.00%，對兩組有效病例追蹤觀察6個月，好轉維持率觀察組為99.06%，對照組為83.33%，惡化率觀察組為0.94%，對照組為16.67%。此外，崔俊波等[10]觀察回神顆粒治療VD的臨床療效和MMSE積分改善情況，他們將患者隨機分為治療組(118例，應用回神顆粒)和對服組(62例，應用喜得鎮)，結果發現回神顆粒組對于輕度和中度VD療效明顯優于喜得鎮組，而對于重度VD則兩組無差異；對有效病例6個月隨訪表明回神顆粒組好轉維持率明顯優于喜得鎮組。

2.5 治療急性高血壓腦出血 高血壓腦出血是由顱內血腫及腦水腫所致的顱壓高及神經元損傷。陳慧媧等[11]研究回神顆粒對該病的療效，53例發病72h內的高血壓腦出血患者被隨機分為治療組31例(在對照組用藥的基礎上加服回神顆粒)和對照組22例(采用西醫基礎治療)，兩組患者一般資料、神經功能缺損及并發疾病比較差異無統計學意義。結果治療組有效率為90.3%，對照組為77.3%，差異有統計學意義(P<0.05)。關于血腫吸收情況，在出血量相近的基礎上，治療組吸收量和吸收率方面均明顯高于對照組(P<0.001)。

2.6 治療中風后運動性失語 運動性失語是腦卒中較為常見的并發癥，回神顆粒明顯改善言語表達的流利性、復述、命名、書寫等各種能力，為治療中風后運動性失語之良方。劉文通等[12]將79例中風后運動性失語患者隨機分為對照組(采用西醫基礎治療)及治療組(在對照組基礎上加服回神顆粒)，14d后治療組患者在言語表達的流利性、復述、命名、書寫等各方面的功能改善情況明顯優于對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)，而且連續6個月服用回神顆粒的臨床療效明顯優于對照組(P<0.05)。

3 結語與展望

崔俊波建立中度TBI模型采用液壓性腦損傷裝置，液壓損傷法是密閉顱腔內的壓力因為液壓裝置的驟然改變而間接造成的腦損傷。而是近十余年來應用最廣的顱腦創傷模型就是利用動物模型來模擬臨床腦損傷，其致傷機理類似于人類頭部撞擊后的腦變形。大鼠液壓沖擊腦損傷模型中動物容易獲得，致傷能量測定簡潔方便，具有較好的穩定性和可重復性，能夠較好的重現臨床閉合性腦損傷。

ICAM-1是一種單鏈跨膜糖蛋白，屬于黏附分子免疫球蛋白超家族，它是評價顱腦損傷早期炎性反應損傷程度的重要指標。在神經系統疾病中，在多種炎性反應遞質、細胞因子、缺血和缺氧再灌注或者應激反應等刺激下，ICAM-1表達也會明顯升高。NMDAR-1是中樞神經系統興奮性氨基酸谷氨酸離子型受體，它介導的神經元興奮毒性損傷與腦損傷的發生密切相關。水通道蛋白-4(AQP4)是一種膜通道蛋白家族成員，它在腦內廣泛分布，對水跨膜轉運有高度選擇性，在腦外傷、腦出血、腦炎、腦水腫的過程中起著十分重要的作用。AQP4是膠質細胞、腦腦脊液及血管間的水調節和轉運的重要物質，對維持大腦水平衡起著重要作用，很有可能參與和介導了各種腦水腫的形成。

回神顆粒中人參性甘，微苦，平，歸肺、脾、心經，能大補元氣，補脾益肺，安神益智，為君藥；石菖蒲辛苦燥溫通，芳香走竄，不但有開竅醒神之功，兼具化濕、豁痰，辟穢之效，鹿角味咸，性溫，歸肝、腎經，具補腎助陽，強筋健骨之功，二者共為臣藥；其他藥均為佐使藥。全藥合用共奏補益五臟，化瘀祛痰、開竅通絡之功。

通過分析已有的文獻，回神顆粒在治療中度創傷性腦損傷、腦缺血和腦梗死、防治阿爾茨海默病有顯著效果，其作用機制包括改善腦組織缺血缺氧、抑制細胞凋亡保護腦細胞、促進損傷神經修復、促進神經功能和學習記憶功能、基因調控及基因表達等，對臨床的指導意義重大。但是，回神顆粒的藥味眾多，作用機制較復雜，對于其作用機制的研究還不夠深入、不夠透徹，尤其對中度創傷性腦損傷的研究機制相對不足，而且對有些疾病的作用機制還是空白。回神顆粒的藥理研究多是針對顆粒而言，沒有確切到具體的有效成分。所以應進一步研究回神顆粒的作用機制和有效成分，開展更多的藥理實驗，在分子水平和基因水平更深入地研究回神顆粒的作用機制，還可以更多的開展臨床試驗來深入研究回神顆粒的臨床療效，使回神顆粒的臨床研究更加完善，為回神顆粒的安全性評價和臨床研究提供更多科學數據。