民族民間藥四數九里香研究進展

梁 威,凌 博,陳柏冰,趙秋華,張忠偉?

(1.右江民族醫學院,廣西 百色533000；2.廣西大學,廣西 南寧530004)

四數九里香Murraya tetrameraHuang為蕓香科九里香屬植物[1],全株有特殊芳香氣味,全年可采收葉或帶葉嫩枝入藥。歷版《中國藥典》均未收載四數九里香,但其在民族地區和民間被廣泛使用。據記載,其味辛微苦,性微溫,有祛風解表、行氣止痛、活血散瘀等功效,可用于治療感冒發熱、胃痛、風濕痹痛、跌打腫痛等癥[2-3]。四數九里香莖葉香氣濃郁,味辛辣清涼,用于泡茶可提神醒腦,而將其泡水洗澡有涼爽舒適之感。目前,研究者對四數九里香的化學成分、藥理作用、馴化栽培等方面進行了探討。為準確鑒別四數九里香的基源,有效研究開發其藥物資源,本文就其相關研究報道進行梳理分析。

1 基源特征

四數九里香為小喬木,當年生枝和新葉的葉軸及花梗被稀疏微柔毛,其后變無毛。小葉5～11片,狹長披針形,兩側稍不對稱或對稱,干后暗褐黑色,油點微凸。傘房狀聚傘花序,多花；萼片基部合生,4片；花瓣4片,白色有油點；雄蕊8枚；子房橢圓形。果圓球形,淡紅色,油點甚多,種子1～3粒。花期3－4月,果期7－8月。主產于廣西西部、云南東南部,常見生于光照充足的海拔400～700 m的石灰巖山地的山頂部,模式標本采自云南硯山[1]。

2 化學成分

目前,多采用硅膠柱層析、重結晶、TLC、HPLC、GCMS、MS和NMR等法研究四數九里香水提物、醇提物和揮發油的化學成分。

牙啟康等[4]研究了四數九里香的非揮發油成分,首次從該植物中分離鑒定出補骨脂素等5個化合物。張柯媛等[5]以補骨脂素為指標成分建立了定性定量分析方法,測得廣西德保、武鳴和河池產四數九里香的補骨脂素含量依次為0.23mg/g、0.21mg/g、0.20mg/g,為制定其藥材質量標準提供了數據參考。

周穎等[6]從四數九里香中分離鑒定出β-谷甾醇、間甲基苯甲醚等9個化合物,其中有4個為首次從九里香屬植物中分得,有8個為首次從該植物中分得。You等[7]從四數九里香中分離鑒定出8個化合物(2個倍半萜類和6個香豆素類),其中有1個新化合物。周永福等[8-9]前期從四數九里香葉的醇提物中分離鑒定出1-甲基-3-丙酰基咔唑、β-谷甾醇等8個化合物(7個咔唑類生物堿和1個甾體化合物)；后期又從中分離鑒定出紫蘇醛、7-羥基香豆素等14個化合物(6個黃酮類、5個香豆素類、2個甾體化合物、1個不飽和脂肪酸酯),有12個為首次從該植物中分得。

研究者從多產地的四數九里香揮發油中分離鑒定出多個成分,含量較高的主要為薄荷酮、異薄荷酮、薄荷醇、檸檬烯和胡椒酮等[10-12]。陳家源等[12]從廣西德保產四數九里香的揮發油中分離鑒定了37個化學成分,有15個為首次從該植物中分得。龔志強等[13]研究發現,3種提取方法所得揮發油均含薄荷酮、異薄荷酮、胡椒酮等主要成分。超臨界CO2流體萃取法可得38種成分,水蒸氣蒸餾法為33種,超聲提取法為12種,且均以薄荷酮的含量最高(分別為38.17%、20.51%、43.45%)。不同提取方法對四數九里香揮發油的提取效率不同。超臨界CO2流體萃取法得到揮發性成分最多,可能與其萃取溫度低、低沸點的易揮發性組分損失較少有關。

3 藥理活性作用

3.1 抗炎鎮痛作用

四數九里香的醇提物、水提物和揮發油對角叉菜膠致大鼠足趾腫脹法引起的急性炎癥、棉球致大鼠肉芽腫法引起的慢性炎癥,以及小鼠熱板法和小鼠醋酸扭體法引起的急性外周疼痛均有顯著的抑制作用。四數九里香不同提取物的不同劑量與其抗炎鎮痛作用密切相關。與空白對照組相比,揮發油0.4 g/kg、水提物40 g生藥/kg、醇提物40 g生藥/kg劑量組的效果最明顯,其余劑量組也有不同程度的抑制作用[14-16]。有研究者從電生理角度初步探討了四數九里香鎮痛作用的可能機制。相同的藥物作用時間內,離體蟾蜍坐骨神經動作電位振幅和動作電位傳導速度的變化值基本呈同步狀態,均隨其水提液藥物濃度的增加而增大。隨藥物作用時間的延長,其水提液和揮發油均導致神經復合動作電位的振幅變小、傳導速度變慢,最后使神經動作電位消失。該研究結果提示了阻滯神經動作電位的傳導可能是四數九里香鎮痛作用的機制之一[17-18]。

3.2 急性毒性作用

黃小秋等[19]研究發現,四數九里香水提液和75%醇提液的LD50值分別為69.18g/kg、183.44g/kg,說明水提液對小鼠的急性毒性相對更大。將兩種提取液經口灌胃小鼠后,顯示小鼠死亡率均隨給藥劑量增加而升高,即兩者存在正比關系。水提液和75%乙醇提液的給藥劑量分別為49.70g/(kg·h)、132.07 g/(kg·h),小鼠死亡率最低。作者認為四數九里香雖為民間常用藥,但應合理使用劑量,避免發生毒性反應,而不同提取液的毒性作用部位和作用機制尚需深入研究。因2種提取方法的原理不同,則四數九里香提取液中非揮發性與揮發性成分的含量存在差異,可推測其提取液的組成成分與藥理毒性必然有一定的量效關系。

3.3 細胞毒活性作用

有學者以腫瘤細胞為研究模型研究了四數九里香多種化學成分對腫瘤細胞的體外生長抑制作用。You等[7]將四數九里香的2個倍半萜類和6個香豆素類對肺腺癌A549、宮頸癌HeLa、肝細胞癌SMMC-7721、膀胱腫瘤EJ、急性淋巴細胞白血病BALL-1細胞進行了細胞毒活性評價,發現不同化合物有不同的細胞毒活性。2個倍半萜類化合物對5種細胞均有明顯的細胞毒活性。對于香豆素類化合物,有3個未檢測到任何細胞毒活性,而其余3個均有不同的細胞毒活性。作者認為,結構相似的化合物有不同程度的細胞毒活性,可能與化學物結構中不同的取代模式有關：有長烷基取代基的化合物對腫瘤細胞有明顯的細胞毒活性,而在烷基取代基上有羰基的化合物顯示弱細胞毒活性。四數九里香的活性化合物可能是治療癌癥的潛在先導化合物。

周永福等[8]發現用于實驗的四數九里香8個化合物中,有5個對肝癌SMMC7721表現顯著的細胞毒活性；其后期又研究了四數九里香的14個化合物對結腸癌SW480、白血病HL60、肺腺癌A549、肝癌SMMC7721、乳腺癌 MCF7細胞的體外生長抑制作用[9],結果顯示,14個化合物對結腸癌SW480的細胞毒活性均低于陽性對照組,而對于其余4種腫瘤細胞,多個化合物均表現出不同程度的細胞毒活性。因此,2項研究結果為四數九里香抗腫瘤細胞活性提供了實驗數據,有利于進一步研究開發四數九里香和相關的抗腫瘤新藥。

3.4 對血脂水平和血液流變學的影響

九里香屬植物中的九里香葉總黃酮對糖尿病大鼠的血脂水平有調節作用,而其影響高脂血癥的相關研究較少。楊其波等[20]探討了四數九里香對高脂血癥小鼠血脂調節作用及血液流變學的影響。與模型對照組相比,其水提物和醇提物均可不同程度抑制高脂血癥小鼠的體重增加量,且以醇提物的作用更強。血脂水平測定結果顯示,其水提物和醇提物均能明顯降低小鼠的血清總膽固醇、甘油三酯和血清低密度脂蛋白水平,提高血清高密度脂蛋白水平。血液流變學測定結果表明,其水提物和醇提物均可有效降低小鼠高切全血黏度、中切全血黏度、低切全血黏度、血漿黏度、紅細胞壓積和紅細胞聚集指數水平。這說明適當劑量的四數九里香提取物在一定程度上可調節血脂、有效降低血液黏度、防止紅細胞聚集形成血栓。

4 四數九里香的馴化栽培研究

四數九里香野生資源有限,多生于石灰巖山地,生長較緩慢,故對其進行栽培育種研究尤為必要。閉志強等[21]對原產于廣西西南石山區的野生山茶鑒定為四數九里香,并進行馴化栽培研究。四數九里香莖段經不同類型和濃度的生根劑處理后,僅GGR組有極少莖段長出新芽,但后期全部停止生長并枯蔫,發現其未長出新根。四數九里香的扦插成活率極低,可能與其生長緩慢、韌皮部薄而難誘導出根的特性有關。移栽實驗表明,用50ppm的GGR對帶根植株進行拌泥漿根有助于誘發新根和長出新芽,提高植株成活率。與偏酸性的紅壤相比,以pH中性或略偏堿性的黑色石灰土作為栽培基質或基肥,成活率高達78.3%,更有利于四數九里香生長。

5 結語

民族民間藥物療效顯著,具有悠久的應用歷史,是一座醫藥寶庫,還有賴于研究者進行發掘和研究。作為一種民族民間草藥,四數九里香的使用地區具有典型的地域性。廣西龍州用其作為治風濕病的主藥,廣西德保用其葉作冬季飲用茶葉以防寒,說明四數九里香還可用于保健茶飲。目前,對四數九里香的研究尚處于基礎階段,僅在化學成分、藥理作用、馴化栽培等方面有較少報道,因此,建議進一步加強對四數九里香的人工栽培高產技術、藥材采收加工、藥材質量標準、新藥制劑開發、藥理作用的物質基礎及作用的分子機制等方面的深層次研究。