2011～2015年四川省實驗動物質量抽檢結果分析

劉麗達，劉科亮，何其勵，王 睿

(四川省疾病預防控制中心， 成都 610041)

實驗動物科學作為一門綜合性的獨立的新興學科，是發展生命科學的重要的支撐條件，已經成為現代生命科學研究的奠基學科。實驗動物被廣泛地應用于醫學、藥學、生物制品、農藥、食品、添加劑、化工產品、化妝品等方面；在人類的健康和福利研究中，實驗動物總是起著人類替身的作用，實驗最終結果要類推到人類，因此實驗動物起著“活的天秤”和“活的化學試劑”的作用。隨著生命科學的發展，實驗動物已成為其研究的支撐條件之一。據統計，在生命科學領域里，動物實驗的課題占60%，包括傳染病、藥效、營養等研究都需要實驗動物作為模型，因此實驗動物的質量影響著整個實驗的質量和水平，已成為制約性要素。

四川省有較多的高校、研究所及醫藥公司均開展了實驗動物相關的研究，根據統計，四川省已成為實驗動物用量大省，省內實驗動物的產量、品種、質量還不能完全滿足省內需求，仍需從外省購買大量實驗動物。為了提高本省實驗動物生產的質量，根據《中華人民共和國動物防疫法》、《實驗動物質量管理辦法》、《實驗動物許可證管理辦法》等相關法律法規，對四川省具有實驗動物生產許可證的企業單位進行一年一次的抽樣檢測并出具報告，及時發布質量抽檢信息，對不合格的動物及時進行處理。本文對2011年至2015年四川省實驗動物質量抽檢結果進行分析，探討影響動物質量的因素，為生產單位進行質量管理提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

被檢實驗動物均來自四川省具有實驗動物生產許可證的生產單位，各年度抽檢單位數量、動物品種、等級及數量見表1。

1.2 主要試劑與儀器

Anthos2010酶標儀、生物顯微鏡(奧林巴斯)、VITEK2COMPACT全自動微生物分析系統；試劑盒由蘇州西山生物術有限公司代銷的美國Expression品牌；平板培養基由法國科馬嘉提供。

1.3 抽樣與檢測

由具備實驗動物質量檢測資質的檢測機構-四川省疾病預防控制中心，依據國家標準進行抽樣檢測[1-3]。

表1 2011～2015年四川地區實驗動物質量抽檢數目Table 1 Number of laboratory animals subjected to random testing in Sichuan from 2011 to 2015

1.4 結果判定

按照相應國家標準對檢測結果進行綜合判定，并出具報告。本文根據這幾年的檢驗報告對不同級別，不同種類的動物感染情況進行分類統計。

2 結果

從表2可見SPF級大鼠檢出了蠕蟲、金黃色葡萄球菌、大鼠細小病毒RV株、H-1株病毒抗體。其中金黃色葡萄球菌這4年都有檢出，2011、2012年分別有一家單位檢出，2013年有3家單位，2015年有2家單位檢出。蠕蟲2012年有2家單位檢出，大鼠細小病毒RV株和H-1株在2015年3家單位同時檢出；表3 可見SPF級小鼠檢出了體外寄生蟲、蠕蟲和肺炎克雷伯桿菌。其中肺炎克雷伯桿菌只在2011年一家單位小鼠中檢出，體外寄生蟲2012、2013年分別在不同單位檢出；蠕蟲在2012～2015年都有檢出，12年有3家單位檢出陽性，其中一家單位在2013年仍有陽性檢出，15年有2家新單位檢出蠕蟲。

表2 2011～2015年SPF級大鼠檢出陽性比例(%)Table 2 Positive rates of SPF rats from 2011 to 2015

注：此表格括號內字母代表實驗動物生產單位編號。下表同。

Note: The letters in brackets in this form represent the laboratory animal production units number. The same in the flowing tables.

表3 2011～2015年SPF級小鼠檢出陽性比例(%)Table 3 Positive rates of SPF mice from 2011 to 2015

表4 2011～2015年普通級動物檢出陽性比例(%)Table 4 Positive rates of conventional animals from 2011 to 2015

表5 2011～2015年抽檢動物合格率Table 5 Qualified rates of laboratory animals samples in Sichuan (2011-2015)

普通級動物包括兔、犬、豚鼠和猴，豚鼠(包括清潔級)在2011～2015年抽檢中未檢出陽性。兔在2013年一家單位檢出弓形蟲，檢出陽性動物數占抽檢動物總數10%；犬在2012年分別從兩家單位檢出皮膚真原菌和弓形蟲，陽性率為5.0%和2.5%；猴2011年有兩家單位檢出皮膚真原菌，陽性率為9.5%，2011、2012年同一家單位連續兩年志賀菌陽性，陽性率為2.4%，2.5%，獼猴皰疹病毒I型在2012年一家單位檢出陽性，陽性率為2.5%(見表4)。另，2015年第一次檢測實驗用小型豬，省內只有兩家生產企業，分別抽檢了10只，只做了布氏桿菌和弓形蟲，結果均為陰性。

2011年至2015年抽檢的四年中，大鼠合格率在2011年最高，達到95%，以后有下降趨勢，13、15年合格率只有60%；小鼠合格率除13年87.1%，其余3年都保持在90%以上。兔2013年合格率為90%，猴2011年合格率為88.1%，2012年為95.0%，其余都為100%合格。

3 討論

實驗動物質量監測是實驗動物科學的重要內容，做好監測是確保實驗動物質量的必要手段，實驗動物質量是保證整個實驗結果準確性、規律性和重復性的基礎條件，同時也是實驗工作人員健康和生命的保證。通過合理的質量檢測，能及時發現實驗動物中存在問題，排除人畜共患病原體攜帶，以減少實驗動物在飼養使用過程中對人群的感染。對于生產單位，實驗動物檢測能促進其對質量的重視與控制，使企業良性發展。

回顧2011～2015年四川省實驗動物質量抽檢結果，發現四川這4年實驗動物質量存在著一定的問題。大小鼠的質量存在波動的情況，其中金葡的感染率較高，由于金葡菌廣泛存在于自然界，在人群中的帶菌率也較高[4-5]，導致要完全隔離金葡對大鼠的感染比較困難，而且少量帶菌是否影響實驗動物的使用還需要進一步研究。抽檢動物中，大鼠存在問題比較突出，尤其在2013和2015年合格率僅60%，這可能跟引種時間長，動物質量下降有關。從結果發現問題動物主要集中在其中幾個生產單位，并且同時存在多種問題，應重點監督。其中有兩個單位問題幾乎一致，可能單位間生產動物有交叉感染的現象，提醒生產單位對引種和外來動物必須嚴格隔離觀察。小鼠合格率除2013年外，都保持在90%以上，主要問題是體外寄生蟲和蠕蟲，其中2012年發現蠕蟲的單位除了一家在2013年有檢出外，都已合格，說明通過抽檢可幫助生產單位發現問題并改進。普通級動物兔、豚鼠合格率比較穩定，猴的合格率在2013和2015年也達到了100%，為四川獼猴的出口奠定了質量基礎。由于實驗動物的生產和質量監控在四川起步較晚，抽檢中還存在著一些疏漏，從2015開始對犬抗體水平進行了檢測，因此本文沒有對犬的合格率做統計，將在以后的工作中更加重視，彌補這一缺失。相對實驗動物發達地區四川實驗動物品種的發展也較慢，四年中只增加了小型豬，未能充分發揮四川物種多樣性的優勢。

實驗動物的質量容易受到環境設施、飼養方式、理化因素、繁育運輸等多種因素的影響，要提高實驗動物的質量，需要多方面共同努力[6-7]。首先生產單位應有足夠的重視，對有質量問題的動物做出相應的處理，找到管理中的漏洞進行改進。個別單位由于使用人員復雜性，整改確實有難度，需要監管部門幫助協調進行整改。其次，監管部門和檢測單位也要不斷提高自身管理與檢測能力。2015年四川省有新增品種小型豬，但沒有相應的國標對其檢測項目做出明確規定，在檢測中相關人員只參照其他省市地標進行檢測，說明監管也存在滯后性，目前四川省小型豬的地標也在加緊制定當中。在檢測方面四川省一直比較重視對微生物和寄生蟲等級的監測，且相比發達地區的檢測頻次相對較少，也缺乏靈活性[8-9]，可以根據本地的感染譜、病原特性和檢測方法的敏感性，調整監測計劃，有目的地增加檢測頻率，既保證動物質量，又可節省經費，使檢測工作在確保實驗動物質量方面起到應有的作用[10]。目前，四川省在遺傳的監測上幾乎沒有涉及，雖然暫時并沒有近交系實驗動物的生產，但是具備遺傳質量評價的能力對于檢測機構是必要的[11]。實驗動物的遺傳背景決定了其反應特性，只有做好遺傳質量檢測，才能充分保障種群的特異性，所以也要增強生產單位對遺傳質量控制意識，共同保障實驗動物的質量[12]。