不同制作工藝益母草中成藥紅外光譜無損鑒別研究

胡瀟，張秋蓮

(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)計(jì)算機(jī)與信息工程學(xué)院，江西 南昌 330045；2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)附屬醫(yī)院，江西 南昌 330045)

益母草為唇形科植物，是常用中藥之一。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，益母草具有抗凝、抑制血小板聚集、降低紅細(xì)胞聚集、改善微循環(huán)等藥理作用，臨床上常用于產(chǎn)后瘀血、月經(jīng)不調(diào)、血液病、心血管疾病等[1-3]。目前，常用益母草中藥制劑有顆粒、膠囊和膏狀3種，不同制劑中的益母草成分含量不同，其藥效差異較大。如何直接快速鑒別益母草中成藥質(zhì)量，確保其藥用效果，對(duì)于提高中藥市場的監(jiān)管力度、改善市場狀況具有重要意義。

紅外光譜能直觀表達(dá)出物質(zhì)所含成分的結(jié)構(gòu)信息，具有宏觀的“指紋”特性[4-7]。紅外光譜技術(shù)具有樣品量小、整體特征性強(qiáng)、快速無損等特點(diǎn)，在中藥的質(zhì)量鑒別中越來越受到關(guān)注[8-12]。孫素琴等采用傅立葉紅外光譜技術(shù)對(duì)中藥的真?zhèn)舞b別、不同配伍方法的質(zhì)量控制、中藥產(chǎn)地鑒別等進(jìn)行了系統(tǒng)研究[9，13-15]。王鵬等[16]、黃冬蘭等[17]對(duì)中藥的提取物、溪黃草基源植物進(jìn)行了研究。目前還未見利用紅外光譜技術(shù)對(duì)益母草中成藥質(zhì)量進(jìn)行快速無損鑒別的報(bào)道。本文利用紅外光譜技術(shù)對(duì)不同制劑的益母草中成藥進(jìn)行快速無損檢測，找出不同制劑益母草中成藥的特征譜峰，為市售中成藥質(zhì)量的快速無損鑒別提供新方法。

1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

1.1 樣品來源

各試驗(yàn)樣品為市售益母草顆粒(批號(hào)為Z44022528，簡稱顆粒)；八珍益母膠囊(批號(hào)為Z19980009，簡稱膠囊)；益母草膏(批號(hào)為Z45020938)；益母草堿對(duì)照品(安徽新星藥物開發(fā)有限責(zé)任公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

WQF-520A紅外光譜儀(北京北分瑞利分析儀器有限公司)，配帶有水平ATR附件，DLATGS檢測器，光譜分辨率4 cm-1，光譜波數(shù)范圍7 800 cm-1～350 cm-1，每個(gè)樣本掃描16次求平均。掃描實(shí)時(shí)扣除CO2干擾。

1.3 樣品制備及光譜采集

益母草藥材樣品制備及光譜采集：將益母草藥材干燥后，切斷、粉碎，過200目篩。取3 g藥材粉末樣品和200 g KBr放于研缽中，放于275 W浴霸燈泡下混合研磨均勻，壓片測定其紅外光譜。

益母草顆粒和益母草膠囊的樣品制備及光譜采集：取3 g樣品和200 g KBr放于研缽中，放于275 W浴霸燈泡下干躁5 min，將兩者混合研磨均勻，壓片測定其紅外光譜。

益母草膏的紅外光譜采集：用移液管取1 mL益母草膏滴在水平ATR附件的石英片上，直接測量其紅外光譜。

2 結(jié)果與分析

益母草主要成分為生物堿、黃酮類、有機(jī)酸和脂肪酸等，而這些成分中主要起藥理作用的是益母草堿，通常以總生物堿為指標(biāo)來控制益母草藥材及其制劑的質(zhì)量。故在實(shí)驗(yàn)過程中，以生物堿為標(biāo)準(zhǔn)品，參照生物堿標(biāo)準(zhǔn)品紅外譜圖，對(duì)不同制作工藝益母草中成藥的質(zhì)量進(jìn)行鑒定。

2.1 不同制作工藝益母草中成藥的紅外光譜分析

圖1為益母草藥材、不同制作工藝益母草中成藥及生物堿標(biāo)準(zhǔn)品的紅外光譜。由圖可看出，不同制作工藝的益母草中成藥和益母草藥材具有一些共同特征峰。在3 550 cm-1附近為O-H的伸縮振動(dòng)峰；3 020、3 001 cm-1處為芳環(huán)上C-H的伸縮振動(dòng)峰；2 982～2 850 cm-1為烷烴的C-H伸縮振動(dòng)峰；1707 cm-1為C=O的伸縮振動(dòng)峰；1 569～1 592 cm-1處為脂肪仲胺的面內(nèi)振動(dòng)峰；1 644 cm-1為C=C伸縮振動(dòng)峰；1 450～1 340 cm-1含有多種成分，如C-H的彎曲振動(dòng)峰；在1 300 cm-1以下，1 262、1 145、1 014 cm-1等是C-O伸縮振動(dòng)峰，這些峰為多糖類吸收峰。其中1 570、1 412、1 262 cm-1附近為益母草堿的特征吸收峰，四種樣品均含有這些特征峰。

注：a.藥材；b.膠囊；c.顆粒；d.益母草膏；e.益母草堿標(biāo)準(zhǔn)品圖1 不同制劑的益母草中成藥、益母草中藥、益母草堿標(biāo)準(zhǔn)品的紅外譜圖

在1 800～900 cm-1波數(shù)范圍內(nèi)的益母草藥材、不同制作工藝益母草中成藥及生物堿標(biāo)準(zhǔn)品的紅外光譜圖中，顆粒樣品的益母草堿特征峰明顯，說明顆粒制劑中益母草堿含量較高，而膠囊中益母草堿特征峰并不明顯，說明益母草堿含量較低。此外藥材的峰形與膠囊的相似，不同的是藥材在1 286、1 198 cm-1處的峰形明顯強(qiáng)于膠囊，而益母草膏在1 636、1 108、1 064、989、923 cm-1的峰形較強(qiáng)。據(jù)此可明確區(qū)分藥材、膠囊、顆粒、益母草膏的質(zhì)量。

2.2 不同制作工藝益母草中成藥的二階導(dǎo)數(shù)紅外光譜分析

不同制劑的益母草中成藥含有多種成分，其紅外光譜的吸收峰重疊嚴(yán)重，對(duì)原始光譜求二階導(dǎo)數(shù)后，能將相互重疊的峰凸顯出來，增強(qiáng)其分辨率，使一些特征峰的差異更加明顯，從而可進(jìn)一步找出特定化合物的特征峰，提高紅外圖譜的指紋特性。

圖2是二階導(dǎo)數(shù)譜圖。可看出草藥、膠囊、顆粒和益母草膏的峰形明顯不一致，但均含有益母草堿的特征吸收峰。從圖2可看出，草藥、膠囊、顆粒、益母草膏在1 700、1 670、1 653、1 489、1 054 cm-1附近的益母草堿特征吸收峰十分明顯，由此可確認(rèn)4種不同制劑的益母草堿含量都較高。在1 800～1 400 cm-1波數(shù)范圍內(nèi)，益母草膏在1 575、1 538 cm-1有最強(qiáng)吸收峰，明顯區(qū)別于其他制劑。雖然顆粒整體峰形較為平坦，但在1 480、1 460 cm-1的峰形高而尖。藥材與膠囊的峰形相似度較高，在1 700、1 668、1 652、1 560、1 541、1 491 cm-1的吸收峰均很尖銳，但藥材在1 491、1 472 cm-1比膠囊的強(qiáng)，也可區(qū)分。

在1 350～600 cm-1范圍內(nèi)，顆粒與益母草堿標(biāo)準(zhǔn)品的峰形相似度最高，且峰形尖而高，可進(jìn)一步確認(rèn)顆粒的益母草堿含量最高。益母草膏只有1 090、1 047、881 cm-1處的吸收峰明顯，其他吸收峰則不強(qiáng)，說明益母草膏所含藥效成分較低。相比較之下，藥材在1 047、1 017 cm-1處的益母草堿特征峰不是很明顯，沒有其他制劑的峰形尖而高，而在700 cm-1處的吸收峰最強(qiáng)，并且是四種制劑中峰形最弱的。膠囊與藥材相似，但卻多了1 255、1 165、1 126、900、718 cm-1處的吸收峰。從整體看，顆粒在1 238、1 070、1 010、941、897、847 cm-1處吸收峰明顯強(qiáng)于1 700、1 668、1 652、1 560、1 540 cm-1附近的特征峰，而藥材的恰好相反，在1 700、1 668、1 652、1 560、1 540 cm-1的吸收峰最強(qiáng)。由此可見，通過二階導(dǎo)數(shù)譜圖，將藥材、膠囊、顆粒及益母草膏的差別放大后，能更容易地區(qū)分不同制劑的益母草中成藥。

注：a.藥材；b.膠囊；c.顆粒；d.益母草膏；e.益母草堿標(biāo)準(zhǔn)品圖2 不同制劑的益母草中成藥、益母草中藥、益母草堿標(biāo)準(zhǔn)品的二階導(dǎo)數(shù)譜圖

3 結(jié)論

本文對(duì)益母草藥材、益母草膠囊、益母草顆粒、益母草膏不同制劑中成藥的一維紅外光譜、二階導(dǎo)數(shù)譜進(jìn)行鑒別分析，研究了不同制劑中成藥之間的譜圖差異。結(jié)果表明，在紅外指紋圖譜上，益母草顆粒的吸收峰與益母草堿的吸收峰最為接近，所含益母草堿含量最高。在二階導(dǎo)數(shù)圖譜中，各種制劑中成藥的紅外譜圖在峰的數(shù)目、位置和強(qiáng)度都有明顯差異。可見通過FTIR可快速無損鑒別不同制劑的益母草中成藥質(zhì)量，此方法簡便、快速、準(zhǔn)確，能為益母草中成藥質(zhì)量的實(shí)時(shí)快速無損控制裝置的研究開發(fā)提供基礎(chǔ)。