中藥白薇化學成分研究

孫 瑜，田樹成，劉德軍，王學妍

（遼寧中醫(yī)藥大學附屬第三醫(yī)院，遼寧 沈陽 110003）

白薇為蘿 科鵝絨藤屬植物白薇 Cynanchum atratum Bunge的干燥根莖，廣泛分布于亞洲，尤其是東亞地區(qū)，我國大部分地區(qū)均有分布[1]。白薇性苦、咸，具有清熱涼血、利尿通淋、解毒療瘡等功效，常用于治療風濕性關節(jié)炎、胃腸炎、腹痛等疾病[2]。該屬植物生物堿及甾體皂苷類成分是其主要活性成分[3－6]，均有明確的抗腫瘤、抗炎及鎮(zhèn)痛作用[7－10]。本研究中對白薇飲片95%乙醇提取物進行了研究，共分離得到8個單體成分，經過理化性質及核磁鑒定為 Glaucoside A(1)，Glaucoside H(2)，Cynatratoside A(3)，Cynatratoside C(4)，Cynatratoside E(5)，Mooreanosid H(6)， Sublanceoside L2(7)， Sublanceoside H2(8)，這些化合物均為首次分離得到。現(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Bruker AV－400 FT型核磁共振波譜儀(TMS內標，Bruker Co.，Ltd.)；Shimadazu LC － 6AD 型高效液相色譜儀(HITACHI，SPD －6A UV 檢測器，Shimadazu Corporation)；柱層析硅膠（100～200目，200～300目）和薄層色譜硅膠H均購于青島海洋化工廠；Sephadex LH－20凝膠填料（北京綠百草科技發(fā)展有限公司），ODS柱色譜填料（月旭科技＜上海＞有限公司）。

1.2 試藥

中藥白薇購于沈陽遼河藥房，經遼寧中醫(yī)藥大學附屬第三醫(yī)院田樹成主任中藥師鑒定為蘿 科植物Cynanchum atratum Bunge的干燥根莖；所有有機試劑均購于天津科密歐化學試劑有限公司。

2 方法

2.1 提取與分離

白薇藥材飲片10 kg，粉碎，加10倍量95%乙醇－水回流提取3次，每次2 h。合并提取液，減壓濃縮后得到浸膏約1.2 kg，加適量水溶解，分別依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進行萃取，合并不同極性萃取液，并進行減壓干燥，得浸膏。乙酸乙酯層浸膏采用正相硅膠柱色譜分離，以不同比例二氯甲烷 －甲醇 (CH2Cl2∶MeOH，100∶1～1∶1)進行梯度洗脫，共得到 12個流分（Fr.1 ～ Fr.12），其中 Fr.3 ～Fr.5 部分依次采用 Sephadex LH－20柱色譜及ODS柱色譜并結合制備液相分離純化得到化合物1(8 mg)、化合物2(12 mg)、化合物3(12 mg)、化合物 4(11 mg)、化合物 5(13 mg)、化合物 6(21 mg)、化合物7(16 mg)、化合物8(15 mg)。

2.2 結構鑒定

共分離得8個化合物，通過核磁共振光譜數(shù)據(jù)與文獻[11 － 16]對比，確定為 Glaucoside A(1)，Glaucoside H(2)，Cynatratoside A(3)，Cynatratoside C(4)，Cynatratoside E(5)， Mooreanosid H(6)， Sublanceoside L2(7)，Sublanceoside H2(8)。

Glaucoside A(1)：無 定 形 粉 末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.86(3H，s，H － 19)，1.51(3H，s，H －21)，5.42(1H，m，H －6)，6.46(1H，s，H －18)，1.25(3H，d，J＝6.2 Hz，H －6′)，1.34(3H，d，J＝6.2 Hz，H － 6″)，1.40(3H，d， J ＝ 6.2 Hz，H － 6蓯 )，3.35(3H，s，C － 3′－ OCH3)，3.57(3H，s，C － 3蓯 － OCH3)，5.16(1H，d， J ＝ 9.6，1.8 Hz，H －1′)，5.21(1H，d， J ＝9.6，1.8 Hz，H － 1″)，5.05(1H，d，J ＝ 4.0，2.0 Hz，H － 1蓯 )。

Glaucoside H(2)：無 定 形 粉 末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.85(3H，s，H － 19)，1.50(3H，s，H －21)，5.41(1H，m，H －6)，6.45(1H，s，H －18)，1.24(3H，d， J＝6.2 Hz，H －6′)，1.30(3H，d， J＝6.2 Hz，H － 6″)，1.40(3H，d， J ＝ 6.2 Hz，H － 6蓯 )，3.40(3H，s，C －3′－ OCH3)，3.58(3H，s，C －3蓯 －OCH3)，5.35(1H，m，J＝8.0 Hz，H － 1′)，5.18(1H，dd，J ＝9.4，2.0 Hz，H － 1″)，5.16(1H，d， J ＝ 8.0 Hz，H － 1″″′)，4.95(1H，d，J＝ 7.6 Hz，H － 1″″)，4.92(1H，d，J ＝ 3.6 Hz，H － 1蓯)。

Cynatratoside A(3)：無定形粉末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.80(3H，s，H － 19)，1.51(3H，s，H －21)，5.35(1H，m，H －6)，6.42(1H，s，H －18)，1.58(3H，d， J ＝ 6.0 Hz，H － 6′)，3.42(3H，s，C －3′－OCH3)，4.82(1H，dd，J ＝ 9.6，1.6 Hz，H － 1′)。

Cynatratoside C(4)：無定形粉末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.80(3H，s，H － 19)，1.52(3H，s，H －21)，5.35(1H，m，H －6)，6.42(1H，s，H －18)，1.50(3H，d，J ＝6.2 Hz，H －6′)，1.42(3H，d， J ＝6.0 Hz，H － 6″)，1.42(3H，d， J ＝ 6.0 Hz，H － 6蓯 )，3.28(3H，s，C －3′－OCH3)， 3.53 (3H， s， C － 3蓯 －OCH3)， 5.04(1H，dd， J＝9.2，1.6 Hz，H －1′)，5.50(1H，dd， J＝9.2，1.6 Hz，H － 1″)，5.21(1H，d， J ＝ 3.5 Hz，H － 1蓯 )。

Cynatratoside E(5)：無定形粉末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.80(3H，s，H － 19)，1.51(3H，s，H －21)，5.41(1H，m，H － 6)，6.43(1H，s，H －18)，1.60(3H，d，J ＝4.7 Hz，H －6′)，1.43(3H，d， J ＝4.7 Hz，H － 6″)，1.42(3H，d， J ＝ 5.2 Hz，H － 6蓯 )，3.53(3H，s，C － 3′－ OCH3)，3.46(3H，s，C － 3蓯 － OCH3)，4.80(1H，dd， J ＝ 9.2，1.6 Hz，H － 1′)，4.70(1H，dd， J ＝ 9.2，1.6 Hz，H － 1″)，4.51(1H，dd， J ＝ 11.2，2.4 Hz，H －1蓯 )，5.07(1H，br.d，J ＝ 7.8 Hz，H － 1″″)。

Mooreanosid H(6)：無定形粉末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.87(3H，s，H － 19)，1.52(3H，s，H －21)，5.41(1H，m，H －6)，6.45(1H，s，H －18)，1.32(3H，d， J＝ 3.2 Hz，H － 6′)，1.33(3H，d， J＝3.2 Hz，H － 6″)，1.68(3H，d， J ＝ 6.5 Hz，H － 6蓯 )，3.49(3H，s，C －3′－OCH3)，3.49(3H，s，C －3″－OCH3)，3.59(3H，s，C －3蓯 －OCH3)，4.76(1H，dd， J＝9.2，1.6 Hz，H － 1′)，5.20(2H，m， J ＝ 9.6，1.2 Hz，H － 1″)，5.00(2H，m，J＝8.0 Hz，H － 1蓯 )。

Sublanceoside L2(7)：無定形粉末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.85(3H，s，H － 19)，1.51(3H，s，H －21)，5.41(1H，m，H －6)，6.45(1H，s，H －18)，1.24(3H，d， J＝ 6.0 Hz，H － 6′)，1.36(3H，d， J＝6.0 Hz，H －6″)，1.51(3H，d， J＝6.0 Hz，H －6蓯 )，3.30(3H，s，C － 3′－ OCH3)，3.59(3H，s，C －3″－ OCH3)，5.34(1H，d， J ＝9.3 Hz，H －1′)，5.21(1H，d， J＝8.0 Hz，H － 1蓯)，5.15(1H，d，J ＝ 9.2 Hz，H － 1″″)，5.13(1H，d， J ＝ 2.2 Hz，H － 1″)。

Sublanceoside H2(8)：無定形粉末 (MeOH)，Liebermann－Burchard(＋)，Keller－Kiliani(＋)。1H－NMR(C5D5N，400 MHz)δ：0.85(3H，s，H － 19)，1.50(3H，s，H －21)，5.40(1H，m，H －6)，6.45(1H，s，H － 18)，1.24(3H，d， J＝6.0 Hz，H －6′)，1.39(3H，d， J ＝6.2 Hz，H － 6″)，1.50(3H，d， J ＝ 6.2 Hz，H － 6蓯)，3.30(3H，s，C － 3′－ OCH3)，3.58(3H，s，C － 3″－ OCH3)，5.31(1H，d， J＝9.2 Hz，H －1′)，5.22(1H，d， J＝8.0 Hz，H －1蓯 )，5.17(1H，d， J ＝ 9.2 Hz，H － 1″″)，5.16(1H，d， J ＝2.2 Hz，H － 1″)。

各化合物13C－NMR數(shù)據(jù)見表1。

3 討論

鵝絨藤屬植物在全球有200余種，我國境內分布有近50種。白薇作為鵝絨藤屬植物的代表植物，在我國有上千年的應用歷史，皂苷類成分是白薇的活性成分，但基于單體化學成分研究較少，尚有待開發(fā)。本研究中采用常規(guī)提取分離技術對白薇的乙醇提取物化學成分進行研究，共分離得到8個皂苷類成分，經過核磁共振光譜分析確定全部結構，均為從該植物中首次分離得到，且具有相似結構。同類結構的富集，對于其藥用植物的質量評價及藥理活性研究具有明確的指導意義，可為傳統(tǒng)中藥白薇的后續(xù)開發(fā)奠定堅實的基礎。

表1 各化合物13C－NMR數(shù)據(jù)(C5D5N，100 MHz)