桑樹抗黃化型萎縮病種質資源篩選試驗

李萬明

(安康學院，陜西 安康 725000)

在陜南安康，桑樹黃化型萎縮病防治主要通過防治媒介昆蟲菱紋葉蟬[2]，由于菱紋葉蟬年發生4代，第二、三代常遷出桑園在其它寄主危害，行蹤不定。且該蟲食性繁雜，又有世代重疊現象，依靠防蟲控制病害的效果較差。樹干注藥又受到條件限制難以長期維持。化學防治污染環境且易對非靶標家蠶造成毒害[3]。故該病防控必須依靠抗性品種的培育和栽培。

1 材料與方法

1.1 試驗試材

測試品種包括陜西省蠶桑重點實驗室品種圃引植品種47種，陜南安康地區有明確品種引種記載的主栽品種11種，共計58種。

1.2 試驗方法

1.2.1 品種抗病性鑒定 采用種質接穗高接法[4]，此法系病樹(砧)接健穗，2014-2015年，每年以發病較重桑樹上高接待鑒定桑樹品種，方法是選擇樹冠較大、萎縮病較重、生長勢較強的成齡湖桑19桑樹，在湖桑19病枝上高接待鑒定58桑樹材料的健康接穗，每份參加鑒定的材料每株病樹上嫁接4個接穗，5株重復，即每份鑒定材料嫁接20個接穗組成試驗樣本。

桑樹黃化型萎縮病嚴重度分級為：

1級——健壯，無癥狀。代表值為0。

2級——病株有隱癥現象，髙接接穗中僅有1個枝梢出現黃化枝，表現葉色黃化，皺縮，葉脈呈黃色網狀，有時葉片有5%變黃或變紅發紫等典型癥狀。代表值為1。

3級——病株無隱癥現象，髙接接穗中有2～3個枝梢出現黃化枝，病株葉片有5%～15%表現黃化萎縮病狀，株型出現矮化癥狀。代表值為2。

4級——病株無隱癥現象，髙接接穗中有4個以上枝梢出現黃化枝，病株葉片有16%～25%以上桑葉表現癥狀，株型明顯矮化。代表值為3。

5級——病株無隱癥現象，髙接接穗中枝梢全部出現黃化枝，病株葉片幾乎全部表現黃化癥狀，甚至枯焦脫落，枝莖枯死，有時整株出現急性凋萎死亡。代表值為4。

發病程度計算公式[5]：發病率(%)=發病接穗數/成活接穗總數×100

病情指數=∑(各級病株數×該病級值)/ (調查總株數×最高級值)×100

桑樹抗黃化型萎縮病抗性評價標準：高抗品種：發病率≤5%，病情指數≤5%； 中抗品種：發病率6%～20%，病情指數6%～10%； 中感品種：發病率21%～40%，病情指數11%～20%；高感品種：發病率≥40%，病情指數≥21%。

1.2.2 種質抗性穩定性鑒定 采用皮枝接種法和管狀芽接法[6]，此法以健樹(砧)接病穗。具體方法是每年提前3月份將待測定的桑樹品種嫁接在實生苗上獲取健壯的嫁接苗。至7月中旬時開始進行兩次嫁接，第一次嫁接采用皮枝接種法，主要是幼苗(穗)木質化程度不夠，目的是檢測桑品種產生木衛素前抗性情況。第二次采用管狀芽接法，8月中旬開始選取上年高接接穗中的病桑接穗，扭動皮部使之與木質部分離，在病穗芽上下0.5 cm處環割皮層形成芽管，接穗均用5%的鹽酸土霉素溶液浸泡后套接在待鑒定的桑品種嫁接苗上。嫁接苗枝條選木質化或半木質化健壯枝條。觀察萎縮病芽發病率、病情指數和等級，比較桑品種抗黃化型萎縮病的抗性。

2016-2017年，每年將初選18個抗性品種的接穗再次高接在健康的桑樹上，每株接8個接穗，每品種5株重復，每品種40個復接接穗組成觀察樣本，觀察品種資源抗病性的穩定性。每年逐代嫁接兩次。

桑樹品種對黃化型萎縮病抗病穩定性標準為：0級,接穗(芽)不發?。?級,10%以下接穗(芽)發??；2級,11%～20%接穗(芽)發??；3級,21%～30%接穗(芽)發病； 4級,30%以上接穗(芽)發病。

2 結果分析

2.1 調查黃化型萎縮病在不同桑品種上的發病情況如表1所示。

由表1可知，初測58個桑樹種對桑樹黃化性萎縮病抗性較強的桑樹品種有：育237、育2、鳳尾芽變、團頭荷葉白、魯誘1號、魯誘3號、魯誘7號、小紅皮、908、湖桑199、強桑、葫蘆桑、扶桑丸、烏克蘭107號、洞庭1號、731、倫教408、青葉鼠返共18個品種。

2.2 抗病穩定性檢測

經對18個抗性桑品種種質抗性穩定性逐代嫁接復選，結果如表2所示。

表2可見：抗性穩定性能好，且抗病力強的品種有：鳳尾芽變、育237、育2、強桑、湖桑199、葫蘆桑等六個品種?？剐圆环€定，且相對較弱的品種有：魯誘1號、洞庭1號兩個品種，中等抗性的品種有：魯誘7號、魯誘3號、團頭荷葉白、烏克蘭107號、731、青葉鼠返等。同時，由表2可知，由病芽病穗接健砧接穗成活率高，黃化型萎縮病的發病率低，這種現象說明病害發生時病原存活在芽稍上數量少，這與王忠陽部分觀點相吻合[7]。

表1 58個桑品種抗黃化型萎縮病發病程度 (陜西安康 2014，2015)

表2 桑品種種質抗性穩定性檢測 (陜西安康 2016，2017)

2.3 綜合抗性結果

按照桑樹黃化型萎縮病評鑒標準,兩次評鑒的抗性等級，綜合表1和表2結果，桑樹58個品種經篩選抗性結果如下：

高抗品種：鳳尾芽變、育237、育2、強桑、湖桑199、葫蘆桑。

中抗品種：魯誘1號、魯誘3號、豆腐皮、908、紅頭桑、望天青、湖桑199、廣1號、陜桑305、劍持、強桑、扶桑丸、紅皮海桑、鏡泊桑、倫敦40號、中桑5801、中亞細亞、烏克蘭107號、GM41、洞庭1號、金龍、731、黑葉墨斗、倫教408、青葉鼠返、農桑14、農桑8號、陜桑406、陜桑403、陜桑402、金十。

中感品種：桐鄉青、盛東1號、8837、魯9463、浙農火桑、朝桑、伊豆早生、荊青1號、紫薇桑、雙頭桑、黃桑、麻桑、日本早生、鳳尾桑、羊角桑、農桑12號。

高感品種：真肚子、湖桑16、湖桑175、油燈雞毛撣。

3 結論及討論

(1)高接和芽管套接操作過程中，要嚴格執行桑黃化型萎縮病防治規程[8]中桑樹嫁接修剪病原阻斷技術。具體做法是:①桑樹修剪嫁接操作時首先準備臉盆一個，內盛5 L潔凈清水。②臉盆中加入消毒液。消毒液配方為：84消毒液50 mL+3%多氧清水劑5 mL(或用病毒靈5 g+農用土霉素25 g+四環素4 g。③準備嫁接工具或修剪工具2至3套，浸泡在消毒液中，確保浸泡時間5～10 min。④大樹修剪(或嫁接)時，浸泡工具輪換交替使用，確保一桑(穗)一剪(工具)。此項技術，可以防止病原在高接和芽接時通過工具交互感染。

(2)試驗中發現，芽管套接時對芽管使用5%的鹽酸土霉素浸泡后，部分芽萌發展葉時葉片能正常發芽展葉，對桑黃化型萎縮病病原的抑制效果明顯。但是葉片發黃，分析原因，浸泡葉的PH值過小，因此，在健砧接病穗時，對病穗的消毒藥劑及其配比有待進一步研究。

(3)鑒定桑樹抗黃化型萎縮病的抗病力,大田誘發法及媒介昆蟲傳毒法比較傳統，雖能真實反映桑種質抗病力強弱,但持續時間長且費工費力[9]. 蒯元璋[10]為了減少病芽管接時接菌量大而提出芽接發病中量法,此法對砧木與接穗的粗細搭配要求較為苛刻。技術難度大，不易控制推廣。故試驗中對芽接發病中量法進行如下改進：一是采用了皮枝接種法和管狀芽接法兩種方法。在芽管嫩稍未木質化前，此時芽管難以剝離，采用皮枝接種法，在健砧上接病穗。后期病芽芽管易剝離時采用管狀芽接法，克服病穗失水后難取管狀芽不足。二是統一對接穗接芽進行了適當的藥劑處理，從而減少帶菌量。因此，皮枝接種法和管狀芽接法具有操作簡便，成活率較高，無需貯藏接穗等特點，兩法配合使用可有效鑒定桑品種抗黃化型萎縮病的抗病穩定性。但這兩種方法在夏季高溫季節操作時易造成芽穗脫水，其改良方法有待進一步探索完善。