病毒性心肌炎患兒血清visfatin、VE-cadherin表達情況及臨床意義探討

楊建偉，劉曦，楊俊梅

(1.鄭州大學附屬兒童醫院檢驗科；2.鄭州大學附屬鄭州中心醫院眼科，河南 鄭州450018)

病毒性心肌炎（Viral myocarditis，VMC）為兒科常見疾病，病毒侵犯心肌后可致使心肌細胞產生變性、壞死與間質性炎癥，若不予以及時診治可造成嚴重心律失常、心源性休克、心力衰竭、猝死等，危及患兒生命安全[1]。探尋一種VMC早期診斷和病情評價方法對指導臨床采取早期準確治療、改善患兒預后具有重要意義。目前，VMC的具體發病機制尚未明確，但近年來，有關研究報道，免疫功能紊亂與炎性細胞因子于其發生、發展中起著重要作用[2]。內脂素（visfatin）為脂肪細胞所分泌的一種細胞因子，可提高白介素-8、腫瘤壞死因子-α、基質金屬蛋白酶9（MMP-9）等多種炎性細胞因子表達，促進炎癥反應發生、進展[3]。血管內皮細胞鈣黏蛋白（VE-cadherin）可保持血管內皮細胞極性與完整性，和內皮細胞功能穩定性密切相關。本研究選取102例VMC患兒及同期69例健康體檢兒童，分組分析，旨在觀察VMC患兒血清visfatin、VE-cadherin水平表達情況及臨床意義，報告如下。

1 資料及方法

1.1 一般資料 選取2015年3月-2018年5月我院VMC患兒102例為試驗組，同期選擇69例健康體檢兒童為對照組。試驗組男58例，女44例；年齡 3～14 歲，平均（8.31±2.63）歲；體重 19～31kg，平均（24.05±2.93）kg；病變程度：重度 28 例，中度41例，輕度33例。對照組男37例，女32例；年齡3～13 歲，平均（8.94±3.05）歲；體重 18～30kg，平均（24.47±3.14）kg。 兩組一般資料（體重、性別等）均衡可比（P＞0.05），本研究符合《世界醫學會赫爾辛基宣言》有關要求。

1.2 選例標準

1.2.1 納入標準 ⑴試驗組符合 《病毒性心肌炎診斷標準》[4]中VMC有關診斷標準，抗柯薩奇病毒B組IgM抗體檢查陽性，起病前1～3周存在上呼吸道感染史；⑵對照組均無心血管疾病、急慢性感染；⑶兩組患兒家屬均知曉本研究，簽訂知情同意書。

1.2.2 排除標準 ⑴合并心肌病、先天性心臟病等其他心臟疾病兒童；⑵合并惡性腫瘤、血液系統疾病、精神系統疾病兒童；⑶肝腎功能嚴重異常兒童；⑷存在腹瀉病史兒童；⑸近期使用影響血清visfatin、VE-cadherin檢測水平藥物兒童。

1.3 方法

1.3.1 檢測方法 采集受檢者3ml清晨空腹靜脈血，3000r/min離心處理10min，取血清，-70℃冰箱中凍存待檢；以雙抗夾心酶聯免疫吸附法測定血清visfatin、VE-cadherin水平，試劑盒購于上海慧穎生物科技有限公司，檢測儀器為全自動酶標儀（瑞士 TECAN，Freedom Evolyzer 2150）； 相關操作嚴格按照試劑盒說明書實施。

1.3.2 治療方法 對試驗組患兒采取常規治療，保證充分臥床休息及營養供給，并采用細胞色素C、輔酶A、三磷腺苷、大劑量維生素C等藥物改善心肌代謝及營養，同時加用果糖二磷酸鈉、胸腺肽治療，持續治療15d。

1.4 觀察指標 ⑴對比試驗組和對照組血清visfatin、VE-cadherin水平。⑵對比試驗組不同病情程度（重度、中度、輕度）患兒血清visfatin、VE-cadherin水平。⑶對比試驗組患兒處于急性期、恢復期血清visfatin、VE-cadherin水平。⑷對比試驗組治療前、治療7d后、15d后血清visfatin、VE-cadherin水平。⑸觀察血清visfatin、VE-cadherin水平與VMC病情程度的相關性。

1.5 統計學分析 以SPSS 23.0處理，計量資料（x±s）表示，t檢驗，多組間比較行單因素方差分析，多重比較行 LSD-t檢驗，計數資料 n（%）表示，χ2檢驗，相關性分析行Spearman相關分析，檢驗標準α=0.05。

2 結果

2.1 試驗組和對照組血清visfatin、VE-cadherin水平比較 試驗組血清visfatin、VE-cadherin水平均高于對照組（P＜0.05），見表 1。

表1 試驗組和對照組血清visfatin、VE-cadherin水平比較（x±s）

2.2 試驗組不同病情程度患兒血清visfatin、VE-cadherin水平比較 試驗組不同病情程度患兒血清visfatin、VE-cadherin水平對比，差異有統計學意義（P＜0.05），且重度患兒上述指標水平高于中度患兒，中度患兒高于輕度患兒（P＜0.05），見表 2。

2.3 試驗組患兒處于不同疾病分期時血清visfatin、VE-cadherin水平比較 試驗組患兒疾病處于急性期時血清visfatin、VE-cadherin水平高于恢復期時（P＜0.05），見表 3。

表2 試驗組不同病情程度患兒血清visfatin、VE-cadherin 水平比較（x±s）

表3 試驗組患兒處于不同疾病分期時血清visfatin、VE-cadherin 水平比較(x±s，n=102)

2.4 試驗組治療前、治療7d后、15d后血清visfatin、VE-cadherin水平比較 試驗組治療 7d、15d后血清visfatin、VE-cadherin水平均較治療前降低，且治療15d后上述血清指標水平低于治療7d后（P＜0.05），見表 4。

表4 試驗組治療前、治療7d后、15d后血清visfatin、VE-cadherin 水平比較(x±s，n=102)

2.5 血清 visfatin、VE-cadherin水平與 VMC病情程度的相關性分析 相關性分析顯示，血清visfatin、VE-cadherin水平與VMC病情程度呈顯著正相關（P 均＜0.05），見表 5。

3 討論

VMC屬一種心血管疾病，兒童為其好發群體，且近年來其發病率有逐漸增高趨勢，臨床普遍認為，柯薩奇B組病毒為VMC主要病原，且其誘發的心肌炎可能于感染過程中主要依賴炎癥細胞因子大量釋放，炎癥細胞因子于VMC發病機制中占據主導地位[5，6]。Visfatin最初是由活化外周血淋巴細胞內分離出，與B淋巴細胞成熟有著密切關系。最近有研究發現，人體內Visfatin主要是源自內臟白色脂肪組織內巨噬細胞，而巨噬細胞為參與機體炎癥反應的一種主要細胞，因此推測Visfatin屬重要前炎性因子之一[7]。當產生VMC時Visfatin可提高單核細胞MMP-9和MMP-9 mRNA活性度，促使內皮細胞分泌單核細胞趨化蛋白-1和MMP-9/-2。同時，Visfatin可促進MMP-9基質降解作用，提高血管細胞黏附分子-1和細胞間黏附分子1表達，促使白細胞于主動脈內皮及內皮細胞的黏附，此外還能提高白介素-8、腫瘤壞死因子-α表達，促進心肌損傷發生、進展，進而參與VMC發病過程[8]。本研究結果顯示，試驗組血清visfatin水平高于對照組，重度患兒血清visfatin水平高于中度患兒，中度患兒高于輕度患兒，患兒疾病處于急性期時高于處于恢復期時，且治療7d、15d后低于治療前，治療15d后低于治療7d后 （P＜0.05）。表明VMC患兒血清visfatin呈高表達，且表達水平和患兒病情程度、病程進展有密切關系。

表5 血清visfatin、VE-cadherin水平與VMC病情程度的相關性分析（n=102）

VE-cadherin屬內皮細胞的特異性鈣黏蛋白，對保持內皮細胞生理功能具有重要作用，有研究顯示，致血管通透性升高因子主要作用靶部位為VE-cadherin復合體，故測定VE-cadherin水平能間接推測是否存在微血管內皮細胞損傷和血管通透性增高，推測血管內皮損傷程度[9-11]。血管內皮細胞不僅能促進水和小分子物質的交換，且能分泌較多生物活性物質進而對機體實施調節。血管內皮細胞功能紊亂可造成血管病變，晚期表現為動脈粥樣硬化性改變，導致該血管供血區出現缺血性變化，且會使局部血管內皮被激活，造成斑塊產生裂隙，造成心肌損傷出現，屬VMC重要病理基礎之一，而VE-cadherin能造成內皮細胞功能產生紊亂，進而促進VMC發生、進展[11，12]。本研究結果顯示，試驗組血清VE-cadherin水平高于對照組，重度患兒血清VE-cadherin水平高于中度患兒，中度患兒高于輕度患兒，患兒疾病處于急性期時高于恢復期時，且治療7d、15d后低于治療前，治療15d后低于治療7d后（P＜0.05）。表明VMC患兒血清VE-cadherin呈高表達，且表達水平和患兒病情程度、病程進展有密切關系。本研究結果中，相關性分析顯示，血清visfatin、VE-cadherin水平與VMC病情程度呈顯著正相關（P均＜0.05）。亦提示血清visfatin、VE-cadherin和VMC病情程度密切相關。分析其原因為visfatin、VE-cadherin高表達可造成免疫病理損傷，且能促進多種細胞因子表達，導致細胞因子網絡失調，造成免疫功能紊亂，進而加劇心肌炎癥損傷。

綜上所述，VMC患兒血清 visfatin、VE-cadherin呈現高表達，且其水平和患兒病情程度、病程進展密切相關，對VMC的診斷和療效評估具有重要意義。