不同病情程度妊娠期高血壓疾病患者血清APN、胎盤MMP-9水平變化及臨床意義探討

張永梅，王睿

(1.鄭州市婦幼保健院門診內科；2.鄭州市婦幼保健院檢驗科，河南 鄭州 450000)

妊娠期高血壓疾病（Pregnancy-induced hypertension syndrome，PIH）屬產科嚴重并發癥之一，易導致不良妊娠結局，但其發病機制及病因尚未完全清楚，臨床需及早發現，以對癥治療，控制病情進展。脂聯素（APN）是近年發現的由脂肪組織分泌的一種蛋白質激素，臨床研究發現，其血清中水平變化與糖尿病、肥胖、脂代謝紊亂及高血壓等關系密切[1]。基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）是由內皮細胞、滋養細胞等分泌的Zn2+依賴肽鏈內切酶，是引起滋養細胞侵襲的主要物質之一，相關研究指出，隨妊娠期高血壓病情進展，絨毛上皮組織MMP-9表達迅速降低，其侵蝕能力顯著下降[2，3]。本研究選取我院PIH患者174例作研究對象，旨在探討不同病情程度間血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率變化及臨床意義。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年3月-2018年2月我院PIH患者174例作研究對象，根據病情程度不同分單純妊娠期高血壓組（n=60）、輕度子癇前期組（n=56）、重度子癇前期組（n=58），另選同期健康體檢者57例作對照組。3組年齡、體質量指數、孕周、孕次、產次、居住地等基礎資料對比無顯著差異（P＞0.05），見表 1。

1.2 納入及排除標準 ⑴納入標準：均符合PIH診斷標準[4]；均為單胎；均知情本研究并簽署同意書。⑵排除標準：伴有高血壓、癲癇、糖尿病史者；伴有精神異常者；合并血液系統疾病者；臨床資料缺失者等。

1.3 方法

1.3.1 血清APN檢測方法 入院后均于次日晨抽取空腹肘靜脈血 5ml，離心 10min（3000r/min），取上層血清置入-70℃冰箱待測。酶聯免疫吸附試驗（ELASA）檢測APN水平。所用試劑及試劑盒均由南京軒凱生物科技有限公司提供，操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3.2 胎盤MMP-9陽性表達率檢測 a、胎盤組織取材、制備，于胎盤娩出30min后取母面中央1cm×1cm×1cm左右組織塊，注意避開壞死、鈣化區，以生理鹽水漂洗后用福爾馬林溶液（10%）固定＞24h，常規石蠟包埋，4μm連續切片。b、主要試劑，試劑一抗、試劑盒 （南京軒凱生物科技有限公司，SP9000）、磷酸氫二鉀、磷酸氫二鈉、氯化鉀、氯化鈉等。化學試劑均由萬華化學集團股份有限公司提供，均為分析純。c、免疫組化測定，均由相同檢驗科醫師嚴格按照說明書進行。以已知陽性標本作陽性對照，以BSA（1%）替代一抗作陰性對照。以細胞出現棕黃色沉著顆粒視MMP-9陽性反應；以免疫組織化學法（SP）測定胎盤組織MMP-9陽性表達率。與背景一致計0；胞漿內或胞核內見少量淡黃色顆粒，顯著高于背景計1；胞漿內或胞核內見稍多深棕色顆粒計2；胞漿內或胞核內見大量褐色或深棕色顆粒計3。陽性細胞百分比，無陽性細胞計 0；＜25%計 1；25%～50%計 2；＞50%計 3。 取上述兩項乘積：0～1 為（-）；2～3 為（+）；4～5 為（++）；＞5為（+++）。

表1 基礎資料

1.4 觀察指標 ⑴分析不同分組間血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率。⑵分析血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率與PIH病情程度相關性。

1.5 統計學處理 通過SPSS 21.0處理數據，以n（%）表示計數資料（胎盤MMP-9陽性表達率），行χ2檢驗，以（x±s）表示計量資料（血清 APN 水平），行t檢驗，組間比較用獨立樣本t檢驗，多組間比較用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗，采用Spearman分析法進行相關性分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 PIH患者與健康者血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率 PIH患者血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率低于健康對照組（P＜0.05），見表2。

表2 PIH患者與健康者血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率

2.2 不同病情程度血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率 經單因素方差分析，不同病情程度間血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率對比，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩兩比較，輕度子癇前期組血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率低于單純妊娠期高血壓組，重度子癇前期組低于輕度子癇前期組（P＜0.05），見表 3。

表3 3組血清APN水平及胎盤MMP-9表達率對比

2.3 血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率與PIH病情程度相關性分析 經Spearman分析，血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率與PIH病情程度呈負相關 （r1=-0.714，P1=0.013；r2=-0.614，P2=0.021）。

3 討論

PIH多發于孕20周后，據臨床統計，我國發病率約10%[5]。其臨床表現蛋白尿、血壓升高、水腫等，嚴重者會出現抽搐、昏迷，累及多器官損傷，終止妊娠可迅速緩解病情。該疾病主要病理變化是全身小動脈痙攣，且血管內皮細胞功能缺失、損傷為PIH發病中心環節。

APN是由脂肪細胞分泌的一種含244個氨基酸內源性激素多肽，高分子復合體是其主要活性形式。該物質于機體糖代謝、脂肪酸氧化、穩定血管內皮功能中起重要調節作用，據動物實驗證實，給予高血壓大鼠外源性APN可降低其血壓水平[6]。另外，學者張艷等[7]研究指出，高血壓患者血清APN呈低水平狀態，認為交感神經過度興奮抑制了APN表達。本研究通過檢測174例PIH患者血清APN水平發現，其低于健康對照組，且經單因素方差分析，不同病情程度間血清APN水平對比，差異有統計學意義（P＜0.05）；兩兩比較，輕度子癇前期組血清APN水平低于單純妊娠期高血壓組，重度子癇前期組低于輕度子癇前期組（P＜0.05），表明隨PIH病情程度加重，血清APN水平呈降低趨勢，尤其是重度子癇前期組降低更為顯著。臨床研究指出，于胚胎植入中，滋養細胞沿子宮螺旋小動脈浸潤子宮內膜、肌層尤為關鍵，若侵蝕螺旋動脈不足、植入過淺會影響胎盤血管重塑過程，致使胎盤缺氧缺血，引起各種細胞因子入血損傷血管內皮，誘發蛋白尿、水腫等多種PIH臨床癥狀[8，9]。MMP-9主要作用于Ⅰ及Ⅴ型明膠、Ⅳ及Ⅴ型膠原，能降解細胞外基質，參與調解月經周期、創傷修復、胎盤形成、胎膜破裂等過程[10]。臨床研究證實，MMP-9的表達會直接影響滋養細胞浸潤能力，其降解蛋白多糖、膠原蛋白等細胞外基質，能促進滋養細胞侵襲[11，12]。本研究發現，PIH患者胎盤MMP-9陽性表達率低于健康對照組（P＜0.05），且對不同病情程度患者進行對比發現，輕度子癇前期組胎盤MMP-9陽性表達率低于單純妊娠期高血壓組，重度子癇前期組低于輕度子癇前期組（P＜0.05），表明胎盤MMP-9表達不足是導致滋養細胞侵襲能力低，影響胎盤著床的主要因素之一。另外，本研究經Spearman分析得知，血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率與PIH病情程度呈負相關（P＜0.05），表明血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率與PIH患者病情程度密切相關，及時了解其水平變化可有效防治PIH。

綜上可知，血清APN水平及胎盤MMP-9陽性表達率與PIH患者病情程度密切相關，為臨床探討其發病機制提供了新途徑。