河南省堯山白山羊弓形蟲血清抗體檢測分析

張松山 ， 孫紅霞 ， 蘇玉賢

(1.河南省平頂山市畜產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測中心 ， 河南 平頂山 467000 ；2.河南省平頂山市畜牧技術(shù)推廣站 ， 河南 平頂山 467000)

堯山白山羊是中國地方優(yōu)良品種，也是魯山縣羊產(chǎn)業(yè)的一個當(dāng)家品種，主要分布于河南省魯山縣的背孜、堯山、瓦屋、倉頭、團(tuán)城、四棵樹共6個鄉(xiāng)(鎮(zhèn))。2009年5月, 國家畜禽資源鑒定委員會將該羊種正式定名為“堯山白山羊”，并確認(rèn)為國家級地方優(yōu)良畜種。本次選擇以上6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)開展弓形蟲抗體檢測與分析，旨在了解該地區(qū)羊弓形蟲病流行情況，為該地區(qū)羊的安全飼養(yǎng)和食品衛(wèi)生提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 抽樣方案設(shè)計 采用兩層兩階段隨機(jī)抽樣結(jié)合便利抽樣方法進(jìn)行抽樣方案設(shè)計。

第二階段分別計算規(guī)模場和散養(yǎng)戶內(nèi)的抽樣羊只數(shù)量。規(guī)模場內(nèi)羊只數(shù)量計算仍按估計流行率的方法計算，按95%置信水平，預(yù)期流行率10%，9%的可接受誤差，群體數(shù)量均按無窮大，則場群內(nèi)需抽取不少于43只羊的全血，場內(nèi)隨機(jī)選羊，按系統(tǒng)隨機(jī)方法抽樣。由于散養(yǎng)戶對抽樣調(diào)查相對不理解，配合度也比較差，采用便利抽樣方式每個散養(yǎng)戶抽樣20只羊的血液。

1.2 材料來源 于2018年3月-2018年7月在背孜、堯山、瓦屋、倉頭、團(tuán)城、四棵樹6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，按1.1抽樣方案設(shè)計開展抽樣工作 ，最終獲得24個羊場共814份血清樣品，其中規(guī)模場14個，血清628份，散養(yǎng)戶10個，血清186份。采用頸靜脈采血方式對每頭被檢羊采集約5.0 mL全血，于4 ℃靜置過夜后，3 000 r/min離心10 min，收集上清(血清)至新的1.5 mL離心管，保存于-80 ℃，待檢。

1.3 試驗試劑及檢測方法 羊弓形蟲間接血凝試驗血清抗體檢測試劑盒,購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所(批號：20180115)；檢測方法和判定標(biāo)準(zhǔn)參考試劑盒提供的說明書進(jìn)行，且每個被檢測樣品重復(fù)3個孔。

1.4 數(shù)據(jù)分析 用Excel整理采集到的數(shù)據(jù)，用SPSS23軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)卡方檢驗。

2 調(diào)查結(jié)果

2.1 河南省堯山白山羊弓形蟲病血清抗體檢測結(jié)果 被調(diào)查的814份羊血清樣品中有49份樣品檢測為弓形蟲血清抗體陽性，平均陽性率為6.02% (49/814)；被調(diào)查的6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)均存在不同程度的羊弓形蟲病流行，說明羊弓形蟲病在平頂山市流行區(qū)域較為廣泛；6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)羊弓形蟲感染情況存在一定差異，為3.61%～8.49%，見表1，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)之間弓形蟲病感染率差異不顯著(P>0.05)。

表1 河南省堯山白山羊弓形蟲血清抗體檢測結(jié)果

2.2 河南省堯山白山羊不同年齡階段羊弓形蟲病血清抗體檢測結(jié)果 通過將被調(diào)查羊群分為0-1歲、1-2歲、2-3歲和3歲以上不同年齡階段，以分析羊弓形蟲病感染羊群在年齡階段的差異。調(diào)查結(jié)果如表2所示，各年齡階段羊群均存在弓形蟲病感染，其中3歲以上羊群弓形蟲陽性率最高，為9.22%(47/206)，而0-1歲羊群陽性率最低，為4.02%(14/348)，不同年齡段之間弓形蟲病感染差異顯著(P<0.01)。

2.3 不同養(yǎng)殖模式羊場弓形蟲病流行情況調(diào)查結(jié)果 在被調(diào)查的24個羊場中有14個為規(guī)模化羊場，共628份血清樣品，其余的186份血清樣品則來自于10個散養(yǎng)羊場。調(diào)查結(jié)果顯示，被調(diào)查的24個羊場均含有弓形蟲陽性羊，場陽性率為100%，其中規(guī)?；驁龉蜗x陽性羊只21只，陽性率為3.34%(21/628)，而散養(yǎng)羊場陽性率偏高，為15.05%(28/186)，從個體感染情況看，規(guī)模場和散養(yǎng)場感染差異極顯著(P<0.01)。

表2 不同發(fā)育階段羊群弓形蟲病血清抗體檢測結(jié)果

表3 不同養(yǎng)殖模式羊場弓形蟲病流行情況檢測結(jié)果

3 討論

剛地弓形蟲病是一種重要的人獸共患性寄生蟲病，給人類和動物健康造成巨大的威脅，而我國是羊肉消費大國，在羊的養(yǎng)殖或羊肉的消費過程中，弓形蟲可以通過羊肉和羊的排泄物而感染人類，因此，了解羊弓形蟲病感染情況對保障羊的健康生產(chǎn)和公共衛(wèi)生安全具有重要意義[2-3]。

本次調(diào)查通過對平頂山市魯山縣6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)24個養(yǎng)羊場，共814份羊血清樣品進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，旨在了解這些鄉(xiāng)鎮(zhèn)羊弓形蟲病流行情況。結(jié)果顯示，該市各地區(qū)羊弓形蟲為3.61%～8.49%，平均陽性率6.02%，而根據(jù)文獻(xiàn)報道我國羊弓形蟲病感染率為2.8%～33.3%[2]，說明河南省堯山白山羊弓形蟲病在魯山縣感染率處于較低水平，這可能與當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶提高羊群飼養(yǎng)管理水平和逐漸由散養(yǎng)轉(zhuǎn)化為規(guī)模化養(yǎng)殖有關(guān)；通過分析不同年齡階段羊群弓形蟲病流行情況差異，結(jié)果顯示，0-1歲、1-2歲、2-3歲和3歲以上羊群弓形蟲陽性率分別為4.02%、5.08%、7.04%和9.22%，差異顯著，其整體流行趨勢與祖阿力婭等[4]調(diào)查結(jié)果基本一致，即羊弓形蟲發(fā)病率隨其日齡增長而升高，主要原因是羊隨著日齡增長，體外接觸弓形蟲卵囊或速殖子(速殖子可存在于山羊的唾液、乳汁、尿液、淚液，山羊可經(jīng)口、皮膚黏膜感染)的幾率也相應(yīng)提高，導(dǎo)致其感染率也提高；此外，被調(diào)查的24個羊場均含有弓形蟲陽性羊，說明羊弓形蟲病在該地區(qū)分布廣泛，對人畜健康具有潛在的風(fēng)險，但規(guī)模化羊場弓形蟲陽性率明顯低于散養(yǎng)場，分別為3.34%和15.05%，差異極顯著，這與規(guī)?；驁鰺o論養(yǎng)殖規(guī)模、飼養(yǎng)水平還是衛(wèi)生管理水平均高于散養(yǎng)羊場有關(guān)，此外，被調(diào)查的規(guī)?；驁鼍椿筐B(yǎng)貓、犬等動物，且會定期開展滅鼠活動，這可能是規(guī)?；驁龉蜗x較低的主要原因之一。

本次調(diào)查于2018年3月-7月對平頂山市魯山縣6個鄉(xiāng)鎮(zhèn)24個羊場共814份血清樣品進(jìn)行弓形蟲抗體檢測，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)羊弓形蟲陽性率較低，為6.02%，且該縣羊弓形蟲病流行情況與地區(qū)、羊年齡和養(yǎng)殖模式差異有關(guān)?？傮w來說，平頂山市魯山縣堯山白山羊弓形蟲相對較低，但是場陽性率為100%，分布較為廣泛，對該地區(qū)養(yǎng)殖戶和消費者的身體健康存在潛在的威脅，需要引起獸醫(yī)及衛(wèi)健等有關(guān)部門的重視。