聯(lián)合抗SSA、SSB、ANA以及抗環(huán)胍氨酸肽抗體對診斷原發(fā)性干燥綜合征的臨床意義

溫麗嫻 高 敏 林 城 張世豪▲

1.廣東省東莞市石排醫(yī)院檢驗科，廣東東莞 523330；2.廣東省東莞市人民醫(yī)院病理科，廣東東莞 523059

原發(fā)性干燥綜合征主要對機體的外分泌腺造成影響，口干、眼澀是其典型的臨床表現(xiàn)，可累及全身多臟器及系統(tǒng)并引起自身免疫性病變[1-2]。目前對此疾病的發(fā)病原因暫不明確，可能是遺傳、感染、內(nèi)分泌等多種因素共同作用的結(jié)果。有報道稱在干燥綜合征患者血清中可檢測到抗SSA和SSB抗體，推測抗SSA和SSB抗體與干燥綜合征的發(fā)生及進展有關(guān)，可作為臨床診斷干燥綜合征的指導指標之一。本研究通過分析2015年1月～ 2017年12月我院收治的疑似干燥綜合征患者血清SSA、SSB、ANA以及抗環(huán)胍氨酸肽抗體的差異，旨在為臨床提高干燥綜合征檢測陽性率提供指標，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取東莞市人民醫(yī)院2015年1月～2017年12月收治疑似干燥綜合征患者239例作為研究對象，納入標準：入組者均符合2012年美國風濕病學會原發(fā)性干燥綜合征分類標準[3]，且入院時有口眼干澀、眼內(nèi)有異物感、口腔潰瘍頻繁、腮腺持續(xù)腫大等癥狀，并經(jīng)唇腺病理活檢確診（診斷標準：唇腺活檢存在灶性淋巴性涎腺炎，灶性指數(shù)≥1灶/4mm2，且至少有50個以上淋巴細胞聚集于間質(zhì)者為1個灶）。排除標準：頸部、頭部及臉部有放療史；淋巴瘤；結(jié)節(jié)病、艾滋病及丙型肝炎病毒感染；近期應用阿托品、莨菪堿、顛茄等抗乙酰膽堿藥物治療者。根據(jù)所有研究對象確診結(jié)果分成患病組105例和未患病組134例。患病組中男16例，女89例，年齡26～81歲，平均（53.7±11.7）歲；病程1～6年，平均（3.47±0.76）年。未患病組中男29例，女105例；年齡22～85歲，平均（51.9±12.6）歲；病程1～6年，平均（3.52±0.79）年。兩組患者性別、年齡及病程等一般資料相比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集所有受檢者清晨空腹靜脈血5mL，以3500r/min轉(zhuǎn)速離心10min，分離血清并保存于-20℃冰箱待用。抗SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La采用免疫印跡法測定抗體的血清水平，試劑由深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司提供；ANA抗體和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體采用化學發(fā)光法測定抗體水平，其中ANA抗體試劑由深圳市亞輝龍生物科技股份有限公司提供，使用亞輝龍iFlash3000化學發(fā)光儀測定；抗環(huán)瓜氨酸肽抗體則由美國雅培公司提供，并使用雅培i2000化學發(fā)光儀測定。

1.3 觀察指標

兩組患者抗體SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體的陽性率，以及聯(lián)合檢測上述抗體在原發(fā)性干燥綜合征的陽性率、敏感度及特異度。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理分析，定性資料以百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 各抗體敏感度和特異度分析

抗 體 SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體在患病組患者中的陽性率分別為46.67%、44.76%、16.19%、85.71%及11.43%，未患病組患者的陽性率分別為23.13%、16.42%、5.22%、91.79%及8.96%，見表1。同時患病組各抗體檢測敏感度中ANA較高，而抗環(huán)瓜氨酸肽抗體較低。患病組SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La檢出陽性率較未患病組高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；而ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體與未患病組檢出陽性率相比，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.2 各抗體聯(lián)合檢測在原發(fā)性干燥綜合征患者中的敏感度和特異度分析

患病組聯(lián)合檢測陽性病例為94例，陽性率89.52%，敏感度89.52%，特異度90.30%；未患病組聯(lián)合檢測陽性病例為13例，陽性率9.70%，兩組聯(lián)合檢測陽性率相比，差異有統(tǒng)計學意義（χ2=151.699，P=0.000）。

表1 各抗自身抗體敏感度和特異度分析

3 討論

抗體SSA及SSB抗體是目前臨床上診斷干燥綜合征最為常用的自身抗體[4]，但此兩種抗體均存在局限性，其中抗SSB抗體對干燥綜合征的敏感度相對較低，而抗SSA抗體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病中的陽性率亦較高，易造成干燥綜合征的漏診和誤診[5-6]。唇腺活檢對干燥綜合征診斷的特異性較高，但其為有創(chuàng)檢查，費用較高且較多基層醫(yī)院沒有開展病理檢查，限制其在臨床中的應用。因此，尋找一種敏感度、特異度高且實惠的檢查方式是目前臨床診斷干燥綜合征急需解決的問題。抗環(huán)瓜氨酸肽抗體為風濕性關(guān)節(jié)炎特異性抗體，對風濕性關(guān)節(jié)炎的診斷陽性率較高，且廣泛應用于其早期診斷[7]。原發(fā)性干燥綜合征的致病因素和發(fā)病機制目前尚未清楚，但目前普遍認為可能與病毒感染[8]、性激素異常[9]及遺傳[10]等因素共同作用下，引起機體自身免疫紊亂、細胞及及體液免疫異常反應，促使機體合成及分泌多種炎癥介質(zhì)、細胞因子，從而損傷組織，漿細胞及淋巴細胞進行性浸潤靶器官，可損傷皮膚、淚腺、肝腎及肺等組織及臟器[11-13]。目前，臨床上對原發(fā)性干燥綜合征的診斷主要有血清抗SSA、SSB抗體及唇腺活檢。SSA、SSB自1975年從淋巴細胞提取物被檢測出，此兩種蛋白是組成核糖體蛋白的部分片段，亦在原發(fā)性干燥綜合征血檢中發(fā)現(xiàn)，但抗SSA抗體在眾多自身免疫性疾病的陽性率較高，原發(fā)性干燥綜合征僅為自身免疫性疾病之一，因此對原發(fā)性干燥綜合征缺乏特異性；抗SSB抗體對干燥綜合征的敏感性則較低，故此抗SSA、SSB抗體局限自身因素，限制其在診斷原發(fā)性干燥綜合征的特異度及敏感度；而唇腺活檢為有創(chuàng)檢查，費用相對昂貴且較多基層醫(yī)院沒有開展病理檢查，也限制其在臨床上的廣泛應用。因此目前缺乏特異性診斷原發(fā)性干燥綜合征的指標，為此我們努力探索聯(lián)合使用其它自身免疫相關(guān)抗體來提高原發(fā)性干燥綜合征敏感度和特異度的診斷方法。

經(jīng)研究對比發(fā)現(xiàn)部分自身免疫相關(guān)抗體血清檢測水平對干燥綜合征也具有提示意義，例如：ANA抗體和抗環(huán)瓜氨酸肽抗體檢測。ANA靶抗原已擴展至細胞漿、細胞骨架及細胞核等整個細胞。目前ANA是指細胞內(nèi)全部抗原成分的總稱[14]。ANA可存在于血液中，亦有部分分布于尿液、胸腔積液及關(guān)節(jié)滑膜液中，ANA可與動物所有細胞核相互作用，故而可在多種自身免疫性疾病檢測到，缺乏特異性。抗環(huán)瓜氨酸肽抗體為環(huán)狀聚絲蛋白的多肽片段，為診斷風濕性關(guān)節(jié)炎的特異性抗體，但在其他自身免疫性疾病亦發(fā)現(xiàn)抗環(huán)瓜氨酸肽抗體存在，故而具有一定臨床意義。Taraborelli等[15]研究結(jié)果認為抗環(huán)瓜氨酸肽抗體可作為預測系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者關(guān)節(jié)侵蝕的指標，可作為預后的判斷指標之一。本研究結(jié)果顯示，抗體SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體在患病組患者中的陽性率分別為46.67%、44.76%、16.19%、85.71%及11.43%，未患病組患者的陽性率分別為 23.13%、16.42%、5.22%、91.79% 及 8.96%。聯(lián)合檢測抗體SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體患病組患者陽性率為89.52%，敏感度為89.52%，特異度90.30%。可見上述血清因子聯(lián)合檢測對診斷原發(fā)性干燥綜合征的陽性率優(yōu)于單獨，可推斷聯(lián)合檢測上述指標能有效的提高原發(fā)性干燥綜合征的診斷準確率，避免誤診、漏診或延誤治療時機。

綜上所述，抗體 SSA/Ro60kD、SSA/Ro52KD、SSB/La、ANA以及抗環(huán)瓜氨酸肽抗體聯(lián)合檢測，可提高對原發(fā)性干燥綜合征的診斷敏感度。隨著對干燥綜合征不斷研究，從最開始1965年提出的Bloch標準到最新的美國風濕病協(xié)會（ACR）與歐洲抗風濕病聯(lián)盟（EULAR）標準制定[16]，干燥綜合征的診斷及分類標準不斷優(yōu)化，但局限于干燥綜合征的發(fā)病機制仍未研究清楚，致使目前干燥綜合征仍然缺乏客觀的診斷金標準，此時聯(lián)合抗體檢測可以發(fā)揮其在原發(fā)性干燥綜合征診斷特異性較高的優(yōu)勢，具有較好的臨床應用價值。