血清血脂及載脂蛋白濃度與乳腺癌分子分型及Ki-67表達水平的相關性研究

陳妮娜 范怡暢 尚 昆 楊 婧 曹邦偉

(首都醫科大學附屬北京友誼醫院腫瘤中心，北京 100050)

近年來，癌癥發病人數逐年增加，據統計[1]，乳腺癌是女性發病率最高的惡性腫瘤，2018年，美國約有26.6萬患者被診斷為乳腺癌，4.1萬患者死于乳腺癌，且乳腺癌的發病年齡進一步年輕化。進一步研究[2-3]顯示，乳腺癌預后與雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)、人表皮生長因子受體-2(human epidermal growth factor receptor-2，Her-2)和Ki-67(細胞增生的核標志)有關。2013年，St.Gallen會議[4]提出根據上述4種分子標志，將乳腺癌臨床病理分型為Luminal A型、Luminal B型、Her-2過表達型、三陰性乳腺癌4個類型，各分子亞型間在分子遺傳學特征、發病年齡、臨床特征、惡性程度、治療敏感性及預后等方面均存在差異。循證醫學證據[5-6]表明，血脂濃度與乳腺癌的發病有關，且在不同分子分型的乳腺癌中血脂濃度也不盡相同。本研究通過比較分析乳腺癌患者的血脂代謝水平，觀察血清血脂及載脂蛋白濃度在乳腺癌不同分子分型的患者間的差異及與Ki-67表達水平的關系。

1 對象與方法

1.1 研究對象

本研究選用2012年1月至2017年5月乳腺癌術后且未接受化學藥物治療(以下簡稱化療)者為研究對象，入選標準：①所有病例均經術后病理確診；②術前未使用降脂藥物；③術前未行放射治療與化學藥物治療(以下簡稱放化療)與內分泌治療；④排除糖尿病、冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(以下簡稱冠心病)、腎臟疾病、代謝綜合征等影響血脂代謝的疾病；⑤術后病理資料完整，包括：病理類型、ER、PR、HER-2、細胞增生標志(cell proliferation associated nuclear antigen, Ki-67)淋巴結轉移等。參照2013年St.Gallen標準[4]，通過Ki-67、ER、PR、Her-2，將乳腺癌患者區分為Luminal A型和Luminal B型以及基底細胞樣型乳腺癌(Her-2過表達型)和三陰型乳腺癌四大類。

1.2 方法

1.2.1 血脂監測

采集所有患者空腹靜脈血，測定高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C)、膽固醇(cholesterol，TC)和載脂蛋白B(apolipoprotein B，ApoB)、載脂蛋白A(apolipoprotein A，ApoA)及三酰甘油(triglyceride，TG)等數值測定，并對全部血清標本進行血脂監測。采用本院生化儀界定的血脂參考值范圍：LDL-C 0～4.14 mmol/L，HDL-C 1.04～1.55 mmol/L，TG 0～1.71 mmol/L，TC 0～5.18 mmol/L，ApoA 100～205 mg/dL，ApoB 63～119 mg/dL。

1.2.2 Ki-67表達水平檢測

采用免疫組織化學法EnVision二步法檢測143例乳腺癌患者Ki-67水平，在細胞核中將顏色為棕褐色顆粒設定作陽性染色判定標準，運用分級方法，根據陽性細胞占比將已經被染色的細胞核分成0、1、2、3共4級，判定標準分別為陽性細胞總量占比為0～5%、6%～25%、26%～50%、超過50%，判定陽性率水平的標準如下：低表達判定標準為Ki-67<14%，高表達判定標準為Ki-67≥14%。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 病例臨床特征

本研究共納入143名乳腺癌患者，年齡32～75歲，平均年齡為(52.32±2.16)歲，所有患者都有生育史，沒有家族癌癥病史，4組患者年齡及絕經后人數構成，差異均無統計學意義，詳見表1。

2.2 4組患者血脂濃度比較

除ApoA外，TC、HDL-C、LDL-C、ApoB及TG在各類分型的乳腺癌患者間的差異均有統計學意義(P<0.001)。HDL-C在Her-2過表達型患者明顯低于Luminal A型和Luminal B型患者；LDL-C在Luminal A型明顯低于Her-2過表達型及三陰型患者，在Luminal B型明顯低于Her-2過表達型患者；TC在Her-2過表達型患者的濃度顯然遠超Luminal A型和Luminal B型患者；ApoB在Luminal A和Luminal B型明顯低于Her-2過表達型患者。TG在Luminal B型患者中濃度最低，詳見表2。

表1 四組患者臨床特征比較Tab. 1 Clinical characteristics of four groups of patients

表2四組患者血脂濃度比較
Tab.2Bloodlipidlevelsinfourgroupsofpatients

ItemLuminal A(n=31)Luminal B(n=51)Her-2 overexpressing(n=33)Triple-negative(n=28)FPHDL-C/(mmol·L-1)1.15±0.36???1.09±0.29???0.88±0.260.89±0.158.052<0.001LDL-C/(mmol·L-1)0.39±0.41???3.81±0.35???4.72±0.544.11±0.49△△△619.032<0.001TC/(mmol·L-1)5.31±0.53???5.41±0.62???6.29±0.635.79±0.6418.523<0.001ApoB/(mg·dL-1)1.31±0.35???1.29±0.23???1.71±0.381.51±0.2914.764<0.001ApoA/(mg·dL-1)1.51±0.251.67±0.411.52±0.571.59±0.241.423>0.05TG/(mmol·L-1)2.69±0.24▲2.52±0.572.67±0.31▲2.79±0.26▲2.975<0.05

***P<0.001vsHer-2 overexpressing;△△△P<0.001vsLuminal A;▲P<0.05vsLuminal B；HDL-C：high density lipoprotein-cholesterol;LDL-C：low density lipoprotein-cholesterol;TC：cholesterol；ApoB：apolipoprotein B;ApoA：apolipoprotein A;TG：triglyceride.

2.3 乳腺癌患者血脂濃度與Ki-67水平相關性分析

在143例入選乳腺癌患者的Ki-67指數水平的監測中，高表達者96例(Ki-67≥14%)，低表達者47例(Ki-67<14%)。此后將血清血脂及載脂蛋白與Ki-67做相關性分析。Ki-67與LDL-C(r=0.868，P<0.001)、ApoB(r=0.835，P<0.001)、TC(r=0.897，P<0.001)呈正相關；與HDL-C(r=-0.821，P<0.001)呈負相關；與ApoA(r=0.073，P>0.05)、TG (r=0.098，P>0.05)無相關性，詳見表3。

表3 乳腺癌患者血脂濃度與Ki-67水平相關性分析Tab. 3 Correlation between blood lipid levels and Ki-67 levels in patients with breast cancer

HDL-C：high density lipoprotein-cholesterol;LDL-C：low density lipoprotein-cholesterol;TC：cholesterol；ApoB：apolipoprotein B;ApoA：apolipoprotein A;TG：triglyceride.

3 討論

脂質代謝異常與惡性腫瘤的相關性是近年來的研究熱點，研究[7-9]表明血脂濃度與多種惡性腫瘤的發病和進展有關，尤其是乳腺惡性腫瘤。但目前有關血脂及載脂蛋白濃度與乳腺癌各分子分型之間的關聯研究沒有相關報道，本研究的主要目的是探討和分析乳腺癌患者的血脂與其分子亞型之間的關聯。

本文采用回顧性分析的方法，首先在143個罹患乳腺癌的患者中，筆者發現Ki-67與LDL-C、ApoB、TC濃度呈正相關關系；與HDL-C濃度呈負相關關系；與Apo-A、TG濃度無關聯性。上述結果表明血脂濃度的異常程度與Ki-67呈正相關，提示血脂異常可能是乳腺癌患者預后不良的因素。

膽固醇常見于細胞膜內，也是構成生物膜的關鍵組分。體內的膽固醇濃度如果處于正常范圍，能夠在生理層面發揮巨大的作用，如果膽固醇濃度過高，人體免疫系統功能則將遭到抑制，免疫監視和免疫清除兩種功能都會被進一步削弱[10]。另有研究[11]表明，他汀類降脂藥物可明顯降低乳腺癌患者的復發率，進一步研究[12]顯示，口服親脂性藥物辛伐他汀可使患者乳腺癌復發的風險降低，而親水性他汀類藥物對乳腺癌復發無明顯影響，該結論與筆者的研究結果相一致，三酰甘油也是體內重要的血脂成分，參與人體能量代謝，血清中至少75%的三酰甘油都是以極低密度脂蛋白膽固醇(very low density lipoprotein cholesterol，VLDL-C)和乳糜微粒(chylomicron，CM)形式運輸[13]，既往研究[14]顯示，乳腺癌患者血清TC及TG高于非乳腺癌患者，表明TG可能與乳腺癌的發生與進展有關。以上結論與本研究結果表明，定期對不同分子亞型的乳腺癌患者進行血脂檢測分析，對乳腺癌的預后及監測復發有較為重要的指導意義。

細胞增生標志物Ki-67在正常和惡性組織中形成細胞分裂的組成部分，出現于細胞有絲分裂期[15]。Ki-67標記指數(Ki-67 labeling index)是原發性乳腺癌的一個預后因素[16-17]，Ki-67低表達的乳腺癌患者5年無病生存率和總生存率分別為87%和89%，而Ki-67高表達的患者無疾病生存率和總生存率分別為76%和83%[18]。本研究結果顯示，LDL-C和TG與Ki-67的表達水平呈正相關，高水平的LDL-C及TG與乳腺癌患者的不良預后密切相關。

綜上所述，本研究結果顯示，TC、HDL-C、LDL-C及APo B與乳腺癌患者分子分型密切相關，由此可以推斷，通過對乳腺癌不同分子分型患者的血脂濃度監測，對預測乳腺癌患者的預后，具有一定的臨床指導意義，但能否作為預測乳腺癌預后的有效臨床指標，以及是否可以通過對異常血脂濃度進行干預來改善不同分子亞型的乳腺癌患者的預后，還需進一步的大規模臨床研究。