α-內(nèi)收蛋白基因多態(tài)性與血壓鹽敏感和左室肥厚的相關(guān)性

王若琦 李紅梅 唐獻斐 彭昳媛 魏秋醉 黃怡佳 潘征

(右江民族醫(yī)學(xué)院 1臨床學(xué)院心臟內(nèi)科，廣西 百色 533000；2基礎(chǔ)學(xué)院)

高血壓發(fā)病機制復(fù)雜，是多個微效基因與環(huán)境因素交互作用的產(chǎn)物。鈉離子被認(rèn)為是影響血壓的最重要環(huán)境因素，而α-內(nèi)收蛋白(ADD)參與細(xì)胞連接、膜離子轉(zhuǎn)運和信號傳遞等過程,與多種鈉離子轉(zhuǎn)運機制密切相關(guān)〔1,2〕。許多研究發(fā)現(xiàn)ADD基因Gly460Trp多態(tài)性與高血壓的易感性和靶器官損傷等存在相關(guān)性。血壓的鹽敏感性(SS)和左室肥厚(LVH)都是高血壓發(fā)生發(fā)展的獨立危險因素〔3,4〕，與高血壓的預(yù)后密切相關(guān)，明確ADD基因Gly460Trp多態(tài)性與兩者的相關(guān)性有助于更加深入理解兩者的發(fā)生機制，制定相應(yīng)的治療方案。本研究擬探討ADD基因Gly460Trp多態(tài)性與血壓鹽敏感和LVH的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2014年6月至2017年6月在右江民族醫(yī)學(xué)院臨床學(xué)院住院治療，資料齊全，年齡18～80歲，同意參與研究的壯族高血壓患者。排除存在繼發(fā)性高血壓、嚴(yán)重肝腎功能不全、腦血管意外及不愿意參與研究者等。根據(jù)冷加壓試驗檢測結(jié)果分為鹽敏感者和鹽不敏感者各75例；鹽敏感者男40例、女35例，年齡54～72歲，平均(63.14±8.62)歲；鹽不敏感者男42例，女33例，年齡55～78歲，平均(61.97±7.54)歲。根據(jù)LVH的檢測結(jié)果分為LVH組102例和無LVH組48例。LVH組男62例，女40例，年齡55～76歲，平均(63.23±8.57)歲；無LVH組男20例，女28例，年齡51～74歲，平均(62.35±9.47)歲。各組在性別和年齡等差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。均知情同意。

1.2基線調(diào)查 調(diào)查研究對象的人口學(xué)信息、疾病史和家族史等。

1.3臨床資料 以電子血壓計規(guī)范測量收縮壓(SBP)和舒張壓(DBP)，以全自動生化儀檢測肝功能、腎功能、血糖和血脂等生化指標(biāo)。

1.4左室肥厚的檢測 固定的技術(shù)人員采用飛利浦彩色多普勒超聲診斷儀檢測量左房前后徑(LAD)、右房前后徑(RAD)、左心室舒張末期內(nèi)徑(LVDd)、左室收縮末期內(nèi)徑(LVDs)、右室舒張末期內(nèi)徑(RVDd)、室間隔厚度(IVS)、左室后壁厚度(PW)和左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。按照Devereux校正公式計算左室重量(LVM，g)=0.8×1.04×{〔左室內(nèi)徑(LVID)+IVS+PW〕3-LVID3}+0.6。體表面積(BSA)=0.006 1×身高+0.012 8×體重-0.152 9。左室重量指數(shù)(LVMI，g/m2)=LVM/BSA，以LVMI>125 g/m2(男)，>110 g/m2(女)為診斷LVH標(biāo)準(zhǔn)。

1.5鹽敏感的檢測和判斷 血壓的SS判定目前尚無統(tǒng)一規(guī)范的方法和標(biāo)準(zhǔn)，近年來國內(nèi)外有相關(guān)研究提出冷加壓試驗可作為可靠并且相對簡單的方法檢測SS〔5,6〕。本研究采用冷加壓試驗檢測和判斷SS，即測量基線血壓值，受試者的手掌置于冰水混合物中，計時60 s，以試驗后收縮壓、舒張壓和平均動脈壓中任一項最高值較基礎(chǔ)血壓值升高15 mmHg為陽性，反之為陰性。

1.6基因多態(tài)性檢測 參考相關(guān)文獻〔7,8〕進行檢測。常規(guī)抽取靜脈血5 ml，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，低滲分離白細(xì)胞，提取基因組DNA。Genebank進行引物檢索驗證并委托公司合成。ADD基因引物序列上游的順序：5'-CTCCTTTGCTAGTGACGGTGATTC-3',下游的順序：5'-GACTTGGGACTGCTTCCATTCGGC-3'。95℃預(yù)變性5 min，變性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸30 s，40個循環(huán)，72℃再延伸5 min，內(nèi)切酶酶切。以基因雙鏈第614位的堿基都是G的為GG型，都是T堿基的為TT型，其余為GT型。

1.7統(tǒng)計學(xué)分析 采用SPSS17.0軟件進行χ2及t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1鹽敏感患者與鹽不敏感患者的心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)比較 兩組LVPS、LVDd和LVMI差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.2合并LVH組與不合并LVH組心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)比較 兩組LAD、LVDs、LVDd、LVMI和LVEF差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表1 鹽敏感患者與鹽不敏感患者的心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)

與鹽不敏感組對比：1)P<0.05

表2 LVH患者與LVH組患者的心臟結(jié)構(gòu)指標(biāo)

與無LVH組對比：2)P<0.05

2.3鹽敏感組與鹽不敏感組ADD基因Gly460Trp多態(tài)性檢測結(jié)果 兩組GG型、TG型和TT型分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 鹽敏感與鹽不敏感組、合并LVH與不合并LVH組ADD基因Gly460Trp多態(tài)性檢測結(jié)果〔n(%)〕

與無LVH組比較：1)P<0.05

2.4合并LVH組與不合并LVH組ADD基因Gly460Trp多態(tài)性檢測結(jié)果 左室肥厚組TT基因型頻率明顯高于無左室肥厚組(P<0.05)。見表3。

3 討 論

內(nèi)收蛋白是異源二聚體細(xì)胞骨架蛋白，在細(xì)胞表面離子轉(zhuǎn)運與維持鈉鉀泵的功能等方面起到了重要作用。內(nèi)收蛋白的3種亞基分別由ADD1、ADD2、ADD3 3種基因編碼，ADD1基因與高血壓的關(guān)系的研究較多，其Gly460Trp多態(tài)性曾經(jīng)也是鹽敏感高血壓易感基因研究的熱點〔9,10〕。早前的臨床研究和薈萃分析認(rèn)為ADD基因的Gly460Trp多態(tài)性可能與血壓的SS相關(guān)〔11〕，我們進行的納入了更多研究結(jié)論的薈萃分析結(jié)果提示白人ADD基因的Gly460Trp多態(tài)性與SS之間并不存在顯著關(guān)聯(lián)，亞組分析顯示亞洲國家一些小規(guī)模研究的結(jié)果認(rèn)為倆者存在著關(guān)聯(lián)〔12〕。

鹽是高血壓最重要的環(huán)境相關(guān)因素。鹽敏感是包括人類在內(nèi)的哺乳動物共有的生物學(xué)特點。不同的人對鹽負(fù)荷存在不同的血壓反應(yīng)，血壓可在鹽負(fù)荷后呈現(xiàn)出的相應(yīng)升高或者降低等改變。血壓的SS是連接鹽與高血壓的遺傳基礎(chǔ)，是原發(fā)性高血壓的中間遺傳表型，也是心血管病的獨立危險因子〔13,14〕。

LVH是發(fā)生心力衰竭和心腦血管病等的獨立危險因素。臨床上有超過30%的高血壓患者可能發(fā)生LVH，并且發(fā)生率與高血壓嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。高血壓伴LVH的加權(quán)危險將會加劇并促進心腦血管病的發(fā)生和進展〔4,15〕。

本研究結(jié)果與我們前期的研究和既往的相關(guān)研究結(jié)論相似〔12,16〕。

LVM受許多因素的影響，多種因素可以誘導(dǎo)心臟質(zhì)量增加和室壁增厚，進而導(dǎo)致心室重構(gòu)和心力衰竭等〔4,17〕。根據(jù)本研究結(jié)果，我們推測ADD基因Gly460Trp多態(tài)性可能是高血壓患者LVM的預(yù)測指標(biāo)，T等位基因可能是高血壓左室肥厚發(fā)病的遺傳易感基因。與GG基因型相比，TT基因型可能通過影響心肌細(xì)胞膜內(nèi)收蛋白功能，干擾了心肌肌動蛋白的絲狀聚集及可能激活腎小管細(xì)胞Na+-K+-ATP酶活性，增加水鈉潴留，加重心肌負(fù)荷等機制在LVM發(fā)生發(fā)展中起了重要作用。因此，對高血壓患者盡早進行ADD基因Gly460Trp多態(tài)性檢測，盡早發(fā)現(xiàn)高危人群，盡早積極干預(yù)治療有助于將高血壓防治戰(zhàn)線前移，延緩甚至逆轉(zhuǎn)靶器官損傷，降低心血管事件及死亡風(fēng)險，改善預(yù)后，具有重大的理論意義和現(xiàn)實價值。