血清sP-selectin、sE-selectin水平與糖尿病腎病的相關性研究

劉艷秋,林 寧,李紅林,解長銀,孫 健,王志偉

(1.淮安市第一人民醫院分院檢驗科，江蘇淮安 223002;2.南京醫科大學附屬淮安第一醫院檢驗科，江蘇淮安 223300)

糖尿病腎病(DN)是2型糖尿病(T2DM)最常見的并發癥之一，其發病機制很復雜，聯合有效的治療措施可以延緩DN進展為終末期腎衰竭的進程，但腎臟的病理變化一旦形成，其發展很難停止和逆轉[1]。長期高血糖可引起機體的慢性炎性反應,造成血管內皮細胞功能與結構受損,導致血液呈高凝狀態，促進動脈粥樣硬化斑塊的形成，促進心腦血管疾病的發生、發展[2]。目前炎癥學說在糖尿病及其并發癥發生、發展的討論越來越廣泛。選擇素在糖尿病及其并發癥如動脈粥樣硬化、微血管損傷、血栓形成的病理生理過程中起著重要作用。P-選擇素是啟動早期炎性反應的重要因子，也是維持慢性炎癥狀態的重要因素，可表達于血小板和內皮細胞上，與中性粒細胞和單核細胞結合介導白細胞的黏附、滾動、聚集及活化并釋放炎癥遞質。已有多種證據表明在原發與繼發性腎小球疾病中，P-選擇素在腎小球系膜區、內皮細胞及腎小管上皮細胞高表達，參與了腎小球及腎小管間質的炎性反應[3]。循環中的血清可溶性E-選擇素(sE-selectin)是其脫落而形成的異構體。近年來，sE-selectin在動脈粥樣硬化、血栓、微血管并發癥及胰島素抵抗中的地位日益受到關注[4]。

有學者研究發現糖尿病微血管病變患者血清sE-selectin的水平比正常對照組顯著增高，sE-selectin與糖尿病微血管并發癥相關[5]。近年文獻報道血清可溶性P-選擇素(sP-selectin)、sE-selectin與糖尿病患者胰島素抵抗關系緊密，通過檢測二者對早期糖尿病進行診斷，及早進行治療，防止病情出現惡化，值得在臨床上應用推廣[6]。本文對T2DM及DN患者血清sP-selectin、sE-selectin水平進行檢測并分析其相關因素，現將研究報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年1月至2018年5月至在淮安市第一人民醫院分院就診的患者，其中2 型糖尿病組(T2DM組)診斷采用2010年中國糖尿病協會公布的糖尿病防治指南的診斷標準，共62例，其中男32例，女30例，年齡38～80歲，平均(55.25±9.16)歲?？崭寡?FPG)≥7.0 mmol/L和(或)餐后2 h血糖(2hPG)≥11.1 mmol/L。糖尿病腎病組(DN組)診斷參照2007年《糖尿病腎病診斷、辨證分型及療效評定標準》[7]，共59例，其中男29例，女30例，年齡37～70歲,平均(58.11±10.93)歲。DN組疾病史上均先有糖尿病，后出現間歇性或持續性蛋白尿(24 h 尿蛋白定量>3 g，任意尿微量清蛋白>37 μg/min)或有腎功能異常，同時排除由其他疾病引起的腎損傷。選取同期在本院體檢的健康者61例為健康對照組，其中男30例，女31例，年齡35～76歲，平均(56.44±12.02)歲。排除各種肝腎功能疾病、腫瘤、心功能不全 、風濕病、甲狀腺功能異常、自身免疫性疾病等。

1.2方法 使用OLYMPUS(AU680)型自動生化分析儀測定FPG、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、 肌酐(Cr)、胱抑素(CysC)、三酰甘油(TG)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、 低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。穩態模型評價胰島素抵抗指數(HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5。血清空腹胰島素(FINS)水平采用深圳新產業MAGLUMI2000plus全自動化學發光儀檢測。血清sP-selectin、sE-selectin水平使用酶聯免疫吸附(ELISA)法測定,其檢測試劑盒購自美國Rapidbio(RB)公司提供，sP-selectin使用批號為20180519001c,sE-selectin使用批號為20180503004c，采用Rayto-6000型酶標儀，嚴格按說明書操作步驟，做好空白對照，每個標準品均加樣雙孔，取平均值計算，做好質量控制工作。

2 結 果

2.1各組臨床指標的比較 3組間性別、年齡、DBP、CHO、LDL-C比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；T2DM組FPG、TG、FINS、sP-selectin、sE-selectin水平顯著高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；DN組SBP、FPG、、UA、BUN、Cr、CysC、TG、HDL-C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin均高于健康對照組(P<0.05)；DN組SBP、FPG、UA、BUN、Cr、CysC、HDL-C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin高于T2DM組(P<0.05)。見表1、2和圖1～3。

表1 各組臨床指標的比較

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與T2DM組比較，bP<0.05

表2 各組HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin水平的比較

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與T2DM組比較，bP<0.05

注：與健康對照組比較，*P<0.05，與T2DM組比較，▲P<0.05

圖1三組HOMA-IR比較

注：與健康對照組比較，*P<0.05，與T2DM組比較，▲P<0.05

圖2三組sP-selectin水平比較

注：與健康對照組比較，*P<0.05

圖3三組sE-selectin水平比較

2.2sP-selectin、sE-selectin與臨床資料的相關性 血清sP-selectin、sE-selectin與SBP、DBP、年齡、TG、CHO、LDL-C均無相關性(P>0.05)，血清sE-selectin與HDL-C呈負相關(P<0.05)，而血清sP-selectin、sE-selectin與FPG、FINS、UA、BUN、Cr、CysC呈正相關(P<0.05)。見表3。

續表3 sP-selectin、sE-selectin與臨床資料的相關性

2.3HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin的相關性分析 HOMA-IR與sP-selectin、sE-selectin呈高度正相關(P<0.000 1),sP-selectin、sE-selectin呈高度正相關(P<0.000 1)。見表4，圖4。

表4 HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin的相關性分析表

注：A為HOMA-IR與sP-selectin的相關性；B為HOMA-IR與sE-selectin的相關性；C為sP-selectin與sE-selectin的相關性

圖4 HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin的相關性分析

3 討 論

DN在糖尿病人群中，其發生率為20%～40%[8]，是糖尿病最常見的微血管并發癥之一。高糖能刺激血小板膜上高表達sP-selectin，促使血小板聚集活化，介導血小板與內皮細胞白細胞的黏附及微血管內血栓形成[9]。大量的研究表明[10-13],sP-selectin和 P-選擇素糖蛋白-1(PSGL-1)配體在動脈粥樣硬化和血栓的形成等血管因素中起著重要作用。當血管內皮細胞受損傷時,細胞表達sP-selectin明顯增多,sP-selectin與配體結合時能增強單核細胞和內皮細胞與血小板的黏附能力[14]。有關文獻顯示[15]，sP-selectin的表達受許多細胞調節因子的作用，靜止的時候，內皮細胞上sP-selectin的含量微乎其微,可當受到炎性反應因子作用后，sP-selectin的表達明顯增加。高水平的sP-selectin刺激血管平滑肌細胞表達黏附分子從而引起平滑肌細胞增殖：同時sP-selectin可損傷血管內皮細胞，促進炎癥細胞對內皮細胞的黏附,sP-selectin參與了胰島素抵抗,在內皮功能紊亂等起一定作用，參與了T2DM及其血管并發癥的發生、發展[16]。本研究顯示DN組患者血清sP-selectin表達水平均高于單純T2DM組和健康對照組，單純性T2DM血清sP-selectin表達水平高于健康對照組。

GOKULARISHNAM等[17]研究發現，隨著胰島素抵抗的患者胰島素水平增高，血漿sP-selectin水平也將隨之增高；WANG等[3]研究表明T2DM患者中sP-selectin的表達升高，且與DN的嚴重程度呈正相關。本文研究表明血清sP-selectin水平在健康對照組、T2DM組、DN組是逐漸升高的，因此推測sP-selectin也可以作為預測糖尿病及其并發腎病的危險因子。

sE-selectin是黏附分子選擇素家族中重要成員之一，為I型單鏈糖蛋白，主要介導中性粒細胞、單核細胞和某些淋巴細胞在內皮細胞表面進行最初的滯留和滾動，隨后遷移到炎癥組織。sE-selectin具有組織特異性和細胞因子可誘導性，參與炎性反應、介導起始黏附[18]。?AKAR 等[19]研究顯示糖尿病前期患者通過sE-selectin水平增加可診斷。sE-selectin與血糖水平相關。sE-selectin可能是內皮細胞炎癥和功能障礙與血糖水平平行升高的良好標志物，可預測未來心血管事件。ALJWAID 等[20]研究表明選擇素在糖尿病組顯著高于對照組。MATSUMOTO等[21]的研究發現，糖尿病合并大血管、微血管病變組血清sE-selectin水平均明顯高于無血管病變組。TAILOR等[22]也發現DN或者糖尿病伴有視網膜病變的患者血清中sE-selectin水平明顯高于無糖尿病微血管并發癥的患者。國內也有報道[23]sE-selectin是糖尿病視網膜病變患者形成的重要環節,可反映糖尿病視網膜病變病情進展,還與糖化血紅蛋白(HbA1C)、FPG 顯著相關。另外，SHESTAKOVA等[24]發現在不同階段1型DM患者中，有微量或大量蛋白尿患者的血清中sE-selectin水平明顯要比沒有這些病變患者的高，而且增加的水平與患者的性別、血清CHO及TG的水平呈明顯正相關。由此可見sE-selectin是DN發展的重要環節。本研究表明血清sE-selectin水平與HOMA-IR呈正相關，相關系數為0.643 8，P<0.001；提示血清sE-selectin參與胰島素抵抗,血清sE-selectin水平的增高是T2DM及血管病變發生發展的高危因素之一。

4 結 論

本研究T2DM組及DN組血清sP-selectin、sE-selectin水平均大于健康對照組,提示這2個指標增高是T2DM及微血管病變發生發展的高危因素。血清sP-selectin、sE-selectin水平與HOMA-IR呈正相關，sP-selectin、sE-selectin可能通過胰島素抵抗促進DN的發生和發展。通過檢測sP-selectin、sE-selectin水平可能對DN患者進行病情評估和預后判斷具有重要臨床意義。sP-selectin、sE-selectin也有可能成為DN治療研究的新的靶點，其在DN中的檢測具有重要的臨床意義。