AFP、DCP和AFP-L 3%聯(lián)合檢測(cè)對(duì)肝細(xì)胞肝癌的診斷價(jià)值

張明躍，陳浩

保定市傳染病醫(yī)院臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室，河北保定071000

肝細(xì)胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一種惡性程度較高、進(jìn)展較快的惡性腫瘤，其病死率居全球惡性腫瘤的第3位[1]。影像學(xué)檢查和血清甲胎蛋白（α-fetoprotein，AFP）檢測(cè)是HCC的常用診斷方法，其中影像學(xué)檢查對(duì)早期HCC的診斷較困難。20世紀(jì)70年代AFP開(kāi)始應(yīng)用于HCC的診斷，但其靈敏度不高，而且部分慢性肝炎和肝硬化患者的AFP也可能升高[2]。臨床檢測(cè)的AFP實(shí)際上是總AFP蛋白，包括AFP-L1、AFP-L2、AFPL3。AFP-L1來(lái)源于良性肝病細(xì)胞，AFP-L2來(lái)源于孕婦，AFP-L3來(lái)源于癌變肝細(xì)胞，其中AFP-L3與HCC的發(fā)生直接相關(guān)[3]。AFP-L3異質(zhì)體比率（ratio of AFP-L3 isoform，AFP-L3%）和異常凝血酶原（des-gamma-carboxy prothrombin，DCP）是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的與HCC高度相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物，是診斷HCC的重要指標(biāo)。本研究分析AFP、DCP及AFP-L3%對(duì)HCC的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇2012年5月至2013年12月于保定市傳染病醫(yī)院就診的364例門(mén)診及住院的慢性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化或HCC患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均有明確的診斷結(jié)果，慢性肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《病毒性肝炎防治方案》[4]，HCC診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《原發(fā)性肝癌規(guī)范化病理診斷方案專(zhuān)家共識(shí)》[5]，原發(fā)性膽汁性肝硬化診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《自身免疫性肝病診斷和治療指南》[6]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他感染的患者；②孕期及哺乳期患者。納入的364例患者中，男201例，女163例；平均年齡（52.6±12.3）歲；慢性肝炎患者86例（慢性肝炎組），原發(fā)性膽汁性肝硬化患者133例（原發(fā)性膽汁性肝硬化組），HCC患者145例（HCC組）。本研究經(jīng)保定市傳染病醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)，所有患者均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書(shū)。

1.2 研究方法及觀察指標(biāo)

采集所有患者的血清，保存于-80℃冰箱。采用全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)AFP、DCP和AFP-L3水平，儀器自動(dòng)計(jì)算AFP-L3占AFP的比率，即AFP-L3%。分別比較慢性肝炎組、原發(fā)性膽汁性肝硬化組和HCC組患者的AFP、DCP水平及AFP-L3%。

分別以 AFP≥7 ng/ml、DCP≥40 ng/ml和 AFPL 3%≥10%為陽(yáng)性；聯(lián)合診斷HCC時(shí)，以上任意一個(gè)指標(biāo)陽(yáng)性即判斷為陽(yáng)性。以臨床診斷結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性+假陰性）例數(shù)×100%，特異度=真陰性例數(shù)/（真陰性+假陽(yáng)性）例數(shù)×100%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性+假陽(yáng)性）例數(shù)×100%，陰性預(yù)測(cè)值=真陰性例數(shù)/（真陰性+假陰性）例數(shù)×100%。

根據(jù)血清AFP水平，將145例HCC患者分為3個(gè)亞組：陰性組（0≤AFP＜7 ng/ml）、陽(yáng)性低濃度組（7 ng/ml≤AFP＜ 400 ng/ml）和陽(yáng)性高濃度組（AFP≥400 ng/ml）。比較3個(gè)亞組HCC患者的AFP-L3%和DCP陽(yáng)性率。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組-間比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用LSD-t檢驗(yàn)或單因素方差分析；采用Kappa檢驗(yàn)進(jìn)行一致性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 AFP、DCP水平及AFP-L 3%的比較

慢性肝炎組、肝硬化組及HCC組患者的AFP、DCP水平及AFP-L3%比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。HCC組患者的AFP、DCP水平及AFPL3%均高于慢性肝炎組和肝硬化組患者，肝硬化組患者的DCP水平和AFP-L3%均高于慢性肝炎組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1 不同組別肝病患者AFP、DCP水平及AFP-L 3%的比較（±s）

表1 不同組別肝病患者AFP、DCP水平及AFP-L 3%的比較（±s）

注：a與慢性肝炎組比較，P＜0.05；b與肝硬化組比較，P＜0.05

組別慢性肝炎組（n=86）肝硬化組（n=133）HCC組（n=145）F值P值A(chǔ)FP（ng/ml）60.76±30.53 70.34±30.72 507.12±100.74a b 1835.786 0.000 DCP（ng/ml）18.25±5.68 39.44±14.73a 209.17±60.43a b 903.447 0.000 AFP-L3%（%）6.02±2.41 7.63±3.67a 14.47±5.64a b 131.877 0.000

2.2 AFP、DCP及AFP-L 3%單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)HCC的診斷價(jià)值

與AFP、DCP及AFP-L3%單獨(dú)診斷比較，AFP、DCP及AFP-L3%聯(lián)合診斷HCC的靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)較高。分別將幾種診斷方法與臨床診斷結(jié)果進(jìn)行一致性檢驗(yàn)，結(jié)果顯示，聯(lián)合診斷的Kappa值最高。（表2）

表2 AFP、DCP、AFP-L 3%單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)HCC的診斷價(jià)值

2.3 不同AFP濃度HCC患者AFP-L 3%和DCP陽(yáng)性率的比較

陰性組、陽(yáng)性低濃度組和陽(yáng)性高濃度組HCC患者分別為63例、40例和42例。陽(yáng)性低濃度組和陽(yáng)性高濃度組患者的AFP-L3%和DCP陽(yáng)性率均高于陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。陽(yáng)性低濃度組和陽(yáng)性高濃度組患者的AFP-L3%和DCP陽(yáng)性率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表3）

表3 不同AFP濃度HCC患者AFP-L 3%和DCP陽(yáng)性率的比較[n（%）]

3 討論

HCC的早期診斷與患者的長(zhǎng)期生存密切相關(guān)，早期發(fā)現(xiàn)和治療可顯著延長(zhǎng)患者的生存期。AFP是診斷HCC最主要的血清學(xué)標(biāo)志物，有研究顯示，AFP診斷HCC的靈敏度僅為39%～65%，特異度為76%～91%[7]。DCP于1984年首次被描述為腫瘤標(biāo)志物，是維生素K缺乏或拮抗劑-Ⅱ誘導(dǎo)產(chǎn)生的蛋白，是一種在HCC中升高的異常凝血酶原，但在慢性活動(dòng)性肝炎和轉(zhuǎn)移性肝癌中并不升高。

本研究結(jié)果顯示，HCC組患者的AFP、DCP水平及AFP-L3%均高于慢性肝炎組和肝硬化組患者，肝硬化組患者的DCP水平和AFP-L3%均高于慢性肝炎組患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。表明慢性肝炎和原發(fā)性膽汁性肝硬化患者的血清AFP-L3%較低，而HCC患者的血清AFPL3%較高，提示AFP-L3檢測(cè)有助于良惡性肝病的鑒別診斷，且不受AFP水平的影響。研究表明，HCC患者血清AFP-L3水平升高可較影像學(xué)檢查陽(yáng)性提前幾個(gè)月甚至幾年出現(xiàn)[8-9]。

研究表明，DCP與AFP并無(wú)相關(guān)性，二者對(duì)HCC的診斷具有互補(bǔ)性，聯(lián)合診斷時(shí)，其靈敏度和特異度均高于單獨(dú)診斷的結(jié)果[10-11]。本研究結(jié)果顯示，與AFP、DCP及AFP-L3%單獨(dú)診斷比較，AFP、DCP及AFP-L3%聯(lián)合診斷HCC的靈敏度、陰性預(yù)測(cè)值和約登指數(shù)較高。李魯平等[12]研究發(fā)現(xiàn)，血清AFP水平為5～40 ng/ml的HCC患者，AFP-L3%陽(yáng)性率為46.2%，AFP-L3檢測(cè)可以提高低濃度AFP的HCC患者的診斷率。Carr等[13]研究發(fā)現(xiàn)，AFP、DCP、AFP-L3%單獨(dú)診斷HCC的靈敏度分別為67.7%、72.7%和61.6%，AFP、DCP及AFP-L3%聯(lián)合診斷HCC的靈敏度可提高至85.9%。

本研究結(jié)果顯示，陽(yáng)性低濃度組和陽(yáng)性高濃度組患者的AFP-L3%和DCP陽(yáng)性率均高于陰性組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。提示隨著AFP濃度的升高，AFP-L3%和DCP陽(yáng)性率也逐漸升高。對(duì)于AFP陰性的HCC患者，AFP-L3%和DCP也有較高的陽(yáng)性率，可在一定程度上減少AFP陰性HCC的漏檢率。秦文燕等[14]研究認(rèn)為，AFP-L3%隨著AFP水平的升高逐漸升高。Toyoda等[15]研究發(fā)現(xiàn)，在Ⅰ～Ⅳ期HCC患者中，AFP、AFP-L3%、DCP均隨臨床分期逐漸升高，但DCP升高更為顯著。

HCC患者的血清AFP和DCP均可用于監(jiān)測(cè)治療效果及預(yù)測(cè)腫瘤的復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。DCP陽(yáng)性患者肝內(nèi)轉(zhuǎn)移、門(mén)靜脈侵襲和肝靜脈血栓形成以及包膜浸潤(rùn)的發(fā)生率較高。目前，國(guó)內(nèi)外多個(gè)肝病協(xié)會(huì)均已將AFP、AFP-L3%和DCP列為HCC診斷的重要指標(biāo)[4,16-17]。

AFP、DCP及AFP-L3%聯(lián)合檢測(cè)能提高HCC的診斷效能度，可有效避免低濃度AFP的HCC患者的漏診，適合臨床廣泛開(kāi)展。