注射用前列地爾不同水分測定方法的對比研究

陳青連 雷小平 馮雅

摘 要 目的 ： 建立以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑的費休法測定注射用前列地爾的水分。方法：以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）混合溶液為溶劑，分別采用直接加樣法和溶解轉移法比較方法的合理性。結果：以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，溶解轉移法測得的樣品水分為1.3%，RSD為10.0%；日間精密度良好，RSD為4.8%。 結論：本法用于注射用前列地爾的水分測定具有較好的準確性和精密度。

關鍵詞 注射用前列地爾 費休法 水分測定

中圖分類號：R972.4； R927.1 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2019）07-0071-03

Comparison of different methods for the moisture determination in prostaglandil for injection

CHEN Qinglian*， LEI Xiaoping， FENG Ya

（ Hangzhou Ausia Biological Technology Co.， Ltd.， Hangzhou 310018， China）

ABSTRACT Objective： To establish a Fischers method for the moisture determination in alprostadil for injection with formamide-methanol （1：1） as a solvent. Methods： The rationality of the method was compared between direct sample-adding method and dissolution transfer method. Results： Moisture content in the sample was 1.3% with RSD 10% by dissolution transfer method and its inter-day precision was good with RSD 4.8%. Conclusion： This method for the moisture determination in alprostadil for injection has good accuracy and precision.

KEY WORDS alprostadil injection； Fischers method； moisture determination

前列地爾（alprostadil）是一種療效確切的高生物活性血管擴張藥，屬于天然前列腺素（PGE1）類[1]，主要用于老年心血管疾病的治療，對冠心病、動脈硬化、心肌梗死等疾病有一定的治療作用[2]。

費休法是利用碘在吡啶和甲醇溶液中氧化二氧化硫時需要定量水分參加反應的原理測定樣品中的水分含量，適用于在費休試液中溶解且不與費休試液發生生成水的化學反應的藥物及制劑的水分測定。注射用前列地爾質量標準已收載于《中國藥典》2015年版二部[3]，其水分測定法為第一法費休法下的容量滴定法[3]103-105。

測定樣品中的水分時，樣品必須完全溶解在卡爾·費休試劑中。如果樣品未完全溶解，會形成乳濁液，導致部分水分無法進行滴定反應，測得的水分含量偏低[4]。

由于注射用前列地爾凍干粉針劑中添加賦形劑右旋糖酐40，不溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮等[3]170，故選擇一定比例的甲酰胺-甲醇作為助溶劑進行水分測定[5]。

小規格凍干針劑水分測定一直以來是檢驗人員難以處理的問題，主要原因在于取樣難，由于每瓶裝量僅為幾毫克，傳統方法均需取樣數瓶至數十瓶，在取樣過程中無法防止樣品急劇吸潮。同一樣品在不同實驗室不同人員進行測定時數值相差很大。當規格小加之凍干真空壓塞，取樣更難，在破真空時由于大量空氣進入瓶內，樣品易吸潮并黏結于瓶壁，從而需要進一步增加取樣瓶數和取樣時間。這樣所測得的樣品水分完全失真[6]。注射用前列地爾規格為100 mg，測定時平均裝量約為20 mg，存在裝量較小，且極易吸潮，采用直接加樣法測定水分難以得到準確的結果，故考慮溶解轉移法進行測定。

本研究選擇分別以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，分別采用直接加樣法和溶解轉移法測定水分。該方法測定注射用前列地爾水分未見報道，通過分析兩種方法測定結果的分析比較，為該品種建立更準確的水分測定方法提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器

V30水分滴定儀（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），BS210S電子天平（賽多利斯（上海）貿易有限公司）。

1.1.2 試藥

注射用前列地爾（杭州澳亞生物技術有限公司自制，批號17012023，規格：100 mg）；費休試液（天津市四友精細化學品有限公司）；無水甲醇、甲酰胺（分析純，上海凌峰化學試劑有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 直接加樣法

取注射用前列地爾5瓶，去除鋁蓋后，將其搗碎，采用減量法，精密稱定其重量，倒入滴定杯中，分別以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）混合溶液為溶劑，用費休試液滴定至終點，各重復測定10次。

1.2.2 溶解轉移法

2 結果

2.1 甲酰胺-甲醇比例選擇

取注射用前列地爾1瓶，按1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2和9∶1比例，用移液管分別加入甲酰胺、甲醇試劑，搖勻，觀察溶液是否澄清。結果表明，當甲酰胺-甲醇的比例達到5∶5及以上時，溶液為澄清，故選擇甲酰胺-甲醇1∶1為溶劑進行下一步試驗。

2.2 樣品水分測定

直接加樣法和溶解轉移法水分測定數據見表1。

分別對直接加樣法和溶解轉移法溶解轉移法、甲醇溶劑法和甲酰胺-甲醇（1∶1）溶劑法的水分數據采用Minitab軟件進行了雙樣本t值檢驗分析[7-8]（表2）。采用直接加樣法，用甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）兩種溶劑測定的水分差值為0.365 9%，t值為-3.24，顯著性P值為0.005；采用溶解轉移法，用甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）兩種溶劑測定的水分差值為0.234 2%，t值為-4.26，顯著性P值為0.001。以甲醇為溶劑，采用直接加樣法和溶解轉移法測定的水分差值為0.483 1%，t值為6.47，顯著性P值為0.000；以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，采用直接加樣法和溶解轉移法測定的水分差值為0.614 8%，t值為6.08，顯著性P值為0.000（表2）。使用相同加樣方法、采用不同溶劑檢驗或使用相同溶劑、采用不同加樣方法，其兩組檢測結果顯著性P值均小于0.01，說明使用不同溶劑檢測或不同加樣方法，測定結果之間均有顯著性差異。

2.3 數據分析

通過上述數據可知，甲醇溶劑法測得注射用前列地爾的水分小于甲酰胺-甲醇溶劑法，認為是樣品未完全溶解，導致水分未完全釋放至溶液中，無法進行滴定反應，使測得結果偏低。直接加樣法測得的水分大于溶解轉移法，判斷樣品具有引濕性，認為是去塞后，樣品與空氣直接接觸，吸收了空氣中的水分所引起的差異，且溶解轉移法測定的水分差異較小。綜上所述，選擇以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑采用溶解轉移法測定為宜。為了進一步證實該方法的合理性，考察該方法的日間精密度。

2.4 日間精密度實驗

以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，按溶解轉移法，取注射用前列地爾每天5瓶測定水分，連續5 d，所測定的水分含量分別為1.338 0%、1.228 3%、1.197 3%、1.191 7%、1.228 9%，平均值為1.2%，RSD為4.8%。表明不同時間按本法測定注射用前列地爾水分含量的重復性和日間精密度良好。

3 討論

卡爾·費休容量法最常用的滴定溶劑是甲醇，而注射用前列地爾不溶于甲醇，樣品未完全溶解，水分沒有完全參與反應，測得的水分含量偏低，且溶液中的不溶顆粒，在攪拌過程中更易對儀器電極帶來磨損，故選擇甲酰胺為助溶劑，與甲醇按1∶1混合作為溶劑。注射用前列地爾存在裝量較小，且極易吸潮，采用直接加樣法測定水分難以得到準確的結果，故考慮溶解轉移法進行測定。為確定本法的合理性，進行了日間精密度實驗，結果中間精密度良好。以甲酰胺-甲醇（1∶1）為溶劑，溶解轉移法測定注射用前列地爾的水分具有較好的準確性，且精密度良好，且更易于操作，利于水分測定。用卡爾·費休法測定樣品中的水分時，必需注意環境的溫濕度，濕度過大對檢測結果影響極大，使檢測結果偏大，一般溫度維持在25 ℃左右，相對濕度控制在50%以下比較適宜。

參考文獻

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[3] 國家藥典委員會 . 中華人民共和國藥典2015年版（二部）[M]. 北京 ： 中國醫藥科技出版社， 2015： 849.

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