抗禽流感病毒高抗體水平種雞群的動態免疫效果監測及分析

仇薪鑫，李 龍，田格如

(楊凌職業技術學院，陜西 楊凌 712100)

禽流感(Avian Influenza, AI)是一種高度接觸性禽類傳染病，近幾年，高致病性禽流感病毒感染人的情況愈發嚴重，對人類健康和公共衛生安全構成了嚴重威脅。據不完全統計，僅在2017年，中國人感染H7N9禽流感發病人數達589人，死亡人數約250人。我國養殖業目前預防禽流感的主要措施依然是強制進行疫苗免疫，農業農村部要求規?；B殖企業，應常年保持90%以上的群體免疫密度，并且抗體合格率達70%以上。

抗體水平的檢測能夠有效反映畜禽群體的總體抗體水平，有助于我們評價其免疫效果，為合理指導畜禽群體的免疫過程提供基礎。疫病抗體水平的定期、連續監測可以幫助我們有效地掌握其變化規律，為不斷改進和優化免疫程序提供支撐，為評估該病的發生風險、摸清該病的流行現狀和評價其疫苗免疫質量提供依據，更重要的是可以幫助養殖企業合理控制免疫成本，保證生產過程，提高效益。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗對象 陜西省某規?；N雞場A5、B5兩棟舍的雞群，品種是德國薩索肉雞。

1.1.2 試劑材料 禽流感病毒H9亞型和H5亞型血凝抑制試驗標準抗原(青島易邦生物技術有限公司)，H9抗原生產批號：201502，H5抗原生產批號：201507；陽性血清(中國哈爾濱維科生物技術開發公司)。

PBS緩沖液(pH7.2，0.01 mol·L-1)，3.8%檸檬酸鈉抗凝劑，均為自制。

1.2 方法

1.2.1 抽樣 A5舍2 000只雞、B5舍1 980只雞，在保證正常生產的情況下，計劃從6周齡開始，每兩周分別從兩棟雞舍隨機采集血清樣品50份。

1.2.2 微量法血凝試驗(HA)與血凝抑制試驗(HI) 依據《GB/T 16550-2008 新城疫診斷技術》中所規定的血清學試驗診斷方法。

1.2.3 免疫程序 免疫程序見表3。

2 結果

開產日齡150 d左右，將開產前的免疫階段定為基礎免疫階段。

2.1 基礎免疫階段抗體水平檢測結果

表2、3結果顯示，經過基礎免疫，在開產時兩組雞群AI H5平均抗體水平能夠達到11 log2，AI H9能夠達到12 log2～13 log2。在以HI效價≥4 log2為合格標準的情況下，雞群AIH5、AI H9抗體水平整體合格率為100%?；A免疫過程中，兩組雞群AIH5、AI H9平均抗體水平都呈不斷上升趨勢，變化基本同步。說明在此免疫程序下，雞群在開產時能夠達到較高AIH5、AI H9抗體水平，免疫效果較好。

2.2 生產階段抗體水平檢測結果

注：140日齡后每兩個月注射一次AI H9滅活疫苗，0.5 mL·只-1；每三個月注射一次AI H5滅活疫苗，0.5 mL·只-1。

表2 基礎免疫階段AIH5抗體水平檢測結果

表3 基礎免疫階段AIH9抗體水平檢測結果

表4 生產階段AIH5抗體水平檢測結果

表5 生產階段AIH9抗體水平檢測結果

表4、表5結果顯示，整個生產階段兩組雞群AI H5平均抗體水平基本保持在11 log2～12 log2，總體HI效價在8 log2～15 log2之間；AI H9平均抗體水平維持在12 log2～14 log2，整體抗體水平主要在10 log2～16 log2之間，免疫效果較好。在產蛋高峰期時，AI H5的抗體水平能夠達到12 log2，生產后期平均抗體水平呈下降趨勢，AI H9平均抗體水平主要維持在13 log2～14 log2，說明在建立起高抗體水平雞群后，經過每三個月免疫一次AI H5滅活疫苗，兩個月免疫一次AI H9滅活苗的強化免疫，能夠使雞群在全部生產階段維持較高的抗體水平，有效抵御AI H5、AI H9病毒的侵襲，保證了生產效益。

3 討論

一般在疫病防控工作中，基于我國針對重大動物疫病所提倡的“應免盡免，不留空當”的理論依據，對于規?；B殖的雞群，主要通過科學地提高免疫頻次和免疫比例，從而使雞群獲得較好的免疫水平。由于行業內對于此類重大動物疫病無廣泛認可的保護性抗體水平標準，當前階段，我們主要以雞群群體免疫合格率和抗體水平的均勻度為評價指標。當雞群群體免疫合格率高，抗體水平監測結果均勻時，表明雞群群體免疫力較高，雞群抵御疫病的能力強，免疫效果較好，特異性疫病爆發和流行的幾率較??；若相反，則雞群群體免疫力低下，雞群抵御疫病的能力較弱，免疫效果較差，相關特異性疫病發生和流行的幾率較大。同樣情況下，如果特異性抗體水平維持時間越長，說明其免疫質量越好，反之則越差[8]。

由于生產過程中雞群不斷淘汰，生產后期樣本數量有所下降，但基本不影響其免疫效果的評估。在不斷跟蹤檢測其禽流感病毒抗體水平動態變化的過程中，發現通過基礎免疫階段，在雞群開產時，AI H5的平均抗體水平基本達到11 log2，AI H9的平均抗體水平基本達到13 log2。主要生產階段，通過不斷強化免疫，能夠使雞群一直保持高AIV抗體水平，AI H5平均抗體水平維持在11 log2～12 log2，AI H9平均抗體水平維持在12 log2～14 log2。說明此免疫程序下，能夠有效建立產生抗禽流感病毒的高抗體水平種雞群，生產階段呈均勻、整齊的群體免疫水平，免疫質量較好，能夠有效抵御這兩種病毒的侵襲，很好地保證生產過程。