不同劑量阿托伐他汀對急性冠脈綜合征患者HO-1/HbCO系統、血清sOX40L水平影響及其與炎性因子的相關性分析

張馳，王麗岳，任浩進，龔凡，朱曉剛，徐超

隨著人們生活水平以及生活飲食習慣的改變，我國冠心病的發病率和病死率正逐年增加，其中急性冠狀動脈綜合征(ACS)是冠心病的一種急癥，臨床分為心肌梗死和不穩定型心絞痛，嚴重威脅患者的生命健康[1]。研究顯示，動脈粥樣硬化(AS)是引發ACS的重要病理基礎，其斑塊破裂導致血栓的形成，進而阻塞冠狀動脈管腔，誘發ACS的發生[2]。炎性免疫反應在AS的形成、發展、不穩定性斑塊破裂以及形成血栓等階段起著重要的作用，又是引發斑塊破裂的重要因素。而炎性免疫反應的發生與體內T細胞密切相關，同時機體內存在多種配體可以對T細胞信號通路進行激活，其中可溶性OX40L(sOX40L)是較為重要的一種，主要于巨噬細胞、淋巴細胞等活化的抗原呈遞細胞表面進行表達[3]。另外，白細胞介素-6(IL-6)是一種由單核巨噬細胞合成的細胞因子，其與ACS的起始、發展存在較為密切關系。C反應蛋白(CRP)是一種炎性反應急性期反應蛋白，與ACS的發生關系密切，可以為ACS患者的病情以及預后提供重要的診斷信息[4]。HO-1是一種機體重要的可以分解血紅素形成鐵離子、膽綠素以及一氧化碳的誘導型抗氧化酶類物質。HO-1/HbCO系統是人體內部重要的內源性防御系統，具有較好的抗氧化、抗炎作用[5]。而阿托伐他汀除具有典型的降脂功效以外，還具有抗炎、抗氧化、改善內皮細胞以及增強HO-1表達的作用，對動脈粥樣硬化具有一定的防治功效。現觀察不同劑量阿托伐他汀對ACS患者HO-1/HbCO系統、sOX40L水平以及相關炎性細胞因子的影響，分析HO-1/HbCO系統、sOX40L水平與相關炎性細胞因子的相關性，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年5月—2018年5月武漢科技大學附屬普仁醫院心內科收治ACS患者96例作為研究對象，按照隨機數字法分為觀察組和對照組，各48例。對照組給予常規劑量阿托伐他汀，觀察組給予大劑量阿托伐他汀，2組患者在性別、年齡、病程、BMI、疾病類型以及合并癥等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，患者及家屬知情同意并簽署知情同議書。

1.2 選擇標準 (1)診斷標準：① 急性心肌梗死診斷標準參考WHO制定的急性心肌梗死(AMI)診斷標準的相關規定[6]；②不穩定型心絞痛診斷標準參考心血管病中華醫學會分會關于不穩定性心絞痛的診斷標準[7]。(2)納入標準：①符合上述診斷標準者；②入院前2月內，未服用他汀類降脂藥物者。(3)排除標準：①合并有嚴重的肝腎功能不全者；②合并有全身性免疫疾病、風濕性疾病、結締組織病以及周圍血管性疾病者；③近2周經過手術治療或者嚴重感染患者；④對他汀類藥物過敏者；⑤合并有嚴重的心包炎、主動脈夾層、心源性休克以及心力衰竭者；⑥合并有系統性紅斑狼瘡以及風濕性關節炎等系統性炎性疾病者；⑦依從性差，中途退出者。

表1 2組患者基線資料比較

1.3 治療方法 2組患者均給予ACEI類、硝酸酯類、β受體阻滯劑、鈣通道阻滯劑、溶栓劑以及抗凝劑等藥物進行常規基礎治療。對照組患者另加阿托伐他汀20 mg/d，觀察組患者另加用阿托伐他汀40 mg/d，均睡前口服， 1次/d，治療周期均為1個月。

1.4 觀察指標與方法 于治療前以及治療后5 d清晨抽取患者空腹肘靜脈血5 ml，離心機[Ortho BioVue；強生(上海)醫療器材有限公司]3 000 r/min離心10 min取血清，冰箱-75℃條件下保存，待測。

1.4.1 血清HO-1/HbCO系統、sOX40L檢測：(1)血清HO-1水平測定。采用酶聯免疫吸附法進行測定，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司，操作方法嚴格按照說明書執行。(2)血清碳氧血紅蛋白(HbCO)水平測定。選用具塞試管盛裝0.02 mol/L Tris的稀釋液15 ml，再向其中加入血清10 μl，充分混合，加入連二亞硫酸鈉60 mg混勻，置于室溫條件下10 min左右，選用紫外分光光度計(島津，UV2450型)對其進行400～500 nm波長光譜掃描，記錄420 nm、430 nm處吸光度，通過HbCO%=[0.94(A420/A430)-0.69]×100%進行血清樣品碳氧血紅蛋白濃度的計算[6]。(3)血清sOX40L測定。采用酶聯免疫吸附法，試劑盒購自上海晶抗生物工程有限公司，操作方法嚴格按照說明書執行。

1.4.2 血清炎性因子測定：CRP、IL-6采用酶聯免疫吸附法，試劑盒購于上海滬鼎生物科技有限公司。

1.4.3 血脂水平測定：血清三酰甘油(TG)和總膽固醇(TC)采用酶法測定，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平采用磷鎢沉淀法測定，通過Friedwald公式對低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平進行計算。

2 結 果

2.1 2組患者HO-1/HbCO系統、血清sOX40L比較 治療前2組患者HO-1、HbCO、sOX40L水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。治療后，2組患者的HO-1、HbCO水平均明顯升高，sOX40L水平均降低。且觀察組患者上述指標改善較對照組更為顯著(P<0.01)，見表2。

2.2 2組患者血清CRP、IL-6水平比較 治療前2組患者 CRP以及IL-6水平比較差異無統計學意義(P>0.05)。治療后， 2組均較治療前明顯降低，且觀察組降低較對照組更為顯著(P<0.01)，見表3。

表3 2組患者治療前后血清CRP、IL-6水平比較

2.3 2組患者血脂水平比較 治療前，2組患者血脂水平比較差異無統計學意義(P>0.05)；治療后，2組患者血清TC、LDL-C水平均明顯降低，且觀察組患者降低較對照組更為顯著(P<0.01)。2組患者治療前后TG、HDL-C水平比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表4。

2.4 相關性分析 HO-1、HbCO水平與CRP、IL-6水平呈負相關， sOX40L水平與CRP、IL-6水平呈正相關，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表5。

3 討 論

目前臨床上對于ACS的治療應用阿托伐他汀劑量，較為常用的為10 mg/d、20 mg/d，有少數患者給予80 mg/d進行治療[8]。本研究在20 mg/d常規治療的基礎上，研究40 mg/d劑量對于ACS患者的影響，并分析治療后患者的HO-1/HbCO系統、血漿sOX40L水平與CRP、IL-6的相關性。CRP是一種半衰期為19 h，能與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖結合的急性期炎性標志物，主要是通過IL-6等炎性因子的刺激，經由人體肝臟合成分泌。正常情況下，人體內其血清濃度相對較低，并與冠心病病情的嚴重程度呈正相關[9]。IL-6也是一種與冠心病發展密切相關的急性期反應蛋白，源起于經過活化的單核巨噬細胞，另外其還是一種具有凝血功能的促炎性細胞因子，對被激活的巨噬細胞具有一定的浸潤分化促進作用，可以增強相關細胞因子以及黏附因子的表達，一定程度增強機體炎性反應，進而加劇ACS的病情惡化[10-12]。HO-1是一種廣泛分布于組織中網狀內皮細胞以及單個核細胞的誘導型蛋白，人體在受到重金屬、缺氧、氧化應激狀態以及細胞因子等的刺激下，可誘導細胞內的HO-1活性增強，從而起到炎性反應抑制以及抗氧化作用，對血管內皮細胞產生保護作用。另外，HO-1還可以通過對細胞生長進行調節，從而致使內皮細胞凋亡量減少，穩定機體的內皮系統，抑制血管平滑肌增殖，促進其凋亡，減輕血管的不良重構[13]。HO-1誘導產生的HbCO具有血管直接擴張作用。HbCO可以通過抑制血管、舒張血管進而降低血壓和維持血液灌注，在ACS患者缺氧條件下，調節冠狀動脈血流量。另外，HbCO作為一種重要的內皮依賴性血管舒張因子，可以對血管舒張功能進行調節，抑制血管平滑肌增殖，并對NO的心肌保護作用起到增強作用[14]。

表2 2組患者治療前后血清HO-1、HbCO、sOX40L水平比較

表4 2組患者治療前后血脂水平比較

表5 HO-1/HbCO系統、血清sOX40L水平與CRP、IL-6相關性分析

本研究結果提示，40 mg劑量的阿托伐他汀可以更有效地改善ACS患者的炎性反應，同時增強HO-1/HbCO系統能力。這是由于阿托伐他汀是一種HMG-CoA還原酶抑制劑，可增強LDL基因受體的表達，抑制體內膽固醇的合成，減少肝臟對于LDL-C的合成分泌[15-17]。多項研究顯示,機體血脂水平升高,可以增加冠心病的發生率以及加重病情,是ACS的發病以及發展的重要危險因素之一[18]。其還可以加劇人體對于異戊二烯類物質的消耗，增加HbCO含量，一定程度抑制氧化應激反應的發生，可以對血管內皮功能產生有效改善[19]；阿托伐他汀還可以對OX40/OX40L信號通路表達產生抑制作用，從而達到降低血管細胞對于組織因子、金屬基質蛋白以及黏附因子等炎性因子的表達，抑制機體炎性反應以及免疫反應的發生，達到動脈粥樣硬化斑塊穩定的效果，對ACS的病發起到預防作用[20]。由于IL-6促炎因子對于CRP的形成具有增強作用，兩者相關性好，另外，sOX40L與機體炎性反應關系密切，CRP、IL-6等炎性因子可通過聚集浸潤或者間接性地產生OX40L等細胞因子，激活信號通路，故而sOX40L與CRP、IL-6等炎性因子呈現正相關，其之間的這種協同性對于ACS疾病也具有一定的預測價值[21]。由于阿托伐他汀具有改善內皮細胞功能的作用，可以增強內皮細胞對于HO-1以及HbCO的分泌，起到擴張血管、抑制調節血流量、抑制氧化應激狀態、減輕炎性反應的發生、保護心肌細胞的作用，故其治療后血清HO-1、HbCO水平升高，與CRP、IL-6呈負相關。

綜上所述，阿托伐他汀治療的急性冠狀動脈綜合征患者，其血清CRP、IL-6水平與sOX40L水平呈正相關，與HO-1以及HbCO水平呈現負相關，具有一定的臨床應用價值。

利益沖突：無

作者貢獻聲明

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