免疫組化法檢測(cè)NSCLC患者EGFR突變的相關(guān)研究

張莉 戴偉平 焦丹 李冰 胡艷飛 王俊偉 高娜 安紅霞

（酒泉市人民醫(yī)院 甘肅 酒泉 735000）

肺癌為當(dāng)今世界發(fā)病率與病死率最高的疾病之一，已成為威脅人類健康的第一殺手[1]。根據(jù)肺癌的組織結(jié)構(gòu)分為小細(xì)胞肺癌與非小細(xì)胞肺癌，非小細(xì)胞肺癌常合并有表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）基因的突變，對(duì)于該類患者表皮生長(zhǎng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑對(duì)其效果顯著，是一種重要的治療手段[2]。本研究分析免疫組化法在非小細(xì)胞肺癌患者EGFR的突變檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值；現(xiàn)報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇于2017年1月-2018年10月就診于我院的59例非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的手術(shù)或組織活檢標(biāo)本，患者在納入研究前未接受相關(guān)表皮生長(zhǎng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑治療，收集并統(tǒng)計(jì)患者的相關(guān)信息。

1.2 方法

分別將59例非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者的活檢標(biāo)本進(jìn)行FISH檢測(cè)和免疫組化染色檢測(cè)。FISH法檢測(cè)驗(yàn)證的59例是否存在EGFR外顯子突變。使用抗E746_A750del突變單克隆兔抗體（6B6）和抗L858R突變單克隆兔抗體（43B2）[3]進(jìn)行免疫組化檢測(cè)。

1.3 染色評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)

選擇腫瘤細(xì)胞的胞漿或胞膜為基準(zhǔn)，低倍鏡下評(píng)估染色的強(qiáng)度以及染色的細(xì)胞百分比，之后隨機(jī)選擇高倍鏡視野10個(gè)，按照染色強(qiáng)度的不同和顯色細(xì)胞的百分比分為四個(gè)等級(jí)。其中定義0級(jí)為陰性即EGFR為野生型，1+、2+、3+為陽(yáng)性結(jié)果即EGFR為突變型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS18.0進(jìn)行分析，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示計(jì)量資料，采用t檢驗(yàn)；用[n(%)]%表示計(jì)數(shù)資料，行χ2檢驗(yàn)，若P＜0.05，則差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 免疫組化染色陽(yáng)性患者的不同臨床病理特征

免疫組顯示，59例標(biāo)本中有33例為陽(yáng)性，不同臨床特征的患者免疫組化的染色結(jié)果所占的比例也有所不同。研究顯示年齡≤63歲、臨床分期為I+Ⅱ期的患者的免疫組化染色陽(yáng)性率較高，而性別和有無(wú)吸煙史以及病理分型對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

表1 不同臨床特征的患者免疫組化染色陽(yáng)性結(jié)果比較

2.2 真實(shí)性與收益評(píng)價(jià)

以FISH法檢測(cè)技術(shù)為金標(biāo)準(zhǔn)，其中將檢測(cè)到EGFR突變的為陽(yáng)性，反之，則為陰性。結(jié)果顯示FISH法檢測(cè)陽(yáng)性36例，陰性23例，免疫組化法檢測(cè)陽(yáng)性33例，陰性26例。本研究顯示免疫組化法檢測(cè)NSCLC患者EGFR的突變中，靈敏度為38.9%，特異度為17.4%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為42.4%，陰性預(yù)測(cè)值為15.4%。具體結(jié)果見表2

表2 不同方法檢測(cè)非小細(xì)胞肺癌中EGFR基因的結(jié)果比較（n=59）

3.討論

分子靶向治療近年來(lái)大大提高了癌癥治療的臨床療效，改善了患者的預(yù)后，以腫瘤驅(qū)動(dòng)基因?yàn)榘悬c(diǎn)成為了治療腫瘤個(gè)體化治療的又一個(gè)新方向。在肺癌患者中存在有表皮生長(zhǎng)因子受體（EGFR）突變的患者，此類患者對(duì)于表皮生長(zhǎng)因子受體-酪氨酸激酶抑制劑療效較好[4]。因此基因檢測(cè)在非小細(xì)胞肺癌的診治中尤為重要。然而，并不能很好的實(shí)現(xiàn)常規(guī)化，一項(xiàng)價(jià)格低廉檢測(cè)簡(jiǎn)便的技術(shù)值得探究[5]。免疫組化廣泛運(yùn)用于臨床，是一種檢測(cè)分子免疫標(biāo)記物的技術(shù)。本研究以FISH法檢測(cè)技術(shù)為金標(biāo)準(zhǔn)，探究免疫組化法的對(duì)于EGFR突變基因檢測(cè)的真實(shí)性和收益。結(jié)果顯示，免疫組化法染色陽(yáng)性常出現(xiàn)于年齡小于等于63歲，臨床分期為I+Ⅱ期的患者，而與性別、有無(wú)吸煙史、以及病理分型無(wú)較大相關(guān)性。對(duì)其真實(shí)性進(jìn)行評(píng)價(jià)表明該法的靈敏度較低，對(duì)其收益評(píng)價(jià)顯示陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為42.4%，陰性預(yù)測(cè)值為15.4%，結(jié)果不甚滿意。綜上所述，免疫組化法檢測(cè)結(jié)果不夠理想。