某規模化豬場豬繁殖與呼吸綜合征免疫狀態血清學調查

王一東，徐 翡，于阿男，孫有朋，陳現偉，李永洙，韓照清

（臨沂大學農林科學學院，山東 臨沂 276000）

豬藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)，由豬繁殖和呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種接觸性傳染病。以懷孕母豬和仔豬最易感，該病臨床發病特征主要表現為患病豬群臨床上具有病死率高、傳播快、治愈率低的特點；臨床上表現為體溫升高、耳朵發紺，有淤血、呼吸急促而痛苦不堪、倒地抽搐、腹瀉等；母豬懷孕后會發生流產、產死胎等臨床癥狀[1]。該病毒易侵害病豬的免疫系統，導致病豬出現免疫抑制的現象，進一步可誘導其他疾病的繼發及給養豬業帶來難以估量的損失。

該病毒于1987年首次在美國發現[2]，當時中歐的老鼠把體內的動脈炎病毒傳播給了野豬，帶毒野豬被引進至美國，其后它們將體內病毒散播到美洲，在美洲經過多年的變異和進化，形成了不同于歐洲的豬繁殖與呼吸綜合征，即美洲型的豬繁殖與呼吸綜合征。20世紀80年代以來，PRRS陸續在世界各地被發現[3]。1992年該病被動物衛生組織定為B類傳染病。如今2種類型的PRRS已在全世界范圍內流行[4]。1996年我國首次檢測出豬繁殖與呼吸綜合征病毒。當前PRRS在我國各省均有不同程度的暴發[5]。1997年調查出青海省也有本病[6]。2006年以后，我國暴發了豬高致病性藍耳病，給我國養豬業造成了巨大的經濟損失[7]。目前我國流行的PRRS基本上都是美洲型的豬藍耳病。到目前為止，豬繁殖與呼吸綜合征很難清除和凈化[8]。在山東，大多數仔豬在26日齡之后易發此病，而且容易與其他病原混合在一起，從而導致其他嚴重的呼吸道疾病的出現。

PRRS感染性很高，可經多種途徑感染豬[9]，懷孕母豬通過胎盤垂直傳播、豬只之間密切接觸。在豬群中發現患病豬，若不采取積極有效的措施，整個豬群都會感染患病。并且，感染后的仔豬可長期帶毒排毒，對周邊環境持續造成污染，很難徹底被清除。飼養條件越差，越易發生此病。通常，常規消毒與滅活措施足夠滅活用具和設備中豬繁殖與呼吸綜合征病毒。豬群患病后發病率和死亡率都很高[10]，患有PRRS的豬群存在病毒血癥的現象，感染的病豬病毒效價高而抗體效價卻很低，甚至出現臨床癥狀突出卻不能檢測到抗體的現象[11]。因為本病尚未發現有良好的治療措施，因此免疫接種是預防和控制本病的主要措施[12]。早期的接種疫苗雖然在預防該病方面能起到一定的作用,但是豬藍耳病病毒侵害機體的免疫系統而導致免疫失敗，其次滅活疫苗安全性較好,但免疫原性較差,需要接種多次才能刺激機體產生足夠的免疫力，因此疫苗接種用量較大，成本較高，有時還可能導致注射部位出現不良反應。文章通過調查臨沂地區某規模化豬場PRRS感染狀況和PRRS免疫豬場的抗體水平，為臨沂地區規模化豬場控制PRRS提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 樣本采集

從臨沂地區某規模化豬場隨機采集174份樣本，其中公豬25份，母豬（妊娠30～60 d）30份，母豬（妊娠60～90 d）30份、哺乳母豬30份、豬瘟一免前仔豬29份、豬瘟二免前仔豬30份；從豬前腔靜脈采集血液，分離血清后保存備用。

1.2 試劑及儀器

采血器、離心機、ELISA試劑盒、微量移液器、一次性移液器吸頭、酶標儀、去離子水、稀釋液、洗板機等。

1.3 檢測方法

1.3.1 實驗步驟

檢測步驟嚴格按照試劑盒自帶的說明書進行。

1.3.2 結果判定

PRRSV抗體的有無（陽性/陰性）通過計算每個樣品的S/P值判定，若S/P低于0.4，樣品判定為PRRSV抗體陰性；若S/P值大于或等于0.4，樣品判定為PRRSV抗體陽性。

2 結果與分析

從表1和圖1可以看出，公豬豬藍耳病抗體陽性率為44.00%，母豬（妊娠30～60 d）豬藍耳病抗體陽性率為93.00%，母豬（妊娠60～90 d）豬藍耳病抗體陽性率為87.00%，哺乳期母豬豬藍耳病抗體陽性率為86.00%，豬瘟一免前仔豬豬藍耳病抗體陽性率為48.00%，豬瘟二免前仔豬豬藍耳病抗體陽性率為83.00%。其中公豬抗體陽性率最低，母豬（妊娠30～60 d）抗體陽性率最高。

從圖2可以看出，公豬抗體離散度為0.68，抗體平均值為0.4。母豬（妊娠30～60 d）離散度為0.49，抗體平均值1.31。母豬（妊娠60～90 d）離散度為0.65，抗體平均值為1.04。哺乳母豬離散度為0.59，抗體平均值為1.12。豬瘟一免前仔豬離散度為0.88，抗體平均值為0.64。豬瘟二免前仔豬離散度為0.64，抗體平均值為1.11。其中，母豬（妊娠30～60 d）離散度最低，豬瘟一免前仔豬離散度最高。母豬（妊娠30～60 d）抗體平均值最高，公豬抗體平均值最低。

3 討論

豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）可以通過檢測血清中的抗體水平來評估豬群免疫效果。2015年，李記蕾等對從河南地區送檢的豬血清進行檢測，結果表明，未免疫PRRS豬場中，妊娠母豬陽性率為70%，自然感染率（S/P>2.50）為20.00%。 哺乳仔豬陽性率為55.00%，自然感染率（S/P>2.50）為4.00%、保育豬陽性率為47.00%，自然感染率（S/P>2.50）為2.00%、育肥豬陽性率為74.00%[13]。2010年，李國江等對吉林地區進行豬藍耳病血清學檢測，結果顯示，未免疫PRRS豬場中，生產母豬陽性率為63.16%，斷奶仔豬陽性率為48.58%和后備母豬陽性率為75.00%[14]。由此可見，豬藍耳病病毒感染在全國各地區普遍存在。應加強規模化豬場PRRS的免疫工作。當前主要以疫苗免疫為主。

2007年，楊貴樹等對從云南地區送檢的血清進行檢測，其調查結果顯示公豬陽性率為95.24%，母豬陽性率為86.96%，仔豬陽性率為92.30%以及自然感染率（S/P>2.5）為3.38%[15]。2013年，蔣歡等對楚雄地區進行豬藍耳病血清學檢測，其檢測結果顯示公豬陽性率為70.83%，自然感染率（S/P>2.5）為12.50%；同時母豬陽性率為77.22%，自然感染率（S/P>2.5）為14.44%[16]。本次檢測結果通過與前者對比，公豬抗體陽性率偏低，可能的原因是大多數公豬是陰性個體，檢測不到PRRS抗體。而本次檢測結果中公豬血清中出現陽性抗體但陽性率不高，其主要原因可能是公豬感染了本場流行的PRRS弱毒疫苗毒株。2012—2014年，劉承軍等在冀魯豫交接地區進行豬藍耳病血清學檢測，其調查結果顯示這3年母豬抗體合格率為82.80%、80.20%、75.00%；斷奶前仔豬抗體合格率分別為77.70%、71.20%、70.90%；斷奶后仔豬抗體合格率分別為 70.00%、50.90%、28.80%[17]。而本試驗檢測結果中懷孕母豬、哺乳期母豬抗體陽性率保持在80%以上，主要原因是對母豬進行了疫苗免疫，體內產生了抗體。而哺乳母豬陽性率低于懷孕母豬，主要原因可能是與本場的豬藍耳疫苗免疫程序有關（本場母豬豬藍耳免疫為斷奶當天免疫）。同時應引起注意的是本場哺乳期母豬出現了PRRS野毒感染，這可能會造成產房仔豬藍耳病的不穩定，其原因可能是與該場環境及飼養管理等因素有關。豬瘟一免前仔豬（本場豬瘟疫苗28日齡首次免疫）抗體陽性率較低同時離散度最高，表明此階段仔豬存在被PRRSV感染的風險，其主要原因是此階段仔豬在斷奶前期無法獲得足夠的母源抗體，與此同時與哺乳母豬感染豬藍耳病野毒有關。豬瘟二免前仔豬（本場豬瘟63日齡二次免疫）體內抗體比豬瘟一免前仔豬抗體水平高，主要原因是35日齡仔豬免疫豬藍耳病疫苗后，刺激機體免疫系統，產生免疫應答。抗體離散度與豬藍耳病在豬群的穩定性有關。離散度越大，豬藍耳病在豬群中越不穩定。本檢測結果中豬瘟一免前仔豬PRRSV抗體離散度最高，所以豬藍耳病在該豬群中穩定性差，其主要原因是哺乳母豬感染PRRSV野毒導致仔豬獲得母源抗體差異大，同時可能引起部分仔豬PRRSV感染，加大了仔豬豬藍耳抗體的離散度。母豬（妊娠30～60 d）離散度最低，同時抗體平均值最高，表明豬藍耳病毒在該豬群中穩定性及免疫保護最好，其原因是妊娠母豬已多次接種豬藍耳病毒疫苗從而抗體含量多。公豬抗體平均值最低，表明該豬群免疫保護較差，應加強公豬場檢測與防控。

表1 某規模化豬場不同豬群PRRSV抗體檢測結果

圖1 某規模化豬場不同類別豬的PRRS陽性率

圖2 某規模化豬場豬藍耳病離散度與抗體平均值

通過以上分析，得出結論：該豬場對PRRS的免疫比較到位，豬群自然感染率較之偏低，可能與豬場的凈化、飼養管理、免疫程序有關。但是，豬群之間離散度差異大，豬藍耳病在豬群穩定性差，存在免疫失敗的風險，還需加強抗體檢測。總體而言，臨沂地區豬場免疫豬藍耳疫苗較為普遍，但還需加強監測與防控PRRSV野毒的感染。