全自動血液分析儀檢測血小板的影響因素

李可成

[摘要] 血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標之一，也是手術前必要檢查項目，因此血小板檢測結果是否準確，不僅會對出血性疾病患者、血栓性疾病患者的診斷結果產生影響外，還會決定其治療結果。當前，臨床在對血小板組織進行計數時，通常會對多種血液分析設備聯合應用，并以電阻抗法為主要計數原理，然而該方案往往會受多種因素影響，其中又以血小板組織、大血小板組織、小血小板組織以及小紅細胞組織的體積方面表現出差異大的特征，針對此情況，為了保證血小板計數結果的準確性，近年來光學法血小板計數被逐漸應用到檢測活動當中去，效果突出。

[關鍵詞] 全自動血液分析儀;血小板;檢測;影響因素

[中圖分類號] R446.11 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2019）01（a）-0173-02

全自動生化分析儀及醫療設備在我國各級醫院被廣泛使用，并在臨床診斷中提供了快捷準確的結果，使得常規檢測更加方便、快捷。然而在儀器的操作過程中，由于醫務人員沒有深入了解儀器的原理，也沒有熟練掌握儀器的性能，導致全自動生化分析儀的檢測結果存在一定誤差[1]。全自動生化分析儀是應用吸引探針來抽取適量的樣品進行準確的檢驗后送入混勻腔，再混同稀釋液共同流入轉換器，再利用轉換器根據流程檢驗白細胞、血紅蛋白和抗體和血小板的所有參數，對于前兩種指標的分析，將前兩者的溶血劑放入測量室，首先進行稀釋和溶解紅細胞，然后溶血劑會出現10 s的化學反應，在此過程中紅細胞被溶解生成血紅蛋白，并形成紅色甲基血紅蛋白，血細胞沒有任何變化。另外，運用dc細胞流式檢測器檢可以檢驗白細胞的數量及大小，在血紅蛋白的檢驗過程中，可使用光度計分析血蛋白濃度。在后兩者指標的檢測中，將檢驗后的成分從測量室轉移到轉換器中，且大小和數量紅血球為主計算，運用流式細胞儀法可對血小板進行分析[2]。全自動生化分析儀主要應用電容法和光電比色法的原理，而且輕易受多種因素的影響[3]。筆者就自身研究結果作如下綜述。

1? 不同計數標準對血小板指數產生的影響

近年來，血小板專業計數工作中，以全自動血液分析設備進行計數時，其計數方法有電阻抗法和光學法。

1.1? 電阻抗法

當體積大小不等的血細胞通過儀器計數小孔時，引起小孔內、外電流和電壓的變化，形成與血細胞數量相當，體積大小相應的脈沖變化，從而間接地區分出血細胞。但由于其檢測原理的局限性，結果易受多種因素影響，使血小板結果假性增高[4]。

申巖梅[1]對血液分析儀RT-7600血小板計數的準確性研究認為設備能夠對受檢對象身體中的血小板組織以及紅細胞組織等進行明確劃分，然而如果紅細胞組織的計數尚未達到55fl，而以電阻抗法對其展開專業計數，其計數結果通常會異常上升，表明機體紅細胞組織體積不足55fl時，設備會對其計數結果形成干擾因素，而且如果血小板組織直方圖出現不規則性特征，電阻抗法產生的計數值也會呈現出升高跡象[5-7]。而CD-1700血細胞分析設備則強調采用電子阻抗原理，血小板和紅細胞是在同一個檢測系統中通過顆粒大小來加以識別的，血小板與紅細胞測量的信號常有交叉，小紅細胞的脈沖信號可能視為血小板信號造成實驗誤差，而致血小板計數的假性增高[8]。

所以目前使用的血液分析儀，只要是用電阻抗法檢測血小板，都會存在血小板假性增高的問題。

1.2? 光學法

其應用原理是：當激光對紅細胞組織、血小板組織進行充分照射時，紅細胞組織中血紅蛋白成分的濃度偏高，所以對于激光產生的折射指數也會相對偏高，一旦有紅細胞組織的殘骸、大血小板組織、紅細胞組織碎片等出現，盡管其體積表現出相似性特征，然而由于內容物方面存在差異，所以對于激光產的折射指數也會存在巨大差異[9]。

ADVIAl20全自動六分類血細胞分析儀，由于采用了血細胞等滲球形化和兩維激光掃描等檢測原理，基本上排除了對血小板檢測的各種影響因素，從而也達到了血小板檢測快速，王德春[5]對該儀器檢測血小板的性能特點作了系統探討，認為其檢測的重復性及相關性非常好;具有較寬的和很好的線性范圍;攜帶污染僅為0.25%，是目前檢測血小板最為理想的儀器之一。巫小莉[6]利用德國拜耳ADVIA2120二維激光法和美國雅培CD3700電阻法血小板計數進行比較研究認為，在病理情況下的大血小板、小紅細胞，特別是臨界值的血小板計數，電阻法結果差異較大，而二維激光法更接近手工法所檢測結果，計數結果比較準確、可靠。同樣，王曉賢[7]等利用Sysmex XT-4000i對電阻法和光學法檢測血小板進行評估，也認為光學法在對小紅細胞、紅細胞碎片和大血小板各組檢測中，血小板組織的計數結果也會比電阻法更為精確[10-16]。

光學法盡管能降低小紅細胞組織、紅細胞組織碎片和大血小板等因素對血小板計數的影響，但是也存在一定的局限性，當血小板聚集時卻無法消除其對血小板計數的影響[17]。

2? 異常形態血液細胞對血小板計數的影響

2.1? 紅細胞對血小板的影響

如果全自動血細胞分析儀采用電阻抗法檢測時，它根據顆粒的大小來區別細胞，紅細胞和血小板同在一個檢測通道，儀器把2～30 fl范圍的細胞判定為血小板，而將25～250 fl范圍的細胞判定為紅細胞，因而紅細胞與血小板之間存在計數的交叉區域。有研究認為當MCV<70 fl 時或 MCV為70～81.9 fl而RDW>14.5%巨大血小板，小紅細胞可干擾血小板計數[8]。葉長欽[9]等報道實驗MCV<70 fl的紅細胞會引起血小板計數假性增高;而MCV為70～81.9 fl的組中，紅細胞分布寬度（RDW）大于正常者血小板計數假性增高，RDW正常者對結果影響不大。當MCV在65～70 fl之間時，血細胞分析儀與鏡檢法之間血小板計數結果無照著性差異，但當MCV<65 fl時，因有多量的小紅細胞存在，大部份體積很小的紅細胞被計入血小板內，而導致血小板數量假性增高，兩種方法之間具有明顯差異性[18-19]。

地中海貧血是遺傳性血紅蛋白病，屬于是小細胞低色素貧血。張天朗等[11]認為攜帶地貧基因時，紅細胞體積要顯著低于正常對照組。與對照組相比，采前和采后手工計數血小板均要高于自動計數，平均相差達19.3%。這是由于小體積的紅細胞在自動計數時會被誤判為血小板，造成血小板計數假性增高。說明紅細胞的大小與分布度對血小板計數有直接的影響[20-21]。

紅細胞碎裂如果用電阻抗法同樣也會引起血小板的假性增高[22]。

2.2? 血小板聚集

臨床所用抗凝劑以EDTA鹽為主，但是卻可能會有PLT聚集情況出現，以至于對EDTA-K2進行應用時，PLT值假性偏低情況十分普遍，表明對于血小板聚集時，無論是電阻法還是光學法血小板計數都無法得到可靠準確的結果，此時就得依靠傳統的手工復檢來糾正血小板的數量[23-24]。

2.3? 對血小板計數的異常糾正

由于諸多因素對血小板計數的準確性有影響，所以各個不同廠商都在擾儀器上的有不同的改進。日本東亞Sysmex-9000該儀器中含有專業浮動界標裝置，利用機內計算機在血小板的計數范圍內尋找直方圖的最低點，以此定為紅細胞與血小板的量限。同時，通過對血細胞分析設備充分利用，在對機體紅細胞組織以及血小板組織等進行準確計數時，往往要在相同通道條件下，對機體體內顆粒組織的整體體積準確計算、鑒別，以此形式即可獲取到檢測值，雖然還會有小紅細胞組織始終存在，但不會對血小板組織計數結果的測定結果帶來影響[25]。

3? 結語

在全自動血液分析儀飛速發展的今天，傳統的手工法正逐漸容易被檢驗人員淡忘，儀器計數只是一種過篩手段，對于異常標本，必須進行光學法或者手工法復核。

[參考文獻]

[1]? 申巖梅.血液分析儀RT-7600血小板準確性與手工復檢的比較分析[J].延安大學學報：醫學科學版，2012，10（4）：4-5.

[2]? 朱忠勇.應用血液分析儀后復查血片的內容和方法及程序[J].中華醫學檢驗雜志，2008，26（12）：785-787.

[3]? 凌勵，周道銀，惠小陽，等.激光染色法與電電阻抗法檢測血小板方法的比較[J].中華檢驗醫學雜志，2009，27（10）：717-718.

[4]? 李玉芹，楊明清.小紅細胞對不同血細胞分析儀血小板計數結果的影響[J].中國實驗診斷學，2005，9（5）：790-791.

[5]? 王德春，林寶順，鄭合勇，等.ADVIA-120血細胞分析儀測定血小板性能的探討[J].齊魯醫學檢驗，2000，11（4）：88-89.

[6]? 巫小莉，周小棉，鄧穗德，等.二維激光法和電阻法計數血小板的比較研究[J].國際檢驗醫學雜志，2008，28（3）：268-269.

[7]? 王曉賢，劉潔，周永紅.XT-4000i血液分析儀血小板兩種測定方法與血涂片復檢的對比[J].中國實用醫藥，26（7）：106-107.

[8]? 楊繼紅.小紅細胞對血細胞分析儀血小板計數的影響[J].中國醫學創新，2012，28（9）：70-71.

[9]? 葉長欽，羅輝，彭蘭芬，等.小紅細胞對電阻法測定血小板數影響的分析[J].檢驗醫學與臨床，2010，7（6）：539-540.

[10]? 高長杰，陳英.小紅細胞對Sysmex XT-1800全自動血細胞分析儀計數血小板的影響[J].醫學檢驗與臨床，2009，20（3）：70-71.

[11]? 張天朗，尹曉林，向彩良，等.攜帶地中海貧血基因對手工分離血小板的影響[J].華南國防醫學雜志，2009，23（3）：42-44.

[12]? 胡前平.小紅細胞對血小板測定的影響[J].檢驗醫學與臨床，2006，3（9）：480.

[13]? 劉鐵牛，陳要朋.小紅細胞對血小板計數的影響[J].血檢與止血雜志，，2006，12（6）：244.

[14]? 鐘政榮，沈繼龍.小紅細胞對血小板計數結果的影響[J].安徽醫科大學學報，2004，39（5）：384.

[15]? 張黎蕾，張葵，夏永泉，等.裂紅細胞引起假性血小板增多1例[J].臨床輸血與檢驗，2013，13（1）：78-80.

[16]? 張衛云，孫朝暉，符玉文，等.小紅細胞引起Sysmexse-9000測定血小板結果錯誤1例[C]//北京：中國人民解放軍醫學科學技術委員會醫學檢驗專業委員會，2005.

[17]? 黃勝，梁華英，洪流.自動浮動界標對小紅細胞和血小板計數的影響[J].海南醫學，2004，15（7）：118-119.

[18]? 王一杉，梅燕萍，夏永祥.血細胞分析儀進行血小板計數時報警信號分析[J].海南醫學，2004，15（7）：122-119.

[19]? 李玉芹，楊明清.小紅細胞對不同血細胞分析儀血小板計數結果的影響[J].中國實驗診斷學，2005，9（5）：790-791.

[20]? 黃祥麗.血小板直方圖對血小板結果的參考作用[J].檢驗醫學與臨床，2011，8（11）：1361-1362.

[21]? 唐健辰.抗凝劑EDTA-K2致血小板假性減[J].檢驗醫學，2010，25（4）：286-287.

[22]? 徐志明，祁慧，李豐平.乙二胺四乙酸三鉀導致血小板假性減少分析[J].檢驗醫學與臨床，2008，5（9）：539-540.

[23]? 易青.血常規檢測中血小板假性減少3例[J].國際檢驗醫學雜志，2013，34（9）：1197.

[24]? 朱海燕.EDTA-K2抗凝劑導致假性血小板減少的原因探計分析[J].淮海醫藥，2013，31（5）：433-434.

[25]? 陳偉，涂慧英，李月，等.3種血小板計數方法的比較研究[J].重慶醫學，2015，44（26）3678-3679.

（收稿日期：2018-09-25）