豬塞內卡病毒感染的最新研究進展（續2）

唐彩琰

摘 要：主要介紹塞內卡病毒的致病性證據、免疫應答和診斷等。

關鍵詞：豬；塞內卡病毒；水皰性疾病

3 塞內卡病毒的致病性證據

9周齡和4月齡豬試驗性感染當代塞內卡病毒毒株的結果顯示了該病毒與豬水皰病之間的關聯。在這兩項研究中，塞內卡病毒的潛伏期均為4 d～5 d。在感染急性期，扁桃體是該病毒復制的主要部位之一。病毒血癥期短，持續7 d，接種后第3天血清中的塞內卡病毒基因組拷貝可達到峰值（約1×106.5/mL），隨后病毒滴度不斷減小，直至30 d后檢測不到病毒。

塞內卡病毒可引起豬的急性自限性水皰性疾病。接種豬在其鼻吻部、唇部和/或蹄部（尤其是在冠狀帶和/或趾間間隙）出現病變。試驗性感染塞內卡病毒的豬的其他臨床表現包括嗜睡、跛行和厭食。感染期間可觀察到多病灶深部潰瘍和皮膚糜爛/擦傷，最終形成陳年病變。

試驗感染的豬僅在扁桃體、脾、淋巴結和肺上可見組織顯微鏡改變，淋巴組織有輕度到中度增生，多病灶輕度肺不張，淋巴細胞、血漿細胞和肺部巨噬細胞偶發彌漫性充血并伴有多病灶輕度血管周積聚。研究顯示塞內卡病毒在組織中分布廣泛，在疾病感染的急性期，病毒RNA和感染性顆粒在肺、縱隔和腸系膜淋巴結、肝臟、脾臟、小腸和大腸以及扁桃體中均可檢測到。恢復期豬的不同器官（除肺、心臟和肝臟外）的塞內卡RNA呈陽性，但在以后的感染中不能從這些組織中分離到活的病毒顆粒。

根據試驗研究，塞內卡病毒可持續排毒28 d。該病毒可經口腔、鼻腔分泌物和糞便排出。排毒高峰期出現在豬感染后1 d～5 d，相對于鼻腔分泌物和糞便而言，口腔分泌物中的病毒量更高。此外，口腔分泌物、糞便和鼻腔分泌物分別在21 DPI（感染后天數Days Postinfection，DPI）、10 DPI和7 DPI成功分離到塞內卡病毒的感染性顆粒。自然和試驗性感染塞內卡病毒的結果表明，感染了塞內卡病毒的豬的口腔/鼻腔分泌物、糞便以及尿液都可能會通過使用相同設施的豬之間的接觸直接傳播病毒，或通過病毒污染環境間接傳播。然而，我們還需要進一步研究來證實這些分泌物/排泄物在田間條件下對塞內卡病毒傳播的作用。

4 對塞內卡病毒的免疫應答

目前，只有少數研究評價了宿主對塞內卡病毒感染的免疫應答。這些研究表明，田間條件下受感染和未受感染的母豬以及長期接受試驗挑戰的育肥豬，塞內卡病毒感染可誘導早期免疫反應。無論疾病的臨床表現如何，塞內卡病毒感染后約5 d就可發生血清轉化。隨著中和抗體滴度增加，疾病的嚴重程度、組織病毒載量、病毒血癥和病毒脫落降低，這表明抗體反應可從體循環和大多數器官、排泄物和分泌物中逐漸清除塞內卡病毒。

塞內卡病毒特異性免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）抗體的最大濃度持續約10 d（從5 DPI到15 DPI），隨后血清IgM濃度從21 DPI下降到無法檢測的滴度。相比之下，塞內卡病毒特異性IgG應答出現較晚，21 DPI后有強積極應答。

自然感染塞內卡病毒的豬其病毒抗體滴度不同，間接熒光抗體（Indirect Flurescent Antibody，IFA）試驗或病毒中和（Virus Neutralization，VN）試驗檢測到的滴度在160～2 880之間，但巴西臨床感染動物的VN試驗可檢測到更高的滴度（≥4 096）。

5 塞內卡病毒診斷

目前許多診斷測試可用于檢測塞內卡病毒感染和/或其與病變和疾病的關聯。除新一代測序技術（Next-generation Sequencing，NGS）外，傳統PCR和定量RT-PCR（qRT-PCR）分子檢測是最常用的技術。分子檢測，尤其是qRT-PCR，是任何水皰性疾病的金標準，因為這種方法快速、敏感且特異，能夠快速并準確地診斷水皰性疾病，包括從不同生物樣本中檢測塞內卡病毒基因組。分子學檢測診斷塞內卡病毒的一個缺點是，由于塞內卡病毒感染的進程不同，不同生物樣本中病毒脫落和/或載量不同導致檢測結果不一致。因此，應收集多種樣本，包括血清、扁桃體、糞便、口腔和水皰液，通過分子檢測對塞內卡病毒進行篩選。

目前可用的其他診斷工具包括免疫組化和原位雜交，這兩種方法分別用來鑒定組織樣本中的特定病毒抗原和核酸。不同研究組已成功使用這兩種技術診斷塞內卡病毒相關疾病。雖然僅有組織病理學評價不能直接判定為塞內卡病毒感染，但這項技術的結果可指導選擇適合的組織/器官樣本進行免疫組化和原位雜交分析。

間接和競爭性酶聯免疫吸附試驗（Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA）、IFA和VN試驗均可用于豬塞內卡病毒的抗體檢測篩選。抗體檢測分析的主要優點是具有在流行病學研究、大規模診斷程序和/或流行病學監測中處理大量樣本的能力，表明豬群過去有病毒暴露和/或存在史。

無論選擇何種檢測方法，在臨床上都難以區分豬塞內卡相關疾病和經典病毒性囊泡感染，尤其是口蹄疫。對于主要的生豬生產國，出現臨床病史和/或表明可能存在水皰性疾病的病變時，都需要進行完整的水皰性外來動物疾病調查，因為塞內卡病毒感染可能會對快速報告豬口蹄疫產生不利影響?！酢?/p>

（待續）

原題名：Update on senecavirus infection in pigs（英文）

原作者：Raquel A. Leme、Alice F. Alfieri和Amauri A. Alfieri（巴西）