彩葉新品種‘黃金甲’及其組培繁育技術

孟偉芳 汪健 張家勛

摘要：以‘黃金甲帶芽莖段作為外植體，用WPM固體培養基添加不同種類、濃度的激素，經過初代培養、繼代培養I、繼代培養Ⅱ、生根培養、煉苗，約6個月時間，使每個單芽成苗10～15個完整植株，并能在自然環境下生長。

關鍵詞：‘黃金甲;WPM培養基;激素;組培

‘黃金甲為衛矛屬北海道黃楊（Euonymus japoni-CUS“Cuzhi”）的變異品種，已獲得國家林業局植物新品-種權，葉片中間翠綠，四周金黃。‘黃金甲株型緊湊，色澤鮮亮，抗寒性與北海道黃楊基本一致，可耐23.9°C低溫，在北方寒冷地區有很大市場潛力。目前，‘黃金甲主要靠嫁接進行繁殖，費時費力且繁殖系數較低，其原種北海道黃楊的組培快繁技術已有所突破，因此，研究‘黃金甲組培繁育技術，以實現‘黃金甲的快速繁殖。

1材料選擇

春夏季選用‘黃金甲幼嫩帶芽莖段作為外植體，秋冬季選用飽滿冬芽作為外植體。

2培養條件

培養基采用WPM固體培養基，瓊脂質量濃度7g/L，蔗糖質量濃度30g/L，pH值為5.8，光照時間12h/d，光照強度2500～3500Lx，培養溫度為24～26℃，相對濕度45%～50%。

3消毒處理

材料采集后，去掉葉片，保留部分葉柄，然后用紗布包好放自來水下流水沖洗2h，后用軟毛刷蘸取含有0.1%NaCIO的溶液清洗外植體，消毒液中加入5～6滴吐溫80。

外植體為帶芽莖段，完成清洗步驟后，在超凈工作臺內依次用75%酒精消毒20s、0.1%HgCl消毒4min，再用滅菌水清洗5～6次，每次不少于2min。然后切成有一對芽長0.5～I.0cm小段，進行接種。

外植體為越冬芽，需在超凈工作臺內剝去芽外部數層芽鱗，再進行消毒處理，才可接種。

4生長與分化情況

4.1初代培養

在WPM培養基中，添加KT 1.0mg/L、6-BA0.5mg/L、NAA 0.2mg/L，將切好的外植體接到上述培養基中，每瓶接2個外植體，接120瓶。接種10d后，芽眼萌動，30d后，葉片展開，大部分長出3～5片嫩葉，開始轉入繼代培養I。

4.2繼代培養I

繼代培養I培養基配方：WPM+KT 1.0mg/L+TDZ0.05mg/L+NAA 0.1mg/L，從初代培養中選擇生長較好的外植體，每瓶接2個，接90瓶。接種30d后，從原芽體位置逐漸長出大量叢生芽，60d后芽眼分化完成，不再增多也不再長大，開始轉入繼代培養Ⅱ。

4.3繼代培養Ⅱ

繼代培養Ⅱ培養基配方：WPM+KT0.5mg/L+GA30.1mg/L+NAA0.1mg/L，每瓶接2個外植體，接90瓶。接種30d后，叢生芽顯著長大，節間伸長。

4.4生根培養

生根培養基配方：WPM+NAA 0.1mg/L，選取包含2對以上側芽，長3～4cm的叢生芽，將其剪下，插入生根培養基中，30d后無根枝條莖段下部長出大量不定根。

4.5煉苗

選取生長健壯、根系發達的組培苗，先打開瓶蓋通風2d，使小苗逐漸適應外界環境，再小心取出，不要傷到根系，清水沖洗干凈根部附著的培養基，晾干水分后，栽植至滅過菌的培養土內，培養土按泥炭：珍珠巖：蛭石=1：1：1的比例進行配制。栽植后噴施適量濃度多菌靈和代森錳鋅混合液，放置背光處，覆膜保濕，保持溫度在15～20℃之間，約20d后，新根長出，芽眼開始抽出新葉，說明煉苗已經成活，可將苗挪至向陽處，并逐漸去掉覆膜，使苗適應外界環境，1個月后即可轉入正常養護。如果發生爛苗或者真菌蔓延，則要及時挖掉死苗及周圍土壤，然后噴施高濃度多菌靈進行防治，以免影響其它幼苗成活。

5結論

‘黃金甲從接種到成苗大約需要半年時間，平均1個單芽可成苗10～15個，而傳統嫁接繁殖單芽成苗平均0.8～0.9個，組培的增殖系數是傳統嫁接技術的10多倍。可見，組培將是‘黃金甲最快擴繁方式。

6意義與進展

‘黃金甲是北海道黃楊的彩葉變種，屬于葉綠素變異形成的新品種，本研究中的組培繁殖技術，沒有形成愈傷組織，就不會出現返祖或是黃化苗現象。這種技術由叢生芽到生根，長成完整植株，保持‘黃金甲的優良性狀，還提高增殖系數，繁殖周期約6個月，為‘黃金甲的產業化生產提供了更加有效的途徑。此種組培繁育技術的應用，也為其他彩葉植物的快繁提供借鑒。