劉金威 阮友琴 祝英杰



【摘要】 目的:探討外周血CK7mRNA、趨化因子CXCL12表達水平與卵巢癌的組織分級、病理分期及腹膜后淋巴結轉移等的關系。方法:本次數據分析對象昆明醫科大學第三附屬醫院婦瘤科從2014年7月-2016年5月納入且收治的44例卵巢癌住院患者的外周血標本,將其作為試驗組,良性組為15例上皮性卵巢良性腫瘤患者外周血標本,健康組為18例體檢健康女性外周血標本。通過實時熒光定量PCR技術檢測外周血中CK7mRNA的表達水平,采用酶聯免疫吸附試驗測定外周血中CXCL12的含量。結果:在試驗組、健康組及良性組中外周血CK7mRNA的表達中,試驗組最高,其次為良性組,健康組最低(P<0.05);在試驗組、健康組及良性組中外周血CXCL12檢測中,試驗組最高,其次為良性組,健康組最低(P<0.05)。試驗組腹膜后淋巴結有轉移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表達高于無轉移患者,差異有統計學意義(P<0.05),外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴結有轉移患者中表達較高,差異有統計學意義(P<0.05)。CK7mRNA聯合CXCL12檢測在淋巴結轉移中差異顯著(P<0.05)。卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表達之間不存在相關性(r=0.222,P=0.148)。結論:在卵巢癌患者外周血中CK7mRNA及CXCL12表達對比健康女性、卵巢良性上皮性腫瘤患者顯著更高,且兩者之間極有可能對卵巢癌的發展和發生過程進行參與。評估卵巢癌患者術前病情和腹膜后淋巴結轉移預測中可以外周血檢測CK7mRNA和CXCL12指標為參考依據。
【關鍵詞】 卵巢癌; 外周血; CK7mRNA; CXCL12
doi:10.14033/j.cnki.cfmr.2019.04.038 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805(2019)04-00-03
在女性生殖系統惡性腫瘤中,卵巢惡性腫瘤是女性生殖系統惡性腫瘤中常見的一類惡性腫瘤,發病率較高,且惡性程度較大[1]。卵巢惡性腫瘤患者中大約有90%可能發生上皮性癌。上皮細胞中存在細胞角蛋白(CK)。健康人外周血不存在細胞角蛋白表達,如外周血存在陽性細胞角蛋白基因表達[2],此時表示外周循環中已經進入惡性腫瘤細胞。基于此,本文就對卵巢癌患者外周血CK7mRNA、CXCL12檢測的臨床意義進行分析,具體報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
本次研究對象為昆明醫科大學第三附屬醫院婦瘤科2014年7月-2016年5月收治且研究的住院卵巢腫瘤患者的外周血標本59例,最大年齡73歲,最小年齡14歲,平均(48.62±3.21)歲。卵巢腫瘤患者中良性患者15例,惡性患者44例;惡性患者臨床分期:Ⅰ期患者8例,Ⅱ期患者8例,Ⅲ期患者19例,Ⅳ期患者9例;惡性患者病理分級:5例高分化,6例中分化,33例低分化。卵巢惡性腫瘤患者中有28例存在淋巴結轉移,
16例無淋巴結轉移。收集2014年7月-2016年5月18例體檢健康女性志愿者外周血標本為對照組,最大年齡50歲,最小年齡18歲,平均(40.21±6.211)歲。
1.2 方法
1.2.1 試劑 選取北京天根生化科技有限公司研發且提供的新鮮血總RNA提取試劑盒,美國BIO-RAD公司研發且提供的q PCR試劑盒和c DNA合成試劑盒。光晟生物科技股份有限公司研發且提供的人SDF-1α ELISA試劑盒。
1.2.2 檢測CK7mRNA及CXCL12 實施外周血總RNA的提取及逆轉錄;q PCR采用15 μl的反應體系進行q PCR檢測,在美國ABI-7500實時熒光定量PCR儀上進行擴增及檢測,其反應條件為:95 ℃預變性3 min,95 ℃變性15 s,60 ℃退火及延伸30 s,40個循環進行。實施CXCL12的檢測:使用人SDF-1α ELISA試劑盒對血清進行酶聯免疫吸附實驗(ELISA)[3-4],全部操作嚴格按照說明書要求進行,操作結束時觀察顏色變化,試驗完畢后采用全波長酶標儀進行測定。
1.3 統計學處理
使用SPSS 17.0軟件處理59例住院卵巢腫瘤患者的外周血標本和18例體檢健康女性志愿者外周血標本涉及的數據,計量資料以(x±s)表示,采用卡方t檢驗,多組比較采用方差分析,多組間兩兩比較采用LSD-t進行檢驗,計數資料以率(%)表示,采用字2檢驗,采用Spearman等級相關分析兩變量間相關性,P<0.05為差異有統計學意義。
2 結果
2.1 三組CK7mRNA、CXCL12指標在外周血中的表達情況對比
在試驗組、健康組及良性組中外周血CK7mRNA的表達中,試驗組最高,其次為良性組,健康組最低(P<0.05);在試驗組、健康組以及良性組中外周血CXCL12檢測濃度中,試驗組最高,其次為良性組,健康組最低(P<0.05),見表1。
2.2 卵巢癌臨床病理特征和外周血CXCL12、CK7mRNA表達
試驗組腹膜后淋巴結有轉移的卵巢癌住院患者外周血CK7mRNA的表達高于無轉移患者,差異有統計學意義(P<0.05),外周血CXCL12在病理分期Ⅲ+Ⅳ期、腹膜后淋巴結有轉移患者中表達較高,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。
2.3 CXCL12和CK7mRNA之間的相關性
卵巢癌患者外周血中CXCL12和CK7mRNA表達之間不存在相關性(r=0.222,P=0.148)。
2.4 CK7mRNA聯合CXCL12檢測結果與卵巢癌臨床病理特征
試驗組卵巢癌患者CXCL12檢測結果中位數(3.25)和CK7mRNA表達水平中位數(8.85)設置為CUT OFF值,聯合CK7mRNA與CXCL12檢測結果對比CUT OFF值視更高顯示為陽性,對比CUT OFF值更低顯示為陰性。CK7mRNA聯合CXCL12檢測在淋巴結轉移中差異顯著(P<0.05),見表3。